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核酸提取与纯化介绍

核酸提取是分子生物学的基本组成部分,因高质量的核酸是分子生物学上的应用至关重要。 我们将会总结一些现用核酸提取技术和针对样品类型选择正确提取方法的小建议;也会提及评估核酸浓度和质量,以及核酸提取过程中的常见问题。 a. 为什么需要核酸提取? 核酸提取为大量广泛研究和应用提供了答案(例如:克隆、qRT-PCR和全基因组、转录组范畴中的二代测序技术),获得的核酸可以多种方式进行应用。 准确的研究目的,决定了要提取的核酸类型;核酸的应用往往影响提取方法的选择。(例如:标准的End-point PCR反应,不需要与全基因组测序实验相同的DNA质量) 为了确定最佳的研究方法,有必要清楚了解核酸的下游应用以及任何与样品类型相关的潜在限制。(例如,临床样品采集量往往有限,核酸提取存在挑战。) 虽然依据样品类型,细胞裂解方式不同,但整体的核酸提取核心原则不变:细胞或组织样品裂解,去除非核酸污染物(例如,蛋白质等)。 提取核酸的......阅读全文

战“疫”前线:更高速的核酸提取 助力新冠核酸检测

  分析测试百科网讯 近期,分析测试百科网小编访谈上海市精神卫生中心核酸检测方舱实验室,专业人员介绍了从咽拭子采样、核酸提取的制备过程到基因扩增分析的新冠病毒核酸检测的全流程。在此过程中,中元汇吉的96通道全自动核酸提取仪为高效快速地大批量进行新冠病毒核酸检测提供助力。助力核酸检测方舱实验室  20

医疗器械技术审评中心发布2019新冠病毒核酸检测试剂

  2020年2月12日,国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心发布通告,发布《2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点》。本审评要点适用于进行首次注册申报的产品。企业应提交在符合质量管理体系的生产环境下生产的试剂盒进行的所有性能验证的研究资料,包括具体研究方法、实验方案、实验数据、统计分析

【最新】2019新冠病毒核酸检测试剂注册技术审评要点发布

   分析测试百科网讯 国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心发布了《2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点》的通告(2020年第4号)。  以下是公告全文:关于发布《2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点》的通告(2020年第4号)  为应对新型冠状病毒感染的肺炎疫情,按照“统

中检院发布二代测序试剂质量评价通用原则

  一.前言  本指导原则主要针对第二代测序(next generation sequencing,NGS)技术检测试剂(以下简称“NGS检测试剂”)产品质量提出指导性要求,涉及基本原则、主要原材料、检测流程及性能评价等方面。  本指导原则是对企业和检验人员的指导性文件,但不包括注册审批所涉及的行政

NGS检测试剂生产应获得《医疗器械生产许可证》

  为加强第二代测序技术检测试剂的规范和指导,进一步保证和提高相关产品的质量,8月8日,中国食品药品检定研究院(中检院)组织制定了《第二代测序技术检测试剂质量评价通用技术指导原则》(下称《指导原则》)。  该文件是中检院发布的首个质量评价技术指导原则,旨在对产品设计、研发及验证的各关键环节进行规范,

核酸提取产品的市场概况和主要品牌

市场概况:2019年,全球核酸分离和纯化市场规模估计为24亿美元,预计在预测期内(2020 - 2027)复合年增长率为7.2%。几个RNA物种代表了一个广泛的、未被开发的生物分子类别,在疾病发展过程中发挥着至关重要的作用。这增强了RNA治疗的渠道,反过来,又推动了核酸分离和纯化方法在药物开发中的应

抗原的制备方法-2

表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242

抗原的制备-2

 2.核酸的分离纯化  从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入E

核酸提取仪的相关选购介绍

   核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:    一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;    另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。    大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提

德国耶拿公司核酸纯化新技术研讨会在京顺利召开

——北京中国农大站   2013年11月27日,德国耶拿公司核酸纯化新技术研讨会农大站在中国农业大学西校区图书馆报告厅如期举行。来自中国农业大学、中国农业科学院、中科院核酸领域的师生近百余人参加了此

新型冠状病毒核酸提取检测全套解决方案的应用

针对新型冠状病毒2019-nCoV,博日公司第一时间推出了基于不同样本来源、样本量的核酸提取及荧光定量PCR检测的方案,详细介绍如下: 一、样本前处理 二、核酸提取        核酸提取是分子检测的基础,高质量核酸也是保证下游检

总RNA的提取

完整RNA 的提取和纯化,是进行RNA 方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即1):样品细胞或组织的有效破碎;2),有效地使核蛋白复合体变性;3),对内源RNA酶的有效抑制;4)

耶拿生命科学:新款PCR设计灵感来自中国客户

  ——访德国耶拿生命科学部中国区经理诸建  分析测试百科网讯 2016年10月10-12日,2016上海慕尼黑分析生化展(analytica China 2016)的生命科学展馆里,德国耶拿生命科学部门首次以独立展位亮相并推出了一系列生命科学新技术与新产品,如革命性的核酸纯化技术Smart Ext

致善生物推出新一代核酸提取仪

  厦门致善生物科技股份有限公司自主设计研发的Lab-Aid 824核酸提取仪(注册证:闽厦食药监械(准)字2014第1400001号),近日正式发布上市,该仪器是致善生物继2014年3月发布Lab-Aid 960核酸提取仪之后推出的又一全新力作,适用于从抗凝全血、滤纸干血斑、结核分支杆菌、人乳头瘤

核酸的分离与纯化

从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入EDTA、8-羟基喹啉、柠

MDx 2021:新冠快检/HBV/结核等病原检测技术平台的升级

  分析测试百科网讯 2021年5月20-21日,MDx 2021第七届中国先进分子诊断技术与应用论坛在上海新发展亚太JW万豪酒店开幕。本次论坛深度探讨分子诊断技术升级及产品申报与临床落地等前沿走向、基于测序的mNGS临床落地方案、纳米孔/单分子/固态纳米孔技术平台进展、PCR/RAA/dPCR等技

总RNA的提取

 完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即1):样品细胞或组织的有效破碎;2),有效地使核蛋白复合体变性;3),对内源RNA酶的有效抑制;4)有

自动核酸提取仪简介

作为体外检测的一大巨头,美国贝克曼库尔特有限公司当然不会放过开发核酸提取装备。该公司针对不同的工作量,提供了两种可供选择的提取仪器:SPRI-TE作为小型化的自动提取,提供高质量,高效率,可重复的磁珠核酸提取,专门为小实验室设计。Vidiera NsP则更倾向于血站,CDC,大型医院实验室等大客户。

以丙肝病毒血清样本为例介绍如何提高RNA病毒核酸检测...

以丙肝病毒血清样本为例介绍如何提高RNA病毒核酸检测灵敏度这段时间普通民众都是谈新冠病毒色变,无非印证了一句话「人们对不了解的事物才会感到恐惧」。为了减少我们的恐惧感,让我们来深入了解新闻发布会上不断提及的「新冠病毒核酸检测」吧。首先分享中国疾控中心发布的检测新冠病毒的引物、探针序列:推荐选用针对新

样品总RNA的提取

实验概要本实验介绍了样品总RNA的提取方法。完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即:样品细胞或组织的有效破碎;有效地使核蛋白复合体变性;对内源RNA酶的

轻松搞定新型冠状病毒核酸纯化

众所周知,核酸提取是做下游任何分子检测的基础,高质量的核酸也是保证下游检测结果的必要前提。在本次新型冠状病毒疫情中,不管QIAGEN经典的基于硅胶膜法病毒核酸提取技术还是基于磁珠法的自动化核酸提取平台均受到了广大客户的信赖和喜爱。在美国,QIAGEN多种用于RNA提取的自动化设备和试剂也被囊括在FD

DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术

核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一,目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系统,磁珠法由于操作简便、快速,能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化,因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN

基因扩增检验标本的处理保存及核酸提取方法(3)

RN A提取方法 下面以异硫氰酸胍结合氯仿-酚提取法介绍RNA的提取。 异硫氰酸胍是一种强用力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎, 核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。 RNase虽可耐受多种处理,(如煮沸)而不失活,但却会被4mol/L异硫

抗原的制备方法

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备-1

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

磁珠深度解析,真的非AMPure XP不可吗?

  基因测序越来越得到临床的认可,尤其是精准医疗概念提出以后,更是备受青睐,为精准治疗解答很多未知的问题。高通量测序技术的跨越式发展,使测序能力大幅上升,在整个NGS工作流程中,磁珠是必不可少的产品。磁珠通过磁颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,将样本中目的片段分离。可实现对核酸样本的

磁珠深度解析,真的非AMPure XP不可吗?

  基因测序越来越得到临床的认可,尤其是精准医疗概念提出以后,更是备受青睐,为精准治疗解答很多未知的问题。高通量测序技术的跨越式发展,使测序能力大幅上升,在整个NGS工作流程中,磁珠是必不可少的产品。磁珠通过磁颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,将样本中目的片段分离。可实现对核酸样本的

机械化代替手动,自动化技术在分子生物界大显身手

  未来已来,科幻大片中机器人占领地球?也许不是没可能!   2019在北京举行的世界机器人大会让大家一饱眼福,体会到目前基于机器的自动化产业已应用于衣食住行的各个方面,甚至在生物学和生物医药领域中,自动化与高通量的实验方式也正在成为工业级研究的新趋势。   2019世界机器人大会展览[1]

6小时安装+负压环境 “猎鹰号”气膜方舱实验室在广州建成

  为进一步快速提升广州当地的核酸检测通量,6月1日晚上,四组“猎鹰号”气膜方舱实验室在广州体育馆快速搭建并预计在投入6月3日全部投入使用,届时,检测日通量可达单管12万人份。  “猎鹰号”气膜方舱实验室由广州实验室和国家呼吸中心、国家呼吸系统疾病临床医学研究中心、呼吸疾病国家重点实验室、广州医科大

高通量核酸提取组合方案(二)

标准组件已经可以完成核酸分离纯化过程,可进行全血,血清的核酸提取以及PCR产物纯化。各种选用组件主要用于各种不同来源材料的前处理过程。以全血DNA提取为例,介绍提取过程以及过程中每个组件的功能: 1.       血样从采血管手动