基因表达轮廓（geneexpressedprofile）技术1
基因表达谱或基因表达轮廓（gene expressed profile）技术就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、连接、PCR及分子杂交等分子生物学基础操作技术，将某一生物材料在某一特定阶段表达的基因全部展示出来，通过测序及与数据库比较或通过目标和对照样品中所表达基因的比较，可以找出特异表达基因。目前该技术已广泛用于基因克隆、差异表达基因检测、基因表达的环境和生理调控等方面。目前基因表达轮廓方面的实验技术主要可分为以下几类:(1)以杂交为基础的技术,包括Northern blotting、SI mapping/RNase保护、消减克隆、ｃDNA微列阵。(2)以PCR为基础的技术,如差异显示、mRNA指纹。(3)以测序为基础的技术,如基因表达序列标签(EST)、基因表达系列分析(SAGE)。（4）综合杂交和PCR的代表性差异分析(RDA)、制消减杂交（SSH）等。现就几种目前常用技术解释如下。1，mRNA差异显示技......阅读全文
基因表达轮廓（gene－expressed－profile）技术1
基因表达谱或基因表达轮廓（gene expressed profile）技术就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、连接、PCR及分子杂交等分子生物学基础操作技术，将某一生物材料在某一特定阶段表达的基因全部展示出来，通过测序及与数据库比较或通过目标和对照样品中所表达基因的比较，可以找出特异表达
基因表达轮廓（gene－expressed－profile）技术2
经过这轮ＲＤＡ过程,Tester中的目的DNA将得到第一次富集。将第一轮产物更换新接头,进行第二轮RDA过程,目的DNA可得到进一步的富集。该技术假阳性很低。但仍不能解决个体mRNA在丰度上存在巨大差异的问题,当靶序列浓度较低时,其富集受抑制。3：抑制消减杂交（suppression subtrac
基因表达轮廓（gene－expressed－profile）技术3
电子杂交即虚拟的RNA杂交(Virtual northern blots)。用已知的EST序列为起始序列,采用BLAST(Basic Local Alignment Search Tool,BLAST)检索程序检索数据库中与其同源或有部分重叠的EST序列,以分别确定EST是属于已知基因还是已
克隆基因的表达（expression－of－cloned－gene）1
基因表达(gene expression)是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。基因的表达主要涉及到两个过程：转录和翻译。 第一节影响外源基因表达的因素 利用基因工程技术高水平表达
克隆基因的表达（expression－of－cloned－gene）3
（3）原核生物的基因组基本上是单倍体，而真核基因组是二倍体。（4）如前所述，细菌多数基因按功能相关成串排列，组成操纵元的基因表达调控的单元，共同开启或关闭，转录出多顺反子(polycistron)的mRNA；真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA，即mRNA是单顺反子(monocistron)
克隆基因的表达（expression－of－cloned－gene）2
在双链 DNA 分子中，只有一条链转录成 mRNA，这条链称为有意义链(sense strand)，该基因的另一条链则称反意义链(antisense strand)。在含有许多基因的 DNA 双链中，每个基因的有意义链并不是在同一条 DNA 链上。也就是说，一条链上既具有某些基因的有意义链，
差异基因表达研究方法介绍（DDPCR；GENEFISHING；GENE－CHIP）
差异基因表达的研究受到了广泛的关注，常用的技术有DD-PCR；GENE-FISHING；GENE CHIP等。简单介绍如下： DDRT -PCR技术即mRNA差异显示聚合酶链式反应技术，此技术是以PCR技术和聚丙烯凝胶电泳技术为基础，结合银染或放射性自显影等显色技术，能快速有效地
表达蛋白（Expressed－protein）的分离与纯化
大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在，需要不同的纯化策略。现在，许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能，这些自然需要将蛋白质分离出来后，进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认，蛋白质纯化比起DNA 克隆和操作来是更具有艺术性的，尽管DNA 序列具有异乎
RTPCR在基因表达（gene－expression）检测中的应用
基因表达的检测有几种方法。经典的方法（仍然重要）是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技 术的进步使得特异的基因产物或蛋白分子的识别和分离成为可能。随着重组DNA技术 的运用，现在有可能检测．分析任何基因的转录产物。目前有好几种方
基因克隆技术（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和载体的连接获得目的基因后必须将其放在一定的载体内才能在宿主细胞内扩增或表达。目的基因与载体的连接及其后续的转化过程习惯上称为克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技术获得，因此这里先介绍PCR产物的克隆策略，然后再介绍其他的克隆方式。（一）PCR产物的克隆策略获得PCR
基因克隆技术（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和载体的连接 获得目的基因后必须将其放在一定的载体内才能在宿主细胞内扩增或表达。目的基因与载体的连接及其后续的转化过程习惯上称为克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技术获得，因此这里先介绍PCR产物的克隆策略，然后再介绍其他的克隆方式。 （一
基因的翻译表达1
1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术，该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立，并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段，还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研究大多是提取mRNA然后通过网织红细胞或麦胚系
基因克隆(gene－clone)的几种常用方法介绍1
基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最
基因转型(gene－transformation)
目的带有特定基因的质体在分子生物研究上，是一个很重要的工具，将质体送入细菌的过程称为基因转形，经由基因转型可使质体在细菌中大量复制，以备进一步研究。本实验将把你在前面转殖实验中cDNA和质体DNA的连结反应送入细菌。 你将从本实验学习如何进行基因转型作用。原理早在1970年左右，有人发现细菌经由冰冷
基因差异表达技术
真核生物中，从个体的生长、发育、衰老、死亡，到组织的得化、调亡以及细胞对各种生物、理化因子的应答，本质上都涉及基因的选择性表达。高等生物大约有30000个不同的基因，但在生物体内任意8细胞中只有10%的基因的以表达，而这些基因的表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着，这种表达的方式即为基因的差异表达
DNA重组（DNA－recombination）技术：外源基因的蛋白表达1
通过外源DNA的重组、克隆、以及鉴定，可以获得所需的特异DNA克隆。外源克隆基因在某种表达载体及适宜的宿主细胞中可表达为相应的蛋白质，这就组成了外源基因的蛋白表达系统。表达后的蛋白质必须具有原来的生物学活性，这是基于正确的基因转录、转录后加工、mRNA翻译及翻译后修饰，同时与表达载体的结构和表达体系
小鼠βactin基因的克隆表达（1）
动物组织RNA的提取实验目的：掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理：Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液，其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性，随后加入氯仿，酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中，RNA
PRKCG基因编码的功能和结构描述
蛋白激酶c（pkc）是一个丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶家族，可被钙和第二信使甘油二酯激活。pkc家族成员磷酸化多种蛋白质靶点，参与多种细胞信号传导途径。pkc也是一类肿瘤促进剂佛波酯的主要受体。pkc家族的每个成员都有一个特定的表达谱，并且被认为在细胞中扮演着不同的角色。该基因编码的蛋白是pkc家族
PRKCG基因突变因子与药物介绍
蛋白激酶c（pkc）是一个丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶家族，可被钙和第二信使甘油二酯激活。pkc家族成员磷酸化多种蛋白质靶点，参与多种细胞信号传导途径。pkc也是一类肿瘤促进剂佛波酯的主要受体。pkc家族的每个成员都有一个特定的表达谱，并且被认为在细胞中扮演着不同的角色。该基因编码的蛋白是pkc家族
与肺癌相关的PROM1基因编码功能描述
这个基因编码五跨膜糖蛋白。这种蛋白定位于膜突起，通常在成人干细胞上表达，在那里它被认为通过抑制分化来维持干细胞特性。该基因的突变已被证明会导致视网膜色素变性和Stargardt病。这种基因的表达也与几种癌症有关。该基因由至少5种以组织依赖方式表达的替代启动子表达。已发现编码该基因不同亚型的多种转录变
与肝癌相关的PROM1A基因编码功能描述
这个基因编码五跨膜糖蛋白。这种蛋白定位于膜突起，通常在成人干细胞上表达，在那里它被认为通过抑制分化来维持干细胞特性。该基因的突变已被证明会导致视网膜色素变性和Stargardt病。这种基因的表达也与几种癌症有关。该基因由至少5种以组织依赖方式表达的替代启动子表达。已发现编码该基因不同亚型的多种转录变
PROM1基因编码的功能和结构描述
这个基因编码五跨膜糖蛋白。这种蛋白定位于膜突起，通常在成人干细胞上表达，在那里它被认为通过抑制分化来维持干细胞特性。该基因的突变已被证明会导致视网膜色素变性和Stargardt病。这种基因的表达也与几种癌症有关。该基因由至少5种以组织依赖方式表达的替代启动子表达。已发现编码该基因不同亚型的多种转录变
PROM1基因突变因子与药物介绍
这个基因编码五跨膜糖蛋白。这种蛋白定位于膜突起，通常在成人干细胞上表达，在那里它被认为通过抑制分化来维持干细胞特性。该基因的突变已被证明会导致视网膜色素变性和Stargardt病。这种基因的表达也与几种癌症有关。该基因由至少5种以组织依赖方式表达的替代启动子表达。已发现编码该基因不同亚型的多种转录变
基因表达快速分析新技术
实验概要介绍了一种新的基因表达快速分析技术-MPSS 技术的基本原理、技术路线及其优点和应用。实验原理MPSS技术是利用限制性内切酶和荧光检测知识,发展出的一种辨认和测定细胞每一个cDNA 克隆片段末端16～20bp序列的方法,从而查明细胞内所有基因的表达情况。MPSS 分析系统大体可划分为三大部分
表达基因的克隆策略与分离表达基因序列的技术方法
人类基因组计划的主要任务之一就是要从大片段基因组区域或整条染色体DNA 上鉴定出基因表达序列(gene expressed sequences)或转录单位(transcription units)。在人类基因组30亿个碱基对中，发生转录的表达序列(即基因)仅占总序列的3～5％。基因组中绝大部
Lissencephaly－gene－(LIS1)－in－neuronal－migration－and－development
Integration of pathways that regulate nucleokinesis during neuronal migration and a model of LIS1 mediating CLIP-170 interactions with the dynein/dyna
基因芯片(gene－chip)的原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通
报告基因(report－gene)的应用
报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物－荧光素酶敏感性高，测定方法快速且宜于掌握，线性好，并且荧光素酶产生的
BLCAp基因突变与药物因子介绍
这个基因编码一种通过刺激细胞凋亡来减少细胞生长的蛋白质。选择性剪接和选择性启动子的使用导致编码相同蛋白质的多个转录变体。这个基因在大脑中留下印记，在那里不同的转录变体从每个父母等位基因表达。上游启动子起始的转录变异体优先从母体等位基因表达，而散布的NNAT基因（GeneID:4826）下游起始的转录
BLCAP基因编码功能及结构描述
这个基因编码一种通过刺激细胞凋亡来减少细胞生长的蛋白质。选择性剪接和选择性启动子的使用导致编码相同蛋白质的多个转录变体。这个基因在大脑中留下印记，在那里不同的转录变体从每个父母等位基因表达。上游启动子起始的转录变异体优先从母体等位基因表达，而散布的NNAT基因（GeneID:4826）下游起始的转录