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11.用 mRNA 纯 化 试 剂 盒（Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) 将 Poly.(A )+ RNA从总R N A 中分离出来（见注释5)。####（2） c D N A 文 库 的 构 建1.取1. 5 〜7. 5 μg poly (A )<sup>+</sup> R N A 做模板，用 带 有 一 个 Xho Ⅰ 位 点 的 oligo-(dT)<SUB>18</SUB>引物扩增，用 Superscript H (Invitrogen， Groningen, Netherlands) 反转录酶52°C 反 应 30 min合成第一链（见注释6)。2.第二链合成结束后，用 D N A 补 平 试 剂 盒（DNA Blunting Kit， TaKaRa Bio,Ohtsu， Japan) 将 cDNA末端补平，两端各加一......阅读全文
除 cDNA 微阵列外，基于尼龙膜支持物的 cDNA 宏阵列方法是又一被广泛应用的大规模基因表达数据的收集方法。从新基因的发现到基因表达谱的分析， cDNA 宏阵列被应用于分子生物学研究领域的各个方面。尽 管 cDNA 宏阵列的点阵密度低于微阵列，但由于应用灵敏度较高的同位素标记的 cDNA 探针，
实验步骤 ##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基： I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基（GibcoBRL， Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥 料（Hypon