分析细胞学技术2

显微吸收光度测量需满足朗伯-比尔定律条件,待测物质需为均质,但生物学物质很少是均质的,而且显微镜成像过程中,经过光路系统各界面多次折射反射后会导致测量中的分布误差、闪烁误差、系统误差等,影响测量精度。所以除校正系统至最佳状态外,常用双波长法、一波二区法和扫描法来消除误差。扫描法是最令人满意的方法。测量时,先将待测物分成大量小区域,近似认为每个小区域内物质分布为均质,采用顺序逐点扫描法测出各小区域的消光度,经积分后换算出待测物的总消光度,求得其相对含量。扫描法根据不同扫描方式可分为:飞点扫描、像扫描、物扫描、TV扫描等。在实际测量时,台物扫描是最常用的方法,在高精度扫描台上放好样品,确定其扫描范围和波长,根据放大倍数确定测量光栏的大小,根据待测物确定单色入射光波长,选取全自动扫描后由计算机数据处理并显示结果及扫描图形。台物在x方向和y方向上来回移动,而测量光栏位置不动,使台上的被测物质各小区域依序进入测量光栏内而被测量;也可用影象......阅读全文

分析细胞学技术2

显微吸收光度测量需满足朗伯-比尔定律条件,待测物质需为均质,但生物学物质很少是均质的,而且显微镜成像过程中,经过光路系统各界面多次折射反射后会导致测量中的分布误差、闪烁误差、系统误差等,影响测量精度。所以除校正系统至最佳状态外,常用双波长法、一波二区法和扫描法来消除误差。扫描法是最令人满意的方法。测

分析细胞学技术1

分析细胞学是从定量的角度对细胞的各种形态学参数、生物学特征、细胞生化成分的组成及含量以及细胞的各种功能等进行研究,将以往各种细胞学技术从定性、定位进一步发展到定量的研究,获得定量的测量数据,以更客观地揭示生命活动的规律。分析细胞学技术的发展有两个主要领域,固定式细胞分析和流动式细胞分析。固定式细胞分

细胞学检验病例2

检查化验血常规:白细胞计数:12.70↑x10^9/L,血红蛋白:148g/L,血小板计数:207x10^9/L,成熟中性粒细胞:83.9↑%;CRP及PCT未见明显异常,铁蛋白255.8μg/L,血沉16mm/h;血培养:5天培养未见细菌生长;血二代测序(mNGS):阴性;血免疫及生物标记物:T-

细胞学技术

概述及注意事项:细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术,其来源先于组织切片技术,目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛,如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞,以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞学诊断。标本采集注意事项::1、

RAPD分析技术2

(2)扩增结果差,条带模糊或难以辨认。――更换Taq聚合酶缓冲液。――检查引物(使用另外一个引物,或者将引物末端标记,在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺胶上电泳检测)。――检查Taq聚合酶活性(与不同批量的酶作比较)。――改变DNA浓度。(3)高相对分子质量产物弥散状分布>4kb。――降低DNA

标记免疫分析技术2

四、发光免疫分析:发光免疫分析:直接用发光物质标记抗原或抗体生物的发光剂:荧火虫荧光素(酶催化发光)化学的发光剂:鲁米那、吖啶脂等在有过氧化氢的弱碱溶液中即可迅速发光。美国CHIRON公司生产的ACS-180使用类均相的包被抗体的磁性微粒,扩大了反应面,加速了免疫反应,又应用吖啶脂作标记的化学发光分

DNA序列分析技术2

3)电泳电极缓冲液 1 倍TBE(pH 值8.0)预电泳 30 分钟至1 小时恒温方式 测序胶板上夹盖铝恒温板电泳温度 50℃左右电泳条件 恒功率 90~110W电泳时间 2.5 小时至5 小时4)干胶制备和压片电泳结束后取下胶板,用工具撬开玻璃板,使胶留在其中一块板上。将裁剪好的新华3 号滤纸在胶

脑脊液细胞学检查及临床意义(2)

 5 讨论  5.1 中枢神经系统感染性疾病  CSFC均经过三个演变期即急性炎症期、亚急性增殖期、修复期[1],不同感染性疾病,各期各有不同。  5.1.1 细菌性脑膜炎  出现反应最快的是嗜中性粒细胞,尤其是早期白细胞数达104/μl以上。经过CSFC确诊的细菌性脑膜炎患者,CSF中性粒细胞

细胞学误诊的原因分析

1.标本取材不当: 未取到真有癌细胞部分,如痰液制片时未仔细选择有效病理成分;或患者咳痰方式不对,未采集到支气管深部分泌物等。2.标本不新鲜: 细胞学检查标本必须在采集后1-2小时内涂片,立即固定,以防止细胞自溶。3.编号错误: 会发生误诊嘏造成医疗事故。故送检标本、申请单、涂片、报告单编号后应仔细

细胞学技术的一般环节

一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor)在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水

假如应用了脑脊液细胞学技术该多好?

                脑脊液细胞学(CSFC)技术传入中国几十年了,但是由于主客观因素的影响,推广应用受到限制。西京医院著名的CSFC专家粟秀初教授通过各种渠道多次呼吁开展此技术的研究与应用,效果不尽如人意,神经系统疾病误诊误治率仍然很高。去年某会议发下讲义,当我翻到病例讨论时,刚看完

蛋白质分析技术(Analytical-Techniques-for-Protein)2

二、透析和超滤1.透析(Dialysis):就是利用蛋白质分子不能通过半透膜(Semipermeable membrane)而小分子可以自由透过的性质,使蛋白质与小分子物质分开。作用:脱盐、无机离子和小分子物质等。透析膜:动物膜、羊皮纸、火棉胶、赛璐玢或其他材料等。2.超滤(ultrafiltrat

自动生化分析仪原理与相关技术分析2

2. 单色器单色器是使不同波长的光以不同角度发散的组件,按色散元件的不同,可分为棱镜单色器、光栅单色器和滤光片式单色器。棱镜既简单又便宜,但其色散是弯曲且非线性的,长波色散率小,短波色散率高,因此欲得到相同的光谱强度,狭缝宽度要随波长而改变,并且各光谱线间隔不同,为非匀排光谱。光栅的色散率大,色散角

细胞学说是谁提出的?-细胞学说内容?

1细胞学说是1838~1839年间由德国植物学家施莱登和动物学家施旺最早提出,直到1858年才较完善。西奥多·施旺是德国生理学家,细胞学说的创立者之一,末梢神经系统中许旺氏细胞的发现者,胃蛋白酶的发现和研究者,酵母菌有机属性的发现者,术语“新陈代谢”的创造者。施莱登是德国植物学家,细胞学说的创始人之

阴道细胞学检查

检验介绍:细胞学检查主要用于女性生殖系统恶性肿瘤的普查。女性生殖器官由外阴、阴道、子宫输卵管和卵巢组成。人体内正常值:未找到肿瘤细胞,或细胞学1级或2级。临床意义:找到肿瘤细胞或细胞学5级,说明为恶性肿瘤,如宫颈癌、卵巢癌阴道癌和子宫癌等。宫颈癌以鳞状上皮细胞癌(简称鳞癌)多见。卵巢癌和子宫癌以腺癌

脑脊液细胞学检查

脑脊液细胞学检查介绍:    脑脊液细胞学检查是在腰椎(或其他部位)穿刺后获取标本,用显微镜观察脑脊液中有无恶性肿瘤细胞。脑脊液细胞学检查正常值:    未找到肿瘤细胞。脑脊液细胞学检查临床意义:    脑脊液细胞检查主要用于发现中枢神经系统的肿瘤。中枢神经系统肿瘤以转移性肿瘤多见,如肺癌、乳腺癌、

脱落细胞学检查

脱落细胞学检查是检验技师考试需要了解的内容,医学教育网搜索整理如下: 脱落细胞学(exfoliativecytology)是采集人体各部位,特别是管腔器官表面的脱落细胞,经染色后用显微镜观察这些细胞的形态,并作出诊断的一门临床检验学科,又名诊断细胞学或临床细胞学。这门学科是在组织病理学基础上发展起

基于PCR技术的染色质沉淀分析2

METHOD Analysis of precipitated chromatin fractions (from Chromatin Immunoprecipitation on Unfixed Chromatin from Cells and Tissues to Analyze Histone

Eppendorf公司在郑州举办细胞学技术交流会

  中国 郑州(2011年11月10日)Eppendorf公司在位于郑州的河南省农科院畜牧兽医所举办了一场细胞学技术交流会。和与会同行分享了New Brunswick(NBS)Galaxy系列CO2培养箱和Eppnendorf显微操作技术在细胞领域的应用。   在现今细胞学实

宫颈细胞学现代新技术CCT、TCT与TCCT

我国妇女的子宫颈癌发病率及病死率约占世界的1/3,而近年来年轻的子宫颈癌患者发病率以每年2%~3%的速度增长。 1.Papsmear    PapSmear,也就是宫颈抹片,是指从子宫颈部取少量的细胞样品,放在玻璃片上,然后在显微镜下研究是否异常。由于这项检验的提出,子宫颈癌的死亡率至少降低了70%

细胞组分的分析方法——定量细胞化学分析技术2

5.固定方法(1)福尔马林法:  在单细胞悬液中加入等体积含8%甲醛的盐水G,4℃下固定12至18小时。该法常用于Acriflavine-Feulgen染色。(2)乙醇法:  细胞被重新悬浮于5ml冷盐水G中,慢慢加入-20℃95%的乙醇15ml,其最终浓度为70%,冰浴30分钟。此法常用于EB及P

RFLP技术和RAPD技术2

第三节 RAPD技术一、 材料不同来源的DNA(50ng/ul)。二、设备PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。三、试剂1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。2、Taq酶:购买成品。3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。4、MgCl2 :25mm

薄层液基细胞涂片技术的应用与分析(2)

  2.1  胸腹水共检407例,液基涂片检出恶性瘤细胞(含可疑)73例,常规涂片64例,灵敏度提高12.3%;痰液共检164例,液基涂片检出阳性数8例,常规涂片6例,灵敏度提高25%;尿液共检229例,液基涂片检出阳性28例,常规涂片18例,灵敏度提高35.7%;宫颈涂片157例,液基涂片报告鳞状

宫颈细胞学现代新技术-CCT、TCT与TCCT-(一)

  宫颈涂片筛检异常细胞是肿瘤防治学上最重要的成就之一。巴氏染色及分类法应用半个多世纪以来,为早期诊断宫颈癌及降低死亡率发挥了重要作用。但由于传统巴氏人工阅片会出现较高的假阴性率(文献报告为2%~50%)或假阳性率,故该技术的临床应用受到严重限制,目前在国外已停止使用巴氏人工阅片法,取而代之的是宫颈

宫颈细胞学现代新技术-CCT、TCT与TCCT-(二)

  Q:宫颈糜烂是宫颈癌的先兆吗?   A:宫颈炎是指在宫颈区域发生的炎症,分成急性和慢性两大类。宫颈糜烂是慢性宫颈炎的一种。医学上按宫颈糜烂面积的大小划分为轻度、中度和重度3种。当发现患有宫颈重度糜烂时,要及时、彻底治疗。因为宫颈糜烂常常合并HPV感染,所以,它是引起宫颈癌的可疑信号之一,千万不能

DNA重组技术2

 感受态细胞的制备(一)制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞  下述操作方案是由Hanahan(1983)提供的,所制备的大肠杆菌DHl、DH5和MM249感受态细胞培养物能使每微克超螺旋DNA以≥5x108转化菌落的频率进行转化,其他大多数大肠杆菌菌株的最高转化率大约只有前述菌株的1/10-1/5。

基因技术专题2

RNAi技术RNA干扰(RNA interference, RNAi)是近年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,它利用了由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物细胞内同源基因的特异性沉默(silencing)现象,其本质是siRNA与对应

cDNA合成技术2

3. 第一链产量测定第一链掺入率(%)= 掺入cpm/总cpm ×100%掺入dNTP(nmol)=2nmol dNTP/μl ×反应体积(μl)×(第一链掺入率)设330为每mol dNTP的平均分子量合成cDNA量(ng)=掺入dNTP (nmol)×330ng/nmolmRNA向cDNA转变率

分子杂交技术-2

 一、Southern杂交 Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。   (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。   (3) 预杂交滤

Southern-杂交技术2

三:操作(一)转膜1电泳2切胶 在紫外下,切取凝胶有条带部分3脱嘌啉0.25NHCL浸泡凝胶10分钟,蒸馏水洗胶(大于15kb的DNA片段转移时做此步骤)4变性,变性液(0.5MNaOH、1.5MNaCL)浸泡凝胶2次,每次15分钟,蒸馏水洗胶5中和,中和液(0.5Mtris-HCL,pH7.0、3