【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提
锐赛小课堂1222-158 一、贴壁细胞蛋白提取 A 1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。 2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。 （loding buffer： 是5Xloding buffer用纯水稀释到1Xlodingbuffer。厂家：碧云天；货号： P0015L） 3.弃去细胞培养基，用PBS洗两遍。 4.取预热好的缓冲液1X loding加入到去除细胞培养液的细胞中，用细胞刮将细胞挂下收集到EP管。 （加入loding buffer的体积建议量，以细胞密度长到70%-80%，6孔板每孔加入120ul；150px皿200ul；250px皿300ul） 5.将收集好的细胞液转移到EP管中，立即放入100℃煮15min。 6. B 1.倒掉培......阅读全文
【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提
锐赛小课堂1222-158 一、贴壁细胞蛋白提取 A 1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。 2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。 （loding buffe
WB生物样本总蛋白抽提
一、贴壁细胞蛋白提取A1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。（loding buffer： 是5Xloding buffer用纯水稀释到1Xlodingbu
【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性
【锐赛小课堂】荧光原位杂交技术实验心得
锐赛小课堂1221-157 荧光原位杂交技术（ fluorescence in situ Hybridization,FISH）是一种非放射性原位杂交方法，用特殊的荧光素标记核酸探针，在细胞或组织切片标本上进行杂交，以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。 FISH 实验
【锐赛小课堂】如何看流式细胞术结果中的图
锐赛小课堂1217-156 FCM数据的存贮的方式是FCS2.0（flow cytometry standard），采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析，但缺乏直观性，数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种；由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
锐赛小课堂0911-135 输血作为临床上常用的替代性治疗手段，起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱，甚至多器官脏器功能衰竭，输血不足又不能起到预期的治疗效果。 那么如何输血才能把血用到刀刃上呢？ 血制品的种类
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
锐赛小课堂0911-135 输血作为临床上常用的替代性治疗手段，起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱，甚至多器官脏器功能衰竭，输血不足又不能起到预期的治疗效果。 那么如何输血才能把血用到刀刃上呢？ 血制品的种类
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
锐赛小课堂0911-135 输血作为临床上常用的替代性治疗手段，起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱，甚至多器官脏器功能衰竭，输血不足又不能起到预期的治疗效果。 那么如何输血才能把血用到刀刃上呢？ 血制品的种类
锐赛小课堂：关于IHC检验的分析验证原则的指南推荐
日前，美国 CAP2014 年会上，美国病理家学会及实验室质量中心发布了一项关于 IHC 检验的分析验证原则的指南推荐（Principles of Analytic Validation of Immunohistochemical Assays），原文发表于近期 Arch Pathol Lab
【锐赛小课堂】2015年癌症领域突破性研究TOP10
长期以来，科学家们在揭示癌症发病机制、开发治疗和预防癌症新型方法上花费了大量的精力，随着研究的深入及多种机制的发现，科学家们让癌症变成了一种可控的疾病。 近日，来自美国德州农工健康科学中心研究所的科学家就发现西兰花中名为萝卜硫素的提取物或许可以帮助治疗癌症；又有研究者发现冥想也可以帮助癌症
蛋白抽提指南（TRIZOL）
在用酒精沉淀出DNA（DNA抽提中的步骤一）后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通过蛋白[质]印迹法对样品中某一特殊的蛋白质进行分析。试剂所需，但没有随同提供的物品：* 异丙醇* 0.3M盐酸胍(用95%酒精配制)* 无水乙醇* 1% SDS1.蛋白质的沉淀用异丙醇从苯酚—乙醇上清中
【锐赛小课题】miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳
动物总RNA的提取与电泳 I． 实验目的与要求 A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。 B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。 II． 实验原理和背景知识 A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物
样本抽提中RNA降解的解决方法
从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路，但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素，耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本，做个RNA抽提还常常……降解样本的RNA完整度低，长链RNA变成了短链，在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失，导致芯片结果的不准确。遇到R
样本抽提中RNA降解的解决方法
从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路，但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素，耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本，做个RNA抽提还常常…… 降解样本的RNA完整度低，长链RNA变成了短链，在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失，导致芯片结果的不
植物总DNA的快速少量抽提实验
实验方法原理 CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，植物材料在CTAB的处理下，结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物，此复合物在高盐（>0.7 mM）浓度下可溶，并稳
植物总DNA的快速少量抽提实验
CTAB法 实验方法原理 CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，植物材料在CTAB的
植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法：经典方法。效果较好，污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法：较为简易，提取的为全基因组，但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法：4、PCR研究的快速提取法：以上两者方法简单，快速，但污染多，不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法：多
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
蛋白质的抽提实验
实验方法原理 蛋白质在细菌中表现后，以反复的冷冻-解冻方法打破细胞，再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来，此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。 实验材料 转
蛋白质的抽提实验
实验材料 转型菌株pQG11 M15 [pREP] 单一菌落试剂、试剂盒 LB amp kan液体培养基IPTGNa3PO4·12H2ONaClEDTATriton X-100液氮仪器、耗材 恒温震荡培养箱高速冷冻离心机离心管冰筒实验步骤 一、仪器用具恒温震荡培养箱37℃；高速冷冻离心机及离心管 （
水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料，依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的：了解植物 DNA 抽提的主要方法，掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂： 水稻 叶片，1.5 × CTAB ，氯仿 / 异戊醇 (24:1) ，
核酸抽提
mRNA的分离 与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等，1971;At Leder，1972）。在构建cDNA文库时， 必须经上述纯化步骤制
核酸抽提
最糟糕的心态 - 实验失败了，抱怨试剂不好。实验人员本来是应该拥有修正主义、机会主义、怀疑论等诸多“不完美的”意识，所以一定要用“完美的”自我批评意识来平衡。我为什么没有一双慧眼选择可靠的供应商？我为什么不做预实验检测所购试剂？最糟糕的知识 - RNase A 的作用。RNase A 是内切酶，内切
DNA抽提
DNA抽提（主要内容如下）· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isola
血与泪的RNA抽提抽提经验
对大部分实验人员来说，RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上，现有的 RNA 抽提方法/试剂，如果用于从培养细胞中抽提 RNA，比抽提基因组 DNA 更方便，成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提，总会碰到问题呢？组织 RNA 抽提失败的两大现象是： RNA 降解和组
植物总DNA的快速少量抽提实验——CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料，依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的DNA。实验目的是了解植物DNA抽提的主要方法，掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。实验方法原理CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，
RNA抽提经验
对大部分实验人员来说，RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上，现有的 RNA 抽提方法/试剂，如果用于从培养细胞中抽提 RNA，比抽提基因组 DNA 更方便，成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提，总会碰到问题呢？ 组织 RNA 抽提失败的两大现象是： RNA 降
脂肪抽提对水解蛋白的影响
由于鱼类的蛋白质含量都是比较高的他们所含有的氨基酸和人类所需要的氨基酸成分是比较接近的，因为这类氨基酸的吸收率是比较高的，因此我们会经常说多吃鱼类是补充蛋白质最好的途径。鱼类除了蛋白质含量高以外，还有就是脂肪酸的含量也是比较高的，这些我们需要通过脂肪抽提仪来完成测定，这样对我们进行鱼类营
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白质溶解度大，而其他杂蛋白质溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白质。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白质溶解度大，而其他杂蛋白质溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白质。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可