结缔组织染色实验

实验方法原理 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液无水乙醇二甲苯中性树胶仪器、耗材 过滤纸实验步骤 丽春红-苦味酸染色液:0.5% 丽春红 S(Ponceau S)水溶液 12 ml,苦味酸饱和液 88 ml。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 丽春红-苦味酸染色液染色 5 min。3. 直接用无水乙醇分化与脱水。4. 用过滤纸吸干。5. 二甲苯透明和中性树胶封固。注意事项 1. 丽春红-苦味酸混合液可室温存放,使用滴染方法。2. 无水乙醇脱水时,应将切片斜放,减少多余水分。其他 结果:胶原纤维呈红色,背景呈黄色。......阅读全文

结缔组织染色实验

实验方法原理 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 丽春红 S 水

结缔组织染色实验——结缔组织三色染色法

实验方法原理结缔组织中含有大量的细胞间质纤维和基质组分,主要成分为蛋白和多糖,常用 Masson 染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒酸性复红丽春红橘黄 G乙酸冰醋酸磷钼酸亮绿实验步骤Masson 染色液:酸性复红 1 g,丽春红 1 g,橘黄 G 2 g,0.5% 乙酸 100 ml。亮绿染

结缔组织染色实验——胶原纤维染色

结缔组织广泛分布于入体和动物体内,而疏松结缔组织在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为活跃的成纤维细胞。成纤维细胞能形成胶原纤维、弹力纤维和网状纤维以及基质等成分。致密结缔组织的间质内含有大量纤维,排列紧密,细胞和基质比较少,主要含有弹性纤维,又称为弹性致密结缔组织。网状结缔组织由网状细胞和网状

结缔组织染色实验——网状纤维与胶原纤维染色

实验方法原理网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维,由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,这种组织蛋白质易与氨性银结合,再选用酸性染料染色液,能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用 Gomori 银与丽春红-苦味酸复合染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲

结缔组织染色实验——弹力纤维与胶原纤维染色

实验方法原理弹力纤维由随机交联盘绕的一些肽链组成,含有丰富的二硫键糖蛋白成分,所以可称为弹性蛋白。易与染色液中碱基结合,为了能够更好地显示弹力纤维和胶原纤维成分,选用维多利亚蓝、丽春红和苦味酸组合双重染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒维多利亚蓝糊精间苯二酚蒸馏水乙醇三氯化铁水溶液浓盐酸苯酚二

结缔组织染色实验——胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白染色

实验方法原理黏蛋白是多糖与蛋白质结合的复合物,组织内含有硫酸根等成分,带有酸性物质,可称为酸性黏液(黏蛋白)。弹力纤维中的弹性蛋白由一种凝胶状的肽链组成,通过非极性吸附显色。胶原纤维是由纤维母细胞产生的一种胶原蛋白铰链而成,易与酸性染料结合。经过组合染色后,可分别显示胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白成分。

结缔组织的染色方法

结缔组织的染色方法 一般所说的结缔组织是指纤维性结缔组织而言,其结构特点是细胞间质内基质外含有较多的纤维成分,主要是胶原纤维、弹性纤维和网状纤维,我们仅简述这三种纤维的常见染色方法。 (1)Mallory三色染色法:常用于判定多种组织、器官的病变程度及修复情况,区分肿瘤组织中的纤维成分与平滑肌。 染

特染:-结缔组织染色

一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml(2)苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液 酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。(2

脂肪及结缔组织的染色方法

实验概要掌握脂肪及结缔组织的染色方法。脂肪的染色方法:脂肪染色常用脂溶性色素,如苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、油红O等。这类染料既能溶于有机溶剂如乙醇、丙酮,又能溶于脂肪。由于该类染料在脂质中溶解度较大,染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去,使脂质呈染液的颜色。主要用于显示组织脏器的脂肪变性和类脂质的异常沉着

脂肪及结缔组织的染色方法

实验步骤脂肪的苏丹Ⅲ(Ⅳ)染色方法:1) 冰冻切片用70%乙醇漂洗,不超过30s。2) 切片入苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液中3~15min或延长至1h。3) 新50%~70%乙醇分化,直至洗去切片上的浮色为止,蒸馏水洗。4) 用稀释1倍的明矾苏木精浅染核1min或稍长。5) 用滤纸将切片及周围的水分吸干。6)

结缔组织观察实验

1. 了解结缔组织的特点和分类。2. 掌握疏松结缔组织的纤维及各种细胞成分。3. 了解致密结缔组织、脂肪组织、软骨和骨的基本结构特点。实验材料大白鼠小白鼠试剂、试剂盒台盼蓝生理盐水溶液甘油瑞特染液仪器、耗材解剖器一套注射器及针头滴管载玻片盖玻片显微镜实验步骤一、材料和用具大白鼠或小白鼠。皮下结缔组织

结缔组织观察实验(一)

实验材料 大白鼠小白鼠试剂、试剂盒 台盼蓝生理盐水溶液甘油瑞特染液仪器、耗材 解剖器一套注射器及针头滴管载玻片盖玻片显微镜实验步骤 一、材料和用具大白鼠或小白鼠。皮下结缔组织经活体染色及弹性纤维染色和H-E染色的平铺片、气管切片(H-E染色)、小肠切片(H-E染色)、小白鼠肠系膜平铺片(苏丹Ⅲ染色)

结缔组织观察实验(二)

(二)高倍镜观察胶原纤维束较粗大,纤维束内由许多平行排列的胶原纤维组成,但在切片上不易区分。在纤维束之间分布有排列成单行细长的腱细胞(成纤维细胞),但在切片上只能看到染成蓝紫色椭圆形或杆状的胞核。两个邻近细胞的胞核常常很靠近。胞质不易显示。脂肪组织(一)小肠或气管切片(H-E染色)的观察1.低倍镜观

结缔组织类细胞培养实验

成纤维细胞培养实验 巨噬细胞培养实验             实验方法原理 包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易获得。人的成纤维细胞不仅

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

疏松结缔组织形态学观察实验

实验步骤                                                         1. 染色:乙醛复红肉眼观察:此种标本颜色深浅不一,可见许多染色较深的细丝。2. 低倍镜观察:纤维交叉成网,细胞散在于纤维之间。选择着色浅的部位,转高倍镜观察。3. 高

疏松结缔组织形态学观察实验

实验步骤1. 染色:乙醛复红肉眼观察:此种标本颜色深浅不一,可见许多染色较深的细丝。2. 低倍镜观察:纤维交叉成网,细胞散在于纤维之间。选择着色浅的部位,转高倍镜观察。3. 高倍镜观察:注意分辨两种纤维和两种细胞。(1) 胶原纤维:数量多,染成粉红色。纤维粗大,有分支,在自然松弛状态下呈波浪状。(2

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体

姐妹染色单体分化染色实验

实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister  chromatid  differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处

糖类染色实验——黏液物质染色

实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香

核酸染色实验

实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色

Hoechst染色实验

Hoechst染色时无需用DAB来显色,它直接结合细胞的DNA ,经过紫外光激发后发出蓝色荧光。试剂、试剂盒Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤1.  用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染

Hoechst染色实验

试剂、试剂盒 Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材 荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤 1.  用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中,置室温2 min。2.  室温下,在水中洗2 min,晾干

钙质染色实验

实验方法原理 钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Dahl-McGec-Russell 茜素红 S 法染色。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水茜素红乙酸淡绿氢

钙质染色实验

钙质沉积于骨组织或病理变化的组织中,多见于组织坏死、动脉粥样硬化和肿瘤等钙化的组织。在茜素的作用下,可与钙形成有色的螯合物(钙质)成分。实验方法原理钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Da

荚膜染色实验

实验方法原理 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。

Hoechst染色实验

基本方案             试剂、试剂盒 Hoechst染料 二甲基亚砜染料 二苯亚胺 甲基

鞭毛染色实验

实验方法原理 鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料 苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 硝酸银鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材 载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤 1. 菌种的准备 要求用活跃生长

糖类染色实验

实验方法原理 糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸 焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双