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定量westernblot实验为什么需要用验证抗体

验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗原的亲和性高度依赖于实验条件,因此,验证您的试验方法中的条件适用于抗体与抗原的结合是十分重要的。在《JBC》杂志中关于抗体验证信息如下: 定义所有使用的抗体的来源和种类,包括目录/批号。 描述如何产生新抗体,包括表位/抗原的制备和纯化。 描述支持抗体特异性的数据,包括翻译后修饰或新表位。 证明对抗原进行遗传或其他分子修饰后免疫反应性降低。 定量western blot尤其适用于确认获得的信号仅来自感兴趣的蛋白。如果没有进行抗体验证(并且验证荧光信号与蛋白质的量呈线性关系),将无法获得下游定量分析......阅读全文

定量western blot实验为什么需要用验证抗体

   验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而

定量western blot实验为什么需要用验证抗体?

验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体

定量western blot实验为什么需要用验证抗体

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定量western blot疑问解答—为什么需要验证抗体?

验证抗体对于结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗

定量western blot疑问解答:为什么需要验证抗体?

验证抗体对于结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗

上样质控和抗体验证用于Western blot定量

今天的帖子的灵感来自于我和同事在教他们SDS-PAGE和western blot的实验交谈中。 他们对于qRT-PCR(R)和流式细胞术(R)精通,特别关心如何以及为什么使用某些上样质控,还有其它的技术被使用验证,蛋白质表达和抗体特异性的变化。 样品准备和上样质控 理想地,上样质控是多步骤过程的

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定量Western Blot指南:内参质控

上期小编为大家介绍了以单一看家蛋白作为定量Western Blot内参蛋白的分析方法,这次咱不得不说说以全蛋白为内参的分析方法。 期刊JBC(The Journal of Biological Chemistry)在Western Blot数据要求中指出,对于半定量蛋白表达的实验,最佳的内参为全蛋白

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如何用Western blot法验证PCR结果?

往期我们已经为大家详细介绍了利用CRISPR/Cas9构建编辑小鼠和细胞系的全部过程,相信大家在了解从sgRNA设计、表达载体构建至显微注射、小鼠鉴定等一系列过程的同时,常会为这样的难题所困扰:历经3-6个月得到的基因敲除的小鼠/细胞,PCR鉴定的结果居然和WB蛋白结果不一致?竟开始怀疑自己这几个月