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免疫酶组织化学技术

免疫酶组织化学技术 1.酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上,创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2.PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上,建立了非标记抗体法,先将HRP免疫兔、羊或鼠,制成抗HRP抗体,再与HRP结合,制备成PAP复合物,其敏感性要比酶标直接法、间接法高出许多倍,其背景染色也要优于直接法和间接法。在此基础上又出现了许多PAP法变型方法,如双PAP法、AAPAP法、APAAP法等。 3.ABC法 20世纪60年代初,人们发现生物素(biotin)与亲和素(卵白素,avidin)之间具有高度的亲和性,是自然界中具有最强亲和力的物质之一。到了20世纪70年代,人们又发现生物素可以和抗体交联,且生物素或亲和素与过氧化物酶或荧光素结合后,并不影响它们的生物学活性。Guesdon等(......阅读全文

免疫学检验中的酶免疫技术

 目前,免疫学检验中的标记技术主要包括酶免疫技术、荧光免疫技术、放射免疫技术、金免疫技术、化学发光免疫技术等。其中酶免疫技术是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一,酶免疫技术在检验医学中得到广

免疫酶细胞化学实验技术

免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色

免疫组化实验原理和步骤

  实验原理:   抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半

食品微生物快速检测技术研究

食物病原微生物是食品安全的重要内容,而对其的快速检测(验)一直是相关研究的热点。近年来,微生物的快速检测和自动化研究进展迅速。依靠培养基进行培养、分离及生化鉴定的传统方法费时费力。快速检测及其自动化则综合引用微生物学、化学、分子生物学、生物物理学、免疫学以及血清学试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半

肿瘤标志物 7 种检测方法大比拼

  肿瘤具有高死亡率、高转移率和高复发率,是危害人类健康的重大疾病。诊断肿瘤的传统方法有病理组织活检、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、电子计算机断层扫描(computed tomography,CT)、B 超、X 线胸片、内镜检查等。这些检查对于肿瘤早期

免疫组化技术全程原理剖析以及案例解答

1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞

肿瘤标志物 7 种检测方法大比拼

  肿瘤具有高死亡率、高转移率和高复发率,是危害人类健康的重大疾病。诊断肿瘤的传统方法有病理组织活检、核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、电子计算机断层扫描(computed tomography,CT)、B 超、X 线胸片、内镜检查等。这些检查对于肿瘤早期

免疫资料——免疫学常用简称介绍

  1:抗体查询常用名词   Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reacts   Host Species (宿主):Host in which the antibody was generated   Applicati

免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围

第一节 免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:一、肾脏组织的检查肾穿刺组织一般应切割为三小块,分别作冰冻切片、石蜡切片及超薄切片,进行荧光显微镜、光学显微镜及透射电镜观察。所应用的免疫

免疫酶染色法

(一) 原理 免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后,首先将其内源酶抑制,接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合,达到酶染色目的;后者是抗原先与其抗体(第一抗体)结合后,再与酶标抗体(第二抗体)结合,而进

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

免疫酶染色法

实验概要免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后,首先将其内源酶抑制,接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合,达到酶染色目的;后者是抗原先与其抗体(第一抗体)结合后,再与酶标抗体(第二抗体)结合,而进行酶染色的。免疫酶染色

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

食品安全快速检测技术研究

  摘要:在当今食品安全问题非常严重的形势下,采取食品安全快速检测技术,能够科学有效地检测食品生产、加工、运输、销售等等各个环节的质量水平,从而保证食品安全。食品安全快速检测技术的推广应用,一方面是对于传统的食品安全检测技术的巨大改良,另一方面,又能够促使我国的食品业向着科学、健康的方向取得稳步的发

免疫组化技术实验原理及分类

   免疫组化技术实验原理: 抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。    众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将

免疫资料——免疫学常用简称介绍

1:抗体查询常用名词Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reactsHost Species (宿主):Host in which

免疫组化技术实验原理及分类

免疫组化技术实验原理: 抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某

酶联免疫吸附法在食品检验中的应用

  摘要:酶联免疫吸附技术(ELISA)是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法,具有操作简便、快速、有效、特异性强等特点,能批量检测食品中的药物残留、病原微生物以及转基因食品等。本文主要阐述了酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用。   食品安全问题是全球关注

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下

在临床检验中应用化学发光免疫技术的分析

  化学发光免疫技术具有标本用量较少、稳定性较高、标记物制备较容易、不污染环境、操作简便以及便于实现自动化等优点,主要将免疫分析与化学反光分析相结合,被广泛应用到临床医学和基础医学中。化学发光免疫技术是继酶免疫、发射免疫以及荧光免疫测定之后的免疫技术,在临床检验中经常需要检测和分析表征性物质,以判断

免疫组化实验原理和步骤(四)

免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题,操作步骤简单也易掌握,但要染好免疫组化,其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事,但最基本的应从以下方面加以注意:(1)去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织,其中自身含有一定量的内源酶和内源性

碱性磷酸酶的染色检测

实验概要了解碱性磷酸酶的染色检测方法。实验原理本试验是一个酶组织化学试验,酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下,检测酶的存在,定位与活性的学科,即在酶的存在,分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的,包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置,各种酶的自己的位置

免疫酶细胞化学实验技术-2

 (四)染色原理及步骤  1.基本原理  酶标抗体与荧光色素标记抗体的染色相同,亦分直接法和间接法。直接法是将酶直接标记在每一抗体上,间接法是将酶标记在第二抗体上,检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而绝大数单克隆

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性

免疫组化染色应该注意的问题

免疫组化染色方法已不是什么很难的问题,操作步骤简单也易掌握,但要染好免疫组化,其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事,但最基本的应从以下方面加以注意:(1) 去除内源酶及内源性生物素 一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织,其中自身含有一定量的内源酶和内源性生物素,而免疫组

CFDA颁布第一批120项医疗器械行业标准

  6月30日,国家食品药品监督管理总局在网站上发布新闻,表示以2014年第30号公告形式颁布了《子宫刮匙》等120项推荐性医疗器械行业标准。这是今年6月1日起新修订的《医疗器械监督管理条例》施行后颁布的第一批医疗器械行业标准。标准的正式颁布将推动医疗器械监督管理,对保障医疗器械安全有效、促进医疗器

病毒实验诊断及质量控制

病毒感染病原学诊断在疾病的预防上可了解流行病学情况,疫苗的免疫效果以及采取及时的免疫措施及必要的隔离和防护,在病毒感染的诊断和治疗上可避免不必要的诊断检查,避免滥用抗生素。对某些病毒疾病可选用有效的抗病毒药物,如用阿糖腺苷或无环鸟苷治疗单母子疱疹脑炎,丙氧鸟苷治疗严重的巨细胞病毒感染,病毒唑雾化吸入

荧光免疫技术介绍

  荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantib