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方案5交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑学分析

实验材料纯化的蛋白质复合体试剂、试剂盒缓冲液交联试剂二甲基亚砜(DMSO)4 X SDS 上样缓冲液终止溶液仪器、耗材Bio-Spin 柱可鉴定蛋白质的质谱仪可根据蛋白质序列计算肽链的软件包超滤装置实验步骤一、交联反应条件的优化不同方法得到的同种蛋白质复合体的质量与纯度不同,因此建议进行各种实验来摸索某一种蛋白质复合体的最优条件,但最好不要使用冷冻保存的蛋白质复合体(除非要进行特殊实验),因为这样常常会导致复合体的部分变性。较合理的安排是将所有的工作仔细计划后,安排好并在几天内完成,而在此期间可将蛋白质复合体于 4°c 保存。1.(任选)若蛋白质复合体溶液的缓冲液中,含有不适合做交联反应的组分,可使用凝胶过滤将其转换为缓冲液 X。根据溶液的不同体积可选用 Bio-Spin 柱(50~100ul )、Micro-SpinG-25 柱(10~100ul)或重力流驱动的 NAP 柱(0.1~2.5 ml),具体可参照操作说明。凝胶过滤......阅读全文

蛋白质复合体性质的研究

方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑

关注质谱与生命科学,看2019北京质谱年会

  分析测试百科网讯 2019年3月29日,2019年北京质谱年会在中国科学院大学(雁栖湖校区)隆重举行。本次会议主题为“质谱与生命科学”,邀请了活跃在我国的青年专家知名专家作质谱前沿技术与应用新进展报告。本次年会由北京理化分析测试技术学会北京质谱学会主办,北京质谱中心承办。会议共有400余人出席,

蛋白质纯度测定实验

蛋白质纯度测定实验             实验步骤 在评价样品

蛋白质纯度测定实验

实验步骤在评价样品纯度之前,首先需要鉴定待测杂质的类型,如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质,进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性 (化学分析或物理特征)。而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。需要注意的是,上述说明中并没有要求描述杂质的性质。

等电聚焦和二维凝胶电泳实验

对于复杂混合物,如全细胞裂解物或富集的亚细胞组分,通过两步正交的分离 (orthogonalseperation),二维凝胶 (2D 胶)电泳可以很好地分离成几百个至上千个单个蛋白质。第一次分离基于电荷,即使用变性等电聚焦电泳; 第二次分离基于表观分子质量,即使用变性十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电

等电聚焦和二维凝胶电泳实验

等电聚焦和二维凝胶电泳实验             试剂、试剂盒 样品缓冲液

向50年创新致敬, 一览质谱领军者的风采

  -访赛默飞中国区色谱和质谱业务高级商务运营总监李剑峰赛默飞中国区色谱和质谱业务高级商务运营总监李剑峰(左)和分析测试百科网总经理卞利萍女士(右)  今年是赛默飞质谱业务成立50周年,在第三届全国质谱分析学术报告会上赛默飞展出了向创新历史致敬的一系列内容,参会者随处可感受到红色庆典的浓郁和热烈。分

亲和层析实验:常规方法

实验步骤 一、亲和介质的选择 亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过

亲和层析实验:常规方法

实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。

蛋白质凝胶染色法实验

实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银

第六届中国北京国际食品安全高峰论坛——质谱分析专场

  2013年4月1~2日,由北京食品学会以及北京食品协会主办,太平洋国际展览(北京)有限公司承办的第六届中国北京国际食品安全高峰论坛在北京国家会议中心拉开帷幕,此外本届大会有60多家厂商参展,纷纷展示了最新的产品技术及

Western Blot实验技术详解和常见问题解答

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

蛋白质凝胶染色法实验2

2. 总蛋白质荧光法染色荧光染色法结合了检测灵敏度 (可与银染法媲美) 与染色流程简便性 (与考马斯亮蓝染 色 或 Z n 2+ 反染法相同),且其线性定量范围较比色法大 10〜100 倍 。检测依赖于仪器,需要一个单色激发光源、能将波长较长的发射光从波长较短 (也更亮)的激发光

MALDI技术在质谱成像中的应用

  一、质谱成像技术简介  成像质谱(IMS)是一种非常灵敏的分子成像技术,可提供组合的分子信息和空间分辨率。它允许从组织切片、单细胞或其他物质表面直接鉴定和定位化合物分子。成像质谱研究的核心特点是质谱仪的高灵敏度、技术的无标签性、对肽和蛋白质的成像能力,以及从个体水平(几百微米)到细胞水平(几十纳

蛋白质凝胶染色法实验

实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析,则首选不会引入共价蛋白

临床质谱培训班圆满收官 聚焦LC-MS检测项目与解决方案

  分析测试百科网讯 2018年4月25-27日,由复旦大学附属中山医院检验科主办、国家级I类继续教育学习班——“液相色谱-质谱技术临床应用培训班”在复旦大学附属中山医院独山厅举办。本次活动围绕LC-MS/MS技术在我国临床检验领域的应用,邀请了国内外著名专家教授,向学员们讲授了液相色谱-质谱检测技

ICAS 2017分会(二):无处不在的质谱分析

  分析测试百科网讯 2017年5月7日,由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)和中国化学会(CCS)主办的2017 年国际分析科学大会(ICAS 2017)质谱分析分会在海南国际会展中心举行。分会邀请了复旦大学教授杨芃原、俄罗斯科学院院士Evgeny Nikolaev、香港浸会大学化学系教授蔡宗

PPTD2016蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会

   为推动我国体外诊断与蛋白质药物事业的发展,加强计量技术及分析表征技术对体外诊断与蛋白质药物质量控制及标准化的支撑,更好地促进我国体外诊断和蛋白 质药物研发生产等相关技术交流,中国计量科学研究院和国际计量局将联合举办“蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会(PPTD)”。 

“干细胞及转化研究”等6个重点专项2018年项目申报发布

  5月22日,科技部官网发布了《关于对国家重点研发计划干细胞及转化研究等6个重点专项2018年度项目申报指南征求意见的通知》,其中,“干细胞及转化研究”重点专项、“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项、“纳米科技”重点专项 与生物医学领域相关。  关于对国家重点研发计划干细胞及转化研究等6个重点专项

2018中国质谱大会生命科学与医学集锦

  分析测试百科网讯 2018年11月24日-26日,2018年中国质谱学术大会在广州东方宾馆盛大召开。本次大会包括一个报告主论坛,21个主题分论坛,共300余场演讲报告。在“生命科学与医学”分论坛上,数十位业内专家学者带来精彩的演讲报告,吸引参会人员驻足聆听。分析测试百科网作为本次活动的合作媒体,

蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会二轮通知

   为推动我国体外诊断与蛋白质药物事业的发展,加强计量技术及分析表征技术对体外诊断与蛋白质药物质量控制及标准化的支撑,更好地促进我国体外诊断和蛋白 质药物研发生产等相关技术交流,中国计量科学研究院和国际计量局将联合举办“蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会(PPTD)”。 

三聚氰胺掺假蛋白食品的筛选

本文提供了一种分析三聚氰胺及其类似物的耐用、有效且确定性方案。除优化的GC/MS方法外,还讨论了样品准备方案,包括提取和衍生等。 三聚氰胺是一种富含氮工业化学品,有多种用途,最常见的是用于制造三聚氰胺树脂——一种非常耐用的聚合物。在2007年春季北美地区,自从有报道表明出现在小麦麸质中的三

三聚氰胺掺假蛋白食品的分析筛选试验

三聚氰胺是一种富含氮工业化学品,有多种用途,最常见的是用于制造三聚氰胺树脂——一种非常耐用的聚合物。在2007年春季北美地区,自从有报道表明出现在小麦麸质中的三聚氰胺可能引起宠物猫和狗的肾衰竭之后[1],三聚氰胺这一名字很快被人们所知。进一步的研究结果令科学家们相信就是这些三聚氰胺及其类似物—

当质谱技术应用于医学检验

  质谱技术 (mass spectrometry) 是分离和检测带电粒子质荷比的分析技术。随着离子源及质量分析器技术的变革、质谱仪器设计的快速改进等,质谱技术已成为化学分析领域和生命科学领域非常有效的分析工具,尤其在医学检验中的应用越来越为广泛和深入。  由于质谱技术的高特异性、高灵敏度、单次分析

当质谱技术应用于医学检验……

  质谱技术 (mass spectrometry) 是分离和检测带电粒子质荷比的分析技术。随着离子源及质量分析器技术的变革、质谱仪器设计的快速改进等,质谱技术已成为化学分析领域和生命科学领域非常有效的分析工具,尤其在医学检验中的应用越来越为广泛和深入。  由于质谱技术的高特异性、高灵敏度、单次分析

当质谱技术应用于医学检验……

  质谱技术 (mass spectrometry) 是分离和检测带电粒子质荷比的分析技术。随着离子源及质量分析器技术的变革、质谱仪器设计的快速改进等,质谱技术已成为化学分析领域和生命科学领域非常有效的分析工具,尤其在医学检验中的应用越来越为广泛和深入。  由于质谱技术的高特异性、高灵敏度、单次分析

环渤海色质谱学者精彩报告纷呈 贯彻“绿色化学”理念

  分析测试百科网讯 2016年8月11日,由辽宁省分析测试协会,辽宁省分析科学研究院主办的“第四届环渤海色质谱学术报告会暨辽宁省第十届学术年会分会”在丹东召开(相关报道:第四届环渤海色谱质谱学术会在丹东开幕 首次发布徽标)。大会上,众位环渤海的

痕量分析实验室

高分辨分离分析及代谢组学组(1808组)是在许国旺研究员领导下的、在中科院大连化物所最具综合实力的课题组之一,其前身是国家色谱研究分析中心气相色谱组,2001年更名为高分辨分离分析及代谢组学组。课题组多年来一直致力于色谱理论及应用基础研究,优势研究领域为应用色谱及相关技术进行石油、化工、食品、

2449.8万!这所高校发布采购建设分析测试中心平台

  分析测试百科网讯 近日,海南省教学仪器设备招标中心受招标人海南大学委托,采购场发射透射电子显微镜、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪、纳米喷雾干燥仪、石英晶体微天平、多功能样品前处理平台、热重-红外图像-气质联用原位反应系统、显微傅里叶变换红外光谱仪+光声光谱检测器、差示扫描量热

张玉奎院士等专家在2012年北京色谱年会上作大会报告

  2012年12月07日,北京,2012年北京色谱年会热烈召开。促进了北京地区色谱以及色谱相关领域的技术应用与交流。围绕“色谱新技术及其应用”的主题,展开多场报告,内容包括蛋白质组学、色谱技术、色谱与质谱、色谱与核磁共振、金属组学、代谢组学、生物气味研究、环境分析等。中国科学院大连化学物理研究所张