结缔组织染色实验——胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白染色
实验方法原理黏蛋白是多糖与蛋白质结合的复合物，组织内含有硫酸根等成分，带有酸性物质，可称为酸性黏液（黏蛋白）。弹力纤维中的弹性蛋白由一种凝胶状的肽链组成，通过非极性吸附显色。胶原纤维是由纤维母细胞产生的一种胶原蛋白铰链而成，易与酸性染料结合。经过组合染色后，可分别显示胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白成分。实验步骤阿尔辛蓝染色液：阿尔辛蓝（Alcian blue 8 GS，由上海试剂三厂生产）1 g，冰醋酸 3 ml，蒸馏水 97 ml。间苯二酚-复红染色液：间苯二酚 2 g，碱性复红 2 g，蒸馏水 400 ml，30％ 三氯化铁 3 ml，盐酸 2 ml。先将间苯二酚、复红和蒸馏水混合搅拌均匀，煮沸后加入三氯化铁，再煮沸搅拌 3～5 min，冷却后过滤。将滤纸上的沉淀物一起放在隔水式恒温箱中烤干，取出放入烧杯中，并加入 95％ 乙醇 200 mU 放在水浴锅内加热搅拌溶解，取出滤纸，盛于棕色试剂瓶内，再补 20 ml 的 95％ 乙......阅读全文
结缔组织染色实验——胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白染色
实验方法原理黏蛋白是多糖与蛋白质结合的复合物，组织内含有硫酸根等成分，带有酸性物质，可称为酸性黏液（黏蛋白）。弹力纤维中的弹性蛋白由一种凝胶状的肽链组成，通过非极性吸附显色。胶原纤维是由纤维母细胞产生的一种胶原蛋白铰链而成，易与酸性染料结合。经过组合染色后，可分别显示胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白成分。
结缔组织染色实验——弹力纤维与胶原纤维染色
实验方法原理弹力纤维由随机交联盘绕的一些肽链组成，含有丰富的二硫键糖蛋白成分，所以可称为弹性蛋白。易与染色液中碱基结合，为了能够更好地显示弹力纤维和胶原纤维成分，选用维多利亚蓝、丽春红和苦味酸组合双重染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒维多利亚蓝糊精间苯二酚蒸馏水乙醇三氯化铁水溶液浓盐酸苯酚二
结缔组织染色实验——胶原纤维染色
结缔组织广泛分布于入体和动物体内，而疏松结缔组织在组织损伤后的修复过程中，纤维细胞可转化为活跃的成纤维细胞。成纤维细胞能形成胶原纤维、弹力纤维和网状纤维以及基质等成分。致密结缔组织的间质内含有大量纤维，排列紧密，细胞和基质比较少，主要含有弹性纤维，又称为弹性致密结缔组织。网状结缔组织由网状细胞和网状
胶原纤维的胶原蛋白的染色
胶原纤维在HE染色法被染成粉红色，除此之外，它还可以用一些阴离子的染料来进行染色，如用淡绿可把它们染为绿色，用甲苯胺蓝可将其染为蓝色，在网状纤维染色中，如不加以处理，它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫细胞化学染色中，胶原纤维由于含的
结缔组织染色实验——网状纤维与胶原纤维染色
实验方法原理网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维，由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成，这种组织蛋白质易与氨性银结合，再选用酸性染料染色液，能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用 Gomori 银与丽春红-苦味酸复合染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲
蛋白质染色实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶固定液染色液脱色液仪器、耗材 滤纸培养箱实验步骤 1. 将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖，在旋转摇床中缓慢揺动2 h。 2. 倾去固定液，以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶，并缓慢摇动4 h。3. 倾去染色液，用约50 ml 固定液冲
蛋白质染色实验
考马斯亮蓝染色 银染法 非氨盐银染法 快速银染法 实验方法原理 1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便
蛋白质染色实验——考马斯亮蓝染色
蛋白质染色可用于（1）蛋白质的观测（2）蛋白质含量的测定。实验方法原理1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷，而银染法具有相当高的灵敏度，能用于检出更少量的蛋白质。2. 蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化，从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白
蛋白质染色
二维凝胶电泳(2-DE)是广为蛋白质组学科学家们应用的经典技术之一，蛋白混合物在两个维度上被分离。第一步是常规的等电聚焦，此过程中蛋白质根据其等电点被分离。接着，第二维使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，将蛋白质按分子量进一步分离。上述两步操作在互相垂直的两个方向上，使分离的蛋白
脂蛋白染色介绍
1．油红O（oil red）染色将凝胶先置于平皿中，用5%乙酸固定20min，用H2O漂洗吹干后，再用油红O应用液染色18h，在乙醇∶水=5∶3中浸洗5min，最后用蒸馏水洗去底色。必要时可用氨基黑复染，以证明是脂蛋白区带。2．苏丹黑B（sudan black B）将2g苏丹黑B加60ml吡啶和40
一例手掌孤立性胶原瘤病例分析
1 临床资料 患者男， 17 岁。右手掌肿物 17 年。患者于出生时右手掌 出现肤色肿物，且逐渐增大，无明显自觉症状。予皮炎平外搽， 效果不明显，且皮疹逐渐增大。曾到多家医院就诊，诊断不详。 皮疹随身体生长而增大。既往无视物模糊、关节肿胀畸形或疼 痛、黑便或抽搐史，也无右手掌外伤或手术史。父母非近亲
明胶、胶原蛋白和水解胶原蛋白的不同之处
明胶、胶原蛋白和水解胶原蛋白并不相同。明胶是胶原在高温作用下的变性产物，其组成复杂，相对分子质量分布宽，由于高温造成胶原蛋白变性，胶原分子的3股螺旋结构被破坏，但可能有部分α链的螺旋链还存在，因此一定浓度的明胶溶液能成凝胶状。在食品工业、摄影和制药业中被广泛应用。据报道，全世界每年生产的明胶产品
蛋白质分离和分析——凝胶蛋白质染色
实验步骤 基 本 方 案 1 考马斯亮蓝染色检测范围为〇.3〜lMg 每蛋白质条带。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)聚丙烯酰胺凝胶（单 元 12. 3)考马斯亮蓝、银染用固定液考马斯亮蓝染液甲醇/乙酸脱色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 滤 纸（可选）干 胶 仪（可选
结缔组织染色实验
实验方法原理 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的，具有双折光性，经过特殊染色后，能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸，能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸（2，4，6-三硝基苯酚）染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 丽春红 S 水
马凡综合症的病因
本病呈常染色体显性遗传，在人体很多组织如心内膜心瓣膜、大血管、骨骼等处，均有硫酸软骨素A或C等黏多糖堆积，从而影响了弹力纤维和其他结缔组织纤维的结构和功能，使相应的器官发育不良及出现功能异常、Abraham等(1982)提出，主动脉弹性蛋白有异常，桥粒蛋白和异桥粒蛋白减少，而赖氨酰残基相应增加，
蛋白纤维的染色原理
正负电相互吸引的离子键结合。有酸性染料、活性染料、直接染料和阳离子染料。 蛋白质纤维上含有氨基酸所有特有的氨基正离子和羧基负离子。不管是阳离子染料还是阴离子染料，都能通过离子键来与蛋白质纤维相互吸引结合。阴离子型的染料，如活性、直接、酸性染料，就跟纤维大分子上的氨基正离子结合；阳离子染料，就跟
蛋白质染色介绍
染色液种类繁多，各种染色液染色原理不同，灵敏度各异。使用时可根据需要加以选择。常用的染色液有：1．氨基黑10B(amino black 10B又称为amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack，2B 200)氨基黑10B分子式为C22H13N6S3Na3，MW=7
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析，则首选不会引入共价蛋白
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银
蛋白质染色实验——银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒脱色液戊二醛硝酸银洗印显影液仪器、耗材培养箱摇床实验步骤1. 将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以5倍体积的固定液覆盖，在旋转摇床中缓慢摇动30 min 以上。 2. 倾去固定液，加5倍凝胶体积的脱色液，缓慢摇动60 min 以上。 3. 倾去脱色液，加5倍凝胶体积的10
糖类染色实验——羊水角化鳞状上皮的角蛋白染色
实验方法原理产妇分娩时引起羊水栓塞和胎儿娩出的羊水吸入角化鳞状上皮（角蛋白）以及其他物质，这种角蛋白含有丰富的二硫键结构，从糖的分类上属于强硫酸成分的酸性黏多糖，而黏液物质属于中性黏液物质呈红色，酸性黏液物质呈蓝色。弱硫酸成分的酸性黏多糖，在肺组织中同时可见两种物质，常用阿尔辛蓝、荧光桃红染色法。实
染色质蛋白非组蛋白的介绍
非组蛋白主要是指与特异DNA序列相结合的蛋白质,所以又称序列特异性DNA结合蛋白（sequence specific DNA binding protein)。利用凝胶延滞实验（gel retardation assay）,可以在细胞抽提物中进行检测。首先制备一段带有放射性标记的已知特异序列的D
关于胶原、明胶和胶原蛋白的异同
《英汉化学化工词汇》（第3版 科学出版社，1988）中将collagen译为胶原（蛋白），通常称为胶原，有时候为了叙述上的方便或更强调其蛋白的特性，也把collagen称作胶原蛋白。日本“长效寡肽”类胶原是指动物组织器官中存在的一类蛋白质，在提取、分离时，随着方法和条件的不同，可以产生胶原、明胶
结缔组织染色实验——结缔组织三色染色法
实验方法原理结缔组织中含有大量的细胞间质纤维和基质组分，主要成分为蛋白和多糖，常用 Masson 染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒酸性复红丽春红橘黄 G乙酸冰醋酸磷钼酸亮绿实验步骤Masson 染色液：酸性复红 1 g，丽春红 1 g，橘黄 G 2 g，0.5％ 乙酸 100 ml。亮绿染
蛋白质凝胶染色法实验3
糖蛋白的检测1. 通用糖蛋白检测糖 基 化 是 真 核 细 胞 中 最 常 见 的 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 。寡 糖 通 常 连 接 于 天 冬 酰 胺 侧 链(iV-连 接 糖 基 化 ) 或 丝 氨 酸 和 苏 氨 酸 羟 基 侧 链 (〇 连 接 糖 基 化）。凝 胶 中 蛋 白 质
蛋白质凝胶染色法实验（二）
关键步骤通常如下所述。(1) 固定凝胶，以固定蛋白质条带，并移除凝胶中的干扰物质, 如 S D S 、缓冲液和盐，这些物质会结合银并造成背景染色。(2) 用能够结合蛋白质并提高银结合能力的物质, 或是能够干扰剩余未结合的银造成的背景染色的物质来孵育凝胶。总之，这些各种各样的方法都和敏化作用有关。(3
核酸染色实验——核仁组成区嗜银蛋白
实验方法原理核仁组成区是 DNA 的襻，具有核糖体基因（rDNA），在一定条件下可用银反应法进行定位，是通过银的聚合物沉积于胱氨酸和半胱氨酸的双硫键位置上，所以在镜下能够清楚可见颗粒状的核仁组成区嗜银蛋白（AgNOR）。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水明胶粉双蒸水硝酸银仪
蛋白质凝胶染色法实验（四）
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸进行简单的凝胶脱色。利用基于微波炉的方案可以加快染色过程的进行。 SYPRO R uby 蛋白质凝胶染料具有相对较高的消光系数和量子产率，因此它十分亮眼, 化学稳定性和光稳定性都很高。光谱的激发可借助紫外线或是蓝光光源;
蛋白质染色实验——快速银染法
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醛固定液硫代硫酸钠干胶液甲醇仪器、耗材摇床透析膜实验步骤1. 将凝胶置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋转摇床中缓慢摇动10 min。 2. 倾去固定液，用水冼两次，每次5 min，缓慢摇动。 3. 倾去水，凝胶浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸钠溶液中1 m
蛋白质凝胶染色法实验（五）
磷 蛋 白 的 检 测作为基本的细胞信号机制, 指定氨基酸残基的可逆磷酸化作用的重要性已无需争辩。当前磷蛋白染料具有受ZL保护的构型，即磷酸基结合部分共价连接于荧光团。检测的方式是选择性结合磷酸化的氨基酸，但是没有荧光增强作用。从某种程度上讲, 许多可溶的荧光复合物都可作为总蛋白质染色剂