最常用的超离心分离法的方法介绍

最常用的有: ①沉降速度法:用超离心法,增加蛋白质溶液的离心强度,当溶液所含蛋白质颗粒大小和形状都相同时,这些颗粒以相同的速度移向管底,并形成清楚的界面;当溶液中有多种大小不同的蛋白质颗粒时,就会有几个界面,用特殊的光学系统可以观察到沉降界面,从而判断出蛋白质的沉降速率。当沉降界面以恒速移动时,单位离心场里的沉降速度称为沉降常数,用S表示。用超离心法可以测出S,然后用一个公式即可计算出蛋白质的大小及分子量。 ②沉降平衡法:当一个含多种蛋白质的混合物在离心速度不太高的情况下,一方面由于重力作用,按蛋白质分子的大小以不同的速度向器底沉降,另一方面蛋白质颗粒又从高浓度向低浓度扩散,在沉降和扩散的相互作用下,可使蛋白质颗粒最后达到平衡,称沉降平衡。蛋白质颗粒在溶液中呈现稳定的连续分布即可形成某种浓度梯度,通过测定这种浓度分析就可以求出蛋白质的大小和分子量。......阅读全文

最常用的超离心分离法的方法介绍

  最常用的有:  ①沉降速度法:用超离心法,增加蛋白质溶液的离心强度,当溶液所含蛋白质颗粒大小和形状都相同时,这些颗粒以相同的速度移向管底,并形成清楚的界面;当溶液中有多种大小不同的蛋白质颗粒时,就会有几个界面,用特殊的光学系统可以观察到沉降界面,从而判断出蛋白质的沉降速率。当沉降界面以恒速移动时

超离心分离法的基本信息介绍

  超离心分离法通常指用超速离心机分离高分子的方法。含有高分子的溶液(如核酸和蛋白质的溶液)受到强大的离心力作用时,如果这些高分子物质的密度大于溶液的密度就会沉降下来达到分离的目的。其沉降的速度既与其分子的大小和密度有关,也与溶液的分子密度和粘度及其分子的形状有关。超速离心法也可用来测定高分子的分子

常用的灭菌方法介绍

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类:即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料

常用的脱气方法介绍

1.抽真空脱气法:此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。2.吹氦脱气法:利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60 mL/min流速通入流动相储液

最通常的物理图的构建方法介绍

最通常的物理图的构建方法是把限制酶切的DNA片段,按其次序排列连接起来。作图的技术路线基本上分两类:一类是由长到短作图,另一类则是由短到长作图。前者是将基因组DNA用切点很少的限制酶如NotI等完全酶切,得到长约100~l000kb的DNA长(大)片段,每条染色体平均切成130个片段,按照片段上的标

常用的物质分离方法介绍

1、分液:分离两种不互溶的液体,如分离油和水。2、萃取:加入适当溶剂把混合物中某成分溶解及分离,如庚烷、取水溶液中的碘。3、蒸馏:溶液中分离溶剂和非挥发性溶质,如海水中取得纯水。4、分馏:离两种互溶而沸点差别较大的液体,如液态空气中分离氧和氮、石油的精炼。5、升华:离两种固体,其中只有一种可以升华,

基因转移常用的方法介绍

外源基因的转移:基因转移(gene transfer)是将外源基因导入细胞内,其转移方法较多,常用的要有下列几类:1)化学法:将正常基因DNA(及其拷贝)与带电荷物质和磷酸钙、DEAE-葡萄糖或与若干脂类混合,形成沉淀的DNA微细颗粒,直接倾入培养基中与细胞接触,由于钙离子有促进DNA透过细胞有作用

目前最流行的测定光合速率的方法介绍

光合作用是地球上最重要的生命现象,它是唯一能把太阳能转化为稳定的化学能贮藏在有机物中的过程,是维持地球上物质循环的关键环节,也是农作物产量形成的决定性因素。因此,提高光合作用对于提高作物产量具有十分重要的意义。在植物生理学、生态学、作物栽培学、育种学等研究工作中,经常需要测定光合速率,研究者们总想创

常用层析方法介绍

◆吸附层析吸附剂的吸附力强弱,是由能否有效地接受或供给电子,或提供和接受活泼氢来决定。被吸附物的化学结构如与吸附剂有相似的电子特性,吸附就更牢固。常用吸附剂的吸附力的强弱顺序为:活性炭、氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙、石膏、纤维素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最强。吸附剂在使用前须先用加热脱水

常用采样方法介绍

1、三层五点法:按堆形和面积大小采用分区设点,或按食品堆高度采用分层采样、分区设点,每区面积不超过50m2,各设中心四角共五点;区数在两个以上的两区界线上的两个点为共有点。将样品分为上、中、下三层,在各层的四角和中间各取等量样本混合后,再取检验所需样本。2、刮涂法:在酒精灯火焰下燃烧灭菌的小刀(放凉

常用浓缩方法介绍

在一些实验中,一些被测物经分离、净化后,样液的量比较多,被测定成分含量极其微小。例如痕量测定实验,在测定前需要浓缩样液,提高浓度,这样能提高分析的灵敏度。但是存在于这些被测物中的污染物存在性质不稳定,易氧化分解,浓缩过程一定应注意防止氧化分解,尤其是在浓缩至近干的时候,极易发生氧化、分解,这时需要在

检测环境雌酮的常用方法介绍

检测环境雌酮的常用方法为仪器分析法,主要包括气相色谱法、气质联用法、液相色谱法、高效液相法等。这些方法虽然灵敏度高, 操作简便,但需要昂贵的专门设备, 且样品的前处理操作较繁琐, 单个样品的检测时间很长, 不能快速提供检测结果, 因此寻找灵敏度高、快速简便、费用低的检测方法对样品粗筛、现场检测、临床

常用的电泳分析方法介绍

常用的电泳分析方法主要有:醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳、毛细管电泳。

关于针刺活检的常用方法介绍

  ①穿刺抽吸活检:适用于具有一定体积,表面有正常组织覆盖的实性肿瘤。临床多用空注射器刺入瘤体,然后回抽注射器芯,造成负压,将瘤组织碎屑吸入空针内,将此微量组织涂于载玻片上,经细胞室医生进行固定、染色等处理,在显微镜下观察作出诊断。其操作简便、安全、无需麻醉,对恶性肿瘤的诊断符合率达80%以上。  

色谱柱的常用填充方法介绍

固定相填充的好坏,将直接影响柱效率。通常多用泵抽填充法,即把色谱柱的一端塞上玻璃棉,接真空泵,另一端接一漏斗,在抽吸下加入固定相,边装边敲打色谱柱,至固定相不再进入为止。装好后,塞上玻璃棉。装柱要求要填充得均匀,紧密,切忌有空隙。

地高辛标记RNA常用的方法介绍

地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DIG-UTP,以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶T7、SP6经体外转录合成标记RNA。此法多用于RNA探针的制备,一般每20~25个核苷酸可引入一个地高辛分子。5'末端标记法5'末端标记法是通过化学

常用的固相杂交方法介绍

常用的固相杂交方法有斑点杂交法、夹心杂交法和原位杂交法等。下面简单介绍几种常用的核酸分子固相杂交方法。①斑点杂交法(dot blot hybridization):最常用的杂交模式.将样品DNA直接点在硝酸纤维素膜或尼龙膜上,在严格的条件下杂交后进行检测。斑点杂交法简单、迅速,不需要限制性核酸内切酶

常用的几种细胞破碎方法介绍

细胞破碎方法简述   随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一

实验室常用灭菌方法,超赞!值得收藏!

实验医学微生物学常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。 (一)消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、

组织的分离实验_离心分离法

实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用

常用RNA标记方法介绍

RNA标记方法:按反应机制分如下四类:直接标记法,加尾标记法,基于逆转录反应的标记方法,基于RNA克隆扩增的标记方法。常用于RNA标记的方法按标记物性质分为:放射性同位素标记:32P、35S、3H非放射性标记:半抗原荧光素化学发光物质地高辛地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DI

破乳常用方法介绍

长时间静置将乳浊液放置过夜,一般可分离成澄清的两层。水平旋转摇动分液漏斗当两液层由于乳化而形成界面不清时,可将分渡漏斗在水平方向上缓慢地旋转摇动,这样可以消除界面处的"泡沫"。促进分层。用滤纸过滤对于由于有树脂状、粘液状悬浮物存在而引起的乳化现象,可将分液漏斗中的物料,用质地密致的滤纸,进行减压过滤

关于比浊法的常用方法介绍

  (1)目视比浊法  目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。  (2)免疫比浊法  免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。  (3)光电比浊法  当光束通过悬

几种基因克隆的常用方法介绍(二)

3.2 Differential display PCR(DD-PCR) DD-PCR是在AP-PCR基础上发明的一种RT-PCR方法,主要用于 2种或多种类似生物个体在基因表达上的差异分析。其基本原理是:所有真核生物的成熟mRNA都含有不同长度的poly+(A)尾部序列,根据poly+ (

几种基因克隆的常用方法介绍(一)

基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最

细菌检测最简单的方法

一.使用细菌总数测试片,只需要购买细菌总数测试片,再按要求使用,有说明书.二.红细胞计数法首先要了解这个方法的原理.把N个红细胞与细菌均匀混合,再数出一小块区域内的红细胞数n和细菌数m.因为细胞已经均均匀混合,所以,局部的细胞数比和整体的细胞数比是接近相同的.即 n/m=N/M (n为局部红细胞数,

世界最环保企业数量中国超美国、日本

   据俄罗斯卫星网消息,最新的《Carbon Clean 200》排名显示,有66家中国公司跻身世界最环保的200家企业之列,超过了美国和日本。   中国进入前200排名的公司数量(66)最多,其次是美国(40)、日本(20)、德国(8)、印度(7)、加拿大(5)。中国企业中排名最高的是新疆金风科

血清脂蛋白的快速离心分离法

利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液,在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例,实际上还可以应用于各种型号各种容量的固定角式转头。(一)   梯度液A液:11.40gNacl,0.1g EDTA-Na2,置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1ml 1N Na

血清脂蛋白的快速离心分离法

血清脂蛋白的快速离心分离法                                                            YU.2003.7利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液,在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例,实际上还可以应用于各种

超活染色染色法的方法介绍

超活染色又称体外活染。活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。