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(1) 氯喹 ( Chloroquine ，CQ) 处理，检测自噬流中 LC3B-II 变化在酸性溶酶体中，氯喹会使溶酶体 pH 值升高，使溶酶体中酸性水解酶失活 ，从而抑制细胞内自噬溶酶体的融合与降解。氯喹处理细胞会导致 LC3B-II 的聚集，此时观察到的 LC3B-II 的变化仅代表自噬小体数量的改变。氯喹处理细胞后，在短期氨基酸剥夺的条件下 (0-4 h) ，两种细胞的自噬通量是相似的 (图 4a, b) 。但是随着时间的增加，长时间的氨基酸剥夺处理后，p27 -/- MEFs 与 p27 +/+ MEFs 相比，LC3B-II 数量显著降低 (图 4c, d) 。这说明 p27 促进氨基酸缺失细胞中自噬通量。图 4. 氯喹影响细胞 LC3B-II 的表达【a-b: p27+/+ 和 p27-/- MEF......阅读全文
4、自噬流检测方法细胞经自噬诱导或抑制后，需对自噬流的水平进行观察和检测，常用的技术手段见表1： 表1 自噬体计数及自噬流检测方法汇总（Mizushima et al, Cell, 2010）其中，电镜观察法由于受到实验条件和设备的限制应用范围有限；而由于自噬过程发生快速，通过IB/WB检
2016年诺贝尔生理学或医学奖揭晓，来自东京工业大学的大隅良典Yoshinori Ohsumi因发现自体吞噬的机制而获得此奖，他的代表论文包括： Autophagy in yeast demonstrated with proteinase-deficient mutants and cond
一、自噬简介 1、大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。 详
一．关于自噬及LC31. 自噬大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。详细来说，自噬过
自噬（autophagy）是继凋亡（apoptosis）之后，生命科学最热门的研究领域之一。近年来，自噬的研究成果层出不穷，成为许多科学家和各种研究基金重点关注的研究方向。2013年，国家自然科学基金批准的与自噬相关的项目接近300个。但是，有关自噬性细胞死亡和存活在疾病中的作用仍然存在争议。生
人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取，也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离，但操作繁锁，得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时，常选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象，常用的检测方法如下。 （一）炭粒廓清试验 正常小鼠肝
美国国立卫生研究院，英国牛津大学的研究人员研发出了一种高通量，能定量分析原代人类细胞自噬的新技术。这种技术首次在已知与细胞自噬有关的疾病中检测到了自噬发生的水平，这将有助于进一步分析与药物疗效密切关联的细胞自噬，相关成果公布在Autophagy杂志上。 细胞自噬是一个进化上保守的过程,
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有： 一、自噬诱导剂 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/
近期，中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所离子束生物工程与绿色农业研究中心研究员黄青课题组在灵芝抗癌药理研究方面取得新进展，发现灵芝酸D可以同时诱导食管鳞癌细胞凋亡和自噬性细胞死亡。相关研究结果发表在药理研究期刊Journal of Ethnopharmacology上。 灵芝作为一种传
许多科学研究人员通过加入特定化合物刺激细胞后继而来观察细胞的 2D 或 3D 结构变化，借此来阐释复杂的细胞内信号通路变化。科学研究者利用新的细胞成像和分析技术，大大提升了他们对未知领域的理解水平。 拥有一台低成本、高效率、高通量检测分析仪器，例如 ImageXpress® 细胞成像分析系统
在《 Hello~自噬 》一文中，我们曾给大家介绍过自噬。自噬在维持稳态和多种疾病中都起着重要作用。那么在实验中，如何检测自噬呢？自噬，简单来说就是细胞自己吃自己、废物再利用。细胞陷于困境时 (如营养物质匮乏)，启动自噬程序自救，通过降解蛋白质和细胞器获得必需的氨基酸、脂肪酸等营养物质维持基本生命活
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断，预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。
细胞自噬过程的观察和检测可应用于：（1）研究细胞防御和应激调控机制；（2）自噬体膜的来源问题研究。（3）细胞器自噬研究。实验方法原理正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，包括自噬诱导剂、自噬抑制剂等工具药，以及反义RNA干扰技术（Knockdown）、突变株筛选
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
工具药、融合蛋白等示踪自噬形成 实验方法原理 正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对
工具药、融合蛋白等示踪自噬形成 实验方法原理 正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对
自噬是近年来很热门的领域，很多人傻傻分不清自噬和死亡。今天就带大家一起来复习一下。自噬的过程——从一张图开始步骤 1：细胞接受自噬诱导信号后，在胞浆的某处形成一个小的类似「脂质体」样的膜结构，然后不断扩张，但它并不呈球形，而是扁平的，就像一个由 2 层脂双层组成的碗，可在电镜下观察到，被称为 Pha
早期发现癌症是成功治疗癌症的关键。我们知道，随着肿瘤的生长，它们的一小部分DNA会脱落并漂浮在血液中，也就是现在热门的“循环肿瘤DNA”。从理论上来说，简单抽血应该能够检测到癌变的迹象。然而，这些来源于肿瘤的DNA并不充足，所以在血液或尿液样本中能够检测到肿瘤机会非常小，特别是在肿瘤早期阶段。
（1)PNAS：科学家阐明低于肺结核的新型抗生素靶点 文章中研究者发现，结核分枝杆菌细胞中阅读DNA的信息的方式不同于其它细菌，该阅读过程被称之为转录，由RNA聚合酶来进行，其利用一种名为σ的蛋白同DNA的一部分进行结合来进行转录的开始；但研究者首次观察到在结核杆菌细胞中存在第二种蛋白，即Rb
背景知识介绍 肝纤维化是慢性肝损伤的过度瘢痕反应，而瘢痕反应是细胞外基质蛋白堆积所造成，外基质蛋白主要是Collagen I，还有 a-SMA，TIMP-1蛋白。 miRNA mimic是运用化学方法合成的miRNA模拟物，能模拟细胞中成熟miRNA的高水平表达，以增强内源miRNA
基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核细胞增多
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核
编者按：人为什么会衰老是千百年来一直在探索的奥秘。只有了解了衰老的原因和机制，才能有效地延缓衰老，目前有关衰老原因与机制的学说种类繁多，从微观和宏观两方面都有相关的研究来解释衰老的原因和机制。 华西医院老年医学研究室的肖恒怡教授从2007年至今都在四川大学华西医院老年医学研究室研究老年病及衰老
根据活性病原体的微弱DAPI信号和复杂的背景信息，新型的运算法需要从中识别病原体。每种独立的运算法不可能同时满足所有的实验需要。Parasite finder预设程序可根据用户需要选择方法最高程度的区别背景与待分析部分。（A）ring mask圈出胞质部分，代表缺少病原体培养的条件下的巨噬细
本期为大家带来关于巨噬细胞的最新研究进展，带领大家一起学习了解近期研究发现的关于巨噬细胞的新功能、新特点和新应用。 【1】Cancer Res：同济医学院学者发现巨噬细胞分泌外泌体促进结直肠癌转移侵袭 DOI： 10.1158/0008-5472.CAN-18-0014 临床和实验证据都表
我们百奥赛图也为大家送来了“年货” -TLR9人源化小鼠（B-hTLR9 mice），一起来看看吧~ B-hTLR9小鼠基本信息 TLR9基因功能 TLR9（Toll-like receptor 9） 是由TLR9基因编码的一种蛋白质，也称为CD289（分化抗原决定簇289
实验方法原理红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用，还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞，在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。实验材料小鼠试剂、试剂盒S
紧张有序的备战场景，每天在人体内的免疫系统轮番上演—— 敌人触碰警戒线；警戒巡视系统拉响紧急警报；信号兵就位发出组织防御反击的信号；基地提供物资保障；作战部队全员出动；整装之后，旋即发兵，与敌交火。 近日，《细胞》杂志在线刊登中国工程院院士、南开大学校长曹雪涛团队的重要发现，阐述了“基地
实验方法原理 红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用，还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞，在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。实验材料 小鼠试剂、试剂