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RNA介导的基因沉默实验

实验材料 pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材 PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤 一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 cDNA 序列或预测的基因序列设计引物,用反转录-PCR ( RT- PCR) 方法扩增 cDNA 上的一部分序列。如果没有目的基因的基因组序列,可以用其他物种中基因的序列去搜索已知序列的 cDNA。如果目的基因是多基因家族的成员,就需要与家族成员进行多重比较以指导 PCR 引物的设计。要扩增的基因区域以及它与其他基因的相似性决定了该 RNAi 载体靶向单个 mRNA 还是多个相关基因的转录产物。( 2 ) 扩增编码区和非编码区(UTR ) 都能获得好的沉默效果。由于沉默机制依靠序列同源性,因此相关的 mRNA ......阅读全文

RNA介导的基因沉默实验

实验材料pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 cDNA 序列

RNA介导的基因沉默实验

实验材料pGEM-T 载体                                                                  DNA 模板                                                          试剂、试剂盒d

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  4月11日,中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所何玉科研究组在Plant Cell 杂志上在线发表题为HEAT-INDUCED TAS1 TARGET1 Mediates Thermotolerance via HEAT STRESS TRANSCRIPTION FACTOR

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染色质重塑因子PKL在RNA介导的DNA甲基化中的功能

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我国学者研制CRISPR-Cas13a介导的精确定点RNA编辑人工机器

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