NEPA21进行原代神经元细胞悬浮／原位贴壁转染均获高效
神经元(Neuron)是一种高度特化的细胞，是神经系统的基本结构和功能单位之一，它具有感受刺激和传导兴奋的功能。 通常来说，神经元细胞属于终末分化细胞，属于非常难转染的细胞类型。文献表明，传统的转染方法，如脂质体法对于原代神经元细胞转染效果不佳，而一些新型的电转染仪，虽然能为神经元细胞带来福音，但需要使用专门的神经元细胞转染试剂盒，且对神经元细胞的原位贴壁转染仍然束手无策。 NEPA21不需要转染试剂盒，利用优化的程序即可达到高的转染效率;配备专用的贴壁电极，可完美实现神经元细胞的原位贴壁转染，为神经元细胞的转基因研究带来了便利。 2012年6月，华粤行(我司)在山东大学开展了原代大鼠大脑皮层神经元细胞的试用活动，针对原代神经元细胞，进行了悬浮转染及原代贴壁转染，均获得了较高的转染效率和细胞存活率。实验者对NEPA21的转染效果给予了较高的评价。 GFP标准质粒转染原代神经元细胞(......阅读全文
神经细胞原代培养
实验方法原理 神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境，获得状态良好，纯度较高细胞的方法 。 由于脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。实验材料 动物组织试剂、试剂盒 消化液(0.25%胰蛋白酶+O.04%的EDTA)完全培养基(DMEM+
神经细胞原代培养实验
实验方法原理神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境，获得状态良好，纯度较高细胞的方法 。 脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。实验材料动物组织试剂、试剂盒消化液(0.25%胰蛋白酶+O.04%的EDTA)完全培养基(DMEM+10%胎牛
神经细胞原代培养实验
实验方法原理 神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境，获得状态良好，纯度较高细胞的方法 。 脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。
神经细胞原代培养实验
实验方法原理 神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境，获得状态良好，纯度较高细胞的方法 。 脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。
原代神经细胞培养操作步骤
1．取出生后1-3天内的大鼠脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍体积的Hank液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。 2．为排除脂肪成分和其它碎块，把悬液注入离心管中，在室温直立5～10分钟后，细胞或细胞团块自然下沉，脂肪等
原代神经细胞培养操作步骤
1．取出生后1-3天内的大鼠脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍体积的Hank液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。 2．为排除脂肪成分和其它碎块，把悬液注入离心管中，在室温直立5～10分钟后，细胞或细胞团块自然下沉，脂肪等
小鼠神经元原代细胞培养步骤
小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤： 1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min，解剖出完整鼠脑； 2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗，用眼科剪将皮质反复剪切成碎块； 3、 移入培养皿中，吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1，37℃培养箱中消化30min； 4、
原代神经细胞培养方法－Neuron－Cell－Culture
1. Preparation of coverslips1.1- Mass cultureOur standard mass cultures are plated on astrocytes. Those, in turn, are plated on glass coverslips pre-
原代神经元培养
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution - pdfDM/KY - pdfOptim
背根神经节细胞的原代培养实验
实验方法原理原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。原代培养离体时间短，遗传性状和体内细胞相似，适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞
背根神经节细胞的原代培养实验
实验方法原理 原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。原代培养离体时间短，遗传性状和体内细胞相似，适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍
小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法
原代小知识——小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法海马体主要负责记忆和学习，日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起，由细胞体和细胞突起构成。小鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织，因为海马神经元细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞
背根神经节细胞的原代培养实验
实验方法原理 背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)细胞起源千神经峙，外源性神经营养因子(NGF)能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。目前，利用培养的DRG细胞进行轴突生长发育的研究，是最为经典和常用的方法之一。实验材料 孵化8-12d的鸡胚。孕15d及新生1-3d的大
神经元原代培养方法
从孕17-18天的雌鼠的胎儿分离神经元细胞。孕雌鼠麻醉然后解剖，胎儿收集到HBSS-1中然后快速断头。剥离脑膜和白质后，大脑皮质收集入 HBSS-2 液中机械磨碎。皮质碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37°C消化15分钟。胰酶消化后，细胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液冲洗两
原代细胞组成结构
原代细胞组成结构1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组
原代细胞的作用
原代细胞可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数原代细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。原代细胞能够高效转染绝大多数原代细胞
原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打
原代细胞的释义
动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞，再生长于培养皿中。大多数组织可以制备原代细胞，但生长的快慢及难易程度不一。肾和睾丸最常用，甲状腺细胞生长较慢，只用于某些特定的病毒如猪传染性肠胃炎病毒的培养。
原代细胞分离技术
1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。 3) 用培养基重悬，调整适当细胞浓度后分瓶培养。 4) 如选用悬液中某种细胞，
原代细胞纯化方法
（1）胰蛋白酶 纯化法 ●在去除不需要的组织后，使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3~4 mm小片，通过悬浮在无钙镁的平衡盐溶液中清洗组织碎片。让组织碎片沉淀，去除上清液。重复清洗2到3次。 ●将盛有组织碎片的容器置于冰上，去除残留的上清液。加入0.25%溶解在无钙镁的平衡盐溶液中的胰蛋
原代细胞的取材
一、取材的基本要求（1）取材要注意新鲜和保鲜新鲜组织易于培养成功，取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞，尽快入箱培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、
原代细胞复苏技术
. 原代细胞冻存复苏技术简介在ELISPOT检测的应用中，往往需要用到冻存的淋巴细胞样品作为检测细胞。由于ELISPOT检测的是细胞的免疫功能，不仅仅需要保持细胞的存活率，而且还要保证细胞的功能不发生变化。传统的细胞冻存方法通常是为了保存细胞株，对细胞存活率的要求不高，更没考虑保持细胞原有的免疫状态
细胞原代培养
一、原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。二、仪器、材料及试剂仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术
原代细胞永生化？
原代细胞因它可以模仿人体的新陈代谢逐日成为科研学者青睐的研究工具，但是原代细胞曾是出了名的难培养，需要耗费大量的时间、成本和资源。即使细胞捱过了极其严苛的解离步骤，但污染仍然是一个隐患，有可能让几天的成果化为乌有。此外还存在其他细胞污染、生长缓慢以及数量有限的问题。 细胞系因容易培养且产量可观
什么是原代细胞
原代细胞（primary culture cell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
原代细胞的培养
原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。[1] 最常用的原代细胞的培养有组织块培养和分散细胞培养
原代细胞分离技术
实验概要本文介绍了原代细胞分离技术，包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的P
原代细胞应用困局
经过一次传代后，原代细胞培养物就会成为二级细胞培养物，也称为细胞株。然而，尽管称为细胞株，但其寿命是有限的（除非如前所述永生化）。这种有限的分裂能力体内的细胞相似，一旦细胞在体内完全分化以发挥其特殊功能，细胞将停止增殖-这是固有的癌症保护性衰老过程。此外，某些原代细胞有丝分裂后，无论是在体内或体
什么是原代细胞？
原代细胞（primary culture cell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物
原代细胞鉴定技术
PriCells-原代细胞鉴定技术 一、形态学鉴定1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2. 细胞染色检查 ：a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养；b) 待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥；c) 用PBS/甲醇（1:1）固定15分钟；d) 弃固定