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【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记

RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求: 1. 操作简单,灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RNA活性 4. 对酶促反应活性无影响或影响不大 5. 检测方法具有高度灵敏性和高度特异性 6. 标记物对人体无害 RNA标记方法: 按反应机制分如下四类:直接标记法,加尾标记法,基于逆转录反应的标记方法,基于RNA克隆扩增的标记方法。 常用于RNA标记的方法按标记物性质分为: 放射性同位素标记:32P、35S、3H 非放射性标记:半抗原荧光素化学发光物质 生物素 用生物素标记RNA的方法常见的是用生物素与UTP结合形成Biotin-UTP,以......阅读全文

【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记

  RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。   理想的RNA标记方法应符合以下要求:   1. 操作简单,灵敏度高   2. 不影响碱基配对的特异性

【锐赛小课题】miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳

  动物总RNA的提取与电泳   I. 实验目的与要求   A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。   B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。   II. 实验原理和背景知识   A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物

miRNA研究之RNA标记

RNA标记RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求:1.  操作简单,灵敏度高2.  不影响碱基配对的特

【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提

  锐赛小课堂1222-158   一、贴壁细胞蛋白提取   A   1..将水浴锅的温度调至100℃,等水浴锅达到100℃温度后,取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。   2.将缓冲液(1Xloading buffer)置于100℃水浴锅中预热10min。   (loding buffe

【锐赛小课堂】荧光原位杂交技术实验心得

  锐赛小课堂1221-157   荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。   FISH 实验

【锐赛小课堂】2015年癌症领域突破性研究TOP10

  长期以来,科学家们在揭示癌症发病机制、开发治疗和预防癌症新型方法上花费了大量的精力,随着研究的深入及多种机制的发现,科学家们让癌症变成了一种可控的疾病。   近日,来自美国德州农工健康科学中心研究所的科学家就发现西兰花中名为萝卜硫素的提取物或许可以帮助治疗癌症;又有研究者发现冥想也可以帮助癌症

锐赛小课堂:关于IHC检验的分析验证原则的指南推荐

  日前,美国 CAP2014 年会上,美国病理家学会及实验室质量中心发布了一项关于 IHC 检验的分析验证原则的指南推荐(Principles of Analytic Validation of Immunohistochemical Assays),原文发表于近期 Arch Pathol Lab

【锐赛小课堂】抢救必备教程:关键时刻你会输血吗?

  锐赛小课堂0911-135   输血作为临床上常用的替代性治疗手段,起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱,甚至多器官脏器功能衰竭,输血不足又不能起到预期的治疗效果。   那么如何输血才能把血用到刀刃上呢?   血制品的种类

【锐赛小课堂】如何看流式细胞术结果中的图

  锐赛小课堂1217-156   FCM数据的存贮的方式是FCS2.0(flow cytometry standard),采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析,但缺乏直观性,数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种;由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。

【锐赛小课堂】抢救必备教程:关键时刻你会输血吗?

  锐赛小课堂0911-135   输血作为临床上常用的替代性治疗手段,起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱,甚至多器官脏器功能衰竭,输血不足又不能起到预期的治疗效果。   那么如何输血才能把血用到刀刃上呢?   血制品的种类