【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RNA活性 4. 对酶促反应活性无影响或影响不大 5. 检测方法具有高度灵敏性和高度特异性 6. 标记物对人体无害 RNA标记方法： 按反应机制分如下四类：直接标记法，加尾标记法，基于逆转录反应的标记方法，基于RNA克隆扩增的标记方法。 常用于RNA标记的方法按标记物性质分为： 放射性同位素标记：32P、35S、3H 非放射性标记：半抗原荧光素化学发光物质 生物素 用生物素标记RNA的方法常见的是用生物素与UTP结合形成Biotin-UTP，以......阅读全文
【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性
【锐赛小课题】miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳
动物总RNA的提取与电泳 I． 实验目的与要求 A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。 B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。 II． 实验原理和背景知识 A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物
miRNA研究之RNA标记
RNA标记RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求：1. 操作简单，灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响R
【锐赛小课堂】荧光原位杂交技术实验心得
锐赛小课堂1221-157 荧光原位杂交技术（ fluorescence in situ Hybridization,FISH）是一种非放射性原位杂交方法，用特殊的荧光素标记核酸探针，在细胞或组织切片标本上进行杂交，以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。 FISH 实验
【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提
锐赛小课堂1222-158 一、贴壁细胞蛋白提取 A 1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。 2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。 （loding buffe
【锐赛小课堂】2015年癌症领域突破性研究TOP10
长期以来，科学家们在揭示癌症发病机制、开发治疗和预防癌症新型方法上花费了大量的精力，随着研究的深入及多种机制的发现，科学家们让癌症变成了一种可控的疾病。 近日，来自美国德州农工健康科学中心研究所的科学家就发现西兰花中名为萝卜硫素的提取物或许可以帮助治疗癌症；又有研究者发现冥想也可以帮助癌症
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
锐赛小课堂0911-135 输血作为临床上常用的替代性治疗手段，起到了补充血容量、改善循环、增强免疫力和凝血功能等诸多神奇作用。但输血过多会使机体出现各种酸碱平衡紊乱，甚至多器官脏器功能衰竭，输血不足又不能起到预期的治疗效果。 那么如何输血才能把血用到刀刃上呢？ 血制品的种类
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
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【锐赛小课堂】如何看流式细胞术结果中的图
锐赛小课堂1217-156 FCM数据的存贮的方式是FCS2.0（flow cytometry standard），采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析，但缺乏直观性，数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种；由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。
锐赛小课堂：关于IHC检验的分析验证原则的指南推荐
日前，美国 CAP2014 年会上，美国病理家学会及实验室质量中心发布了一项关于 IHC 检验的分析验证原则的指南推荐（Principles of Analytic Validation of Immunohistochemical Assays），原文发表于近期 Arch Pathol Lab
【锐赛小课堂】抢救必备教程：关键时刻你会输血吗？
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miRNA研究之RNA提取试剂的选择
RNA提取试剂的选择RNA提取对于科研人员来说并不陌生，但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上，现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要，为什么往往提取的RNA却容易失败呢？RNA提取失败的主要现象有三个：提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟
小分子RNA（miRNA）简介
一、什么是小分子RNA（ MicroRNA）? MicroRNA (miRNA) 是一类长度约为20-24个核苷酸长度的具有调控功能的非编码RNA。 miRNA 主要参与基因转录后水平的调控。这些miRNA基因首先在细胞核内转录成原始miRNA转录本（primary transcrip
miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳
动物总RNA的提取与电泳I．实验目的与要求A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。II． 实验原理和背景知识A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物大分子，如mRNA,它携带了DNA的全部编码信息。
电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂，本期我们来分享如何选择电穿孔的波形，各波形需要设置的参数有哪些？以及两种波形之间的转换 Part 1 方波 方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时，有以
电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂，本期我们来分享如何选择电穿孔的波形，各波形需要设置的参数有哪些？以及两种波形之间的转换Part 1 方波方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时，有以下参数要进行考虑：场
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
赛业动物饲养课堂——走近科学之消失的鼠仔
动物房里，刚出生的鼠仔为何突然消失？消失的小鼠去哪了？这一切的背后，究竟是鬼怪作祟还是道德的沦丧？是鼠性的扭曲还是外界不可控的力量在做怪？敬请收看本期的《走进科学之消失的鼠仔》，让我们一起探索鼠仔离奇失踪的真相…（请自行脑补走近科学的经典配乐） 如何避免小鼠吃幼崽的现象? 2019年
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动物房里，刚出生的鼠仔为何突然消失？消失的小鼠去哪了？这一切的背后，究竟是鬼怪作祟还是道德的沦丧？是鼠性的扭曲还是外界不可控的力量在做怪？敬请收看本期的《走进科学之消失的鼠仔》，让我们一起探索鼠仔离奇失踪的真相…（请自行脑补走近科学的经典配乐） 2019年5月初，刚刚成为小鼠铲屎官没多久的
SCIEX学堂系列课程－|－质谱攻略之操作视频小课堂
“玩转质谱之操作视频小课堂”，是“SCIEX 学堂”平台中一个专注于分享质谱知识，仪器操作、数据处理的实用技巧小课程。世界万物皆有重量，质量是一切物质最基本的物理性质之一。质谱就是一个可以称量世界万物的天平，从蛋白质大分子到代谢物的组成，从中药主要成分鉴定到农药残留分析，从疾病标志物的发现到体内的检
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质谱进阶不用愁，短视频轻松看“玩转质谱之操作视频小课堂”，是“SCIEX 学堂‘’平台中一个专注于分享质谱知识，仪器操作、数据处理的实用技巧小课程。SCIEX OS 是SCIEX 质谱平台的新一代数据处理软件。SCIEX OS软件为模块化设计、多功能合一的平台，操作简单、容易上手。完整版的SCIEX
RNA标记
RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes 32P-pCp 3' End-labeling
RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RN
成分输血小课堂（一）
输血是血液病的重要支持疗法，是多数血液病得以有效治疗的重要保障，在某些情况下，输血也是目前个别血液病的唯一有效治疗手段。随着血液分离技术的进展，输血已从传统观念的输全血逐渐发展为成分输血，输血的应用范围也从原来的单纯替代治疗发展为包括干细胞移植等重要的治疗技术。全血输血输血的传统观念是输全血，随着现
成分输血小课堂（二）
7．辐照红细胞红细胞制品经过r 射线照射后称为辐照红细胞。常用的照射源是60Co或137Cs ,照射剂量为1500-3000cGy, 照射目的是灭活血制品中的免疫活性淋巴细胞。因为处于强烈联合化疗及放疗的病人处于继发性免疫缺陷状态，对输入的淋巴细胞无排斥能力，致使供体的淋巴细胞植活，引起输血
小RNA研究获重要进展
小核糖核酸（miRNA）研究领域中的一个最大问题便是搞清这些小型的RNA如何在动物体内抑制它们的信使RNA（mRNA）目标。早期的研究表明，miRNAs的活动减少了转译的效率，但对于目标mRNA的水平只有相对较小的影响。然而，来自美国科学家的新证据表明，就像在植物中一样，miRNA
micro－RNA(miRNA)综述2
miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端，以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制，进而抑制蛋白质合成，阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区
micro－RNA(miRNA)综述3
未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现，而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团：miRNA的确切功能是什么？它的目标靶是什么？作用机制是什么？也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选，在果蝇中可以用targeted- disruption缺失miR
micro－RNA(miRNA)综述1
RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。RNA干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的
Isolation－of－microRNA－(miRNA)
实验概要 This protocol utilizes the powerful guanidine isothiocyanate–phenol:chloroform extraction method which allows the rapid isolation of t