CellRes:CRISPR/Cas12a切割ssDNA的新活性

CRIPSR/Cas12a切割单链DNA的示意图(A)和三元复合物的结构模拟图(B)。 中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所赵国屏研究组的最新研究成果,以CRISPR-Cas12a has both cis -and trans-cleavage activities on single-stranded DNA(《Cas12a兼具顺式和反式单链DNA切割活性》)为题,在线发表在Cell Research上。论文深入系统地研究了Cas12a对于靶标单链DNA和非靶标单链DNA的切割特性。 作为生命的基本遗传物质,DNA的精准编辑和快速检测一直以来受到高度重视。近年来,随着CRISPR/Cas9系统的发现和开发,人们对基因治疗重新燃起了新希望;尽管存在一些潜在的安全风险和一定的伦理之争,CRISPR/Cas9系统出于其相对精准和高效,已开始被应用于临床的研究。同时,科学家开始将CRISPR系统引入核酸快速......阅读全文

Cell-Res:CRISPR/Cas12a切割ssDNA的新活性

  CRIPSR/Cas12a切割单链DNA的示意图(A)和三元复合物的结构模拟图(B)。  中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所赵国屏研究组的最新研究成果,以CRISPR-Cas12a has both cis -and trans-cleavage activities on

核酸检测:传染病原检测、食品安全检疫及致病基因筛查

  高效精准的核酸检测技术在传染病原检测、食品安全检疫和致病基因筛查等许多方面具有重要的应用。基于CRISPR的基因组编辑技术极大地革新了生物医学研究。有趣的是,除了能够通过对基因组精准操控来进行功能基因组学研究,最近一些研究发现CRISPR系统的某些效应蛋白,例如Cas12a,在切割靶DNA后会受

Science:重大进展!揭示功能多样化的V型CRISPRCas系统

  古生菌和细菌的CRISPR/Cas系统保护它们的宿主免受噬菌体和其他的可移动遗传元件的影响。根据最新的分类标准,CRISPR/Cas系统可分为两大类:第1类CRISPR/Cas系统和第2类CRISPR/Cas系统。  第1类CRISPR/Cas系统分为I型CRISPR/Cas系统(标签基因为Ca

牛单链DNA(ssDNA)酶联免疫分析(ELISA)

牛单链DNA(ssDNA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中单链DNA(ssDNA)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛单链DNA(ssDNA)水平。用纯化的牛单链DNA(ssDNA)抗体

抗单链DNA(ssDNA)抗体检测的介绍

  抗单链DNA(ssDNA)是抗DNA抗体中临床意义和重要性都不如抗dsDNA的一种,DNA是一个大分子的复合物,由两条核苷酸链形成的双螺旋结构。加热时碱基间的氢键断裂,DNA变性产生ssDNA。抗ssDNA的反应位点主要是ssDNA上的嘌呤和嘧啶构成的碱基。

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法             实验材料 DNA

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法             实验材料 DNA

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材 磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤 一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml

免疫学实验抗单链DNA(ssDNA)抗体介绍

  抗单链DNA(ssDNA)抗体介绍:  抗ssDNA是抗DNA抗体中临床意义和重要性都不如抗dsDNA的一种,DNA是一个大分子的复合物,由两条核苷酸链形成的双螺旋结构。加热时碱基间的氢键断裂,DNA变性产生ssDNA。抗ssDNA的反应位点主要是ssDNA上的嘌呤和嘧啶构成的碱基。  抗单链D

CRISPR/Cas12a有话说:让基因编辑具有更多可能性

  作为一个革命性的基因编辑新工具,自CRISPR技术问世以来,就被广泛应用于各个生物领域的研究中,科学家们亲切的称它为“魔剪”,也正是因为有了这把“魔剪”,科学家们可以随心所欲的操纵基因。  早前,来自美国麻省理工学院的博士后研究员Naama Kanarek及其团队在利用CRISPR/Cas9基因

抗单链DNA(ssDNA)抗体检测的临床意义

  抗ssDNA的测定结果缺乏疾病特异性,除SLE患者有较高检出率(50%~60%)外,其他风湿病如混合性结缔组织病(mixel connective tissue disease,MCTD)、药物诱导的狼疮、硬皮病、皮肌炎、干燥综合征,类风湿性关节炎等也都有10%~70%的检出率。当抗dsDNA阴

临床化学检查方法介绍抗单链DNA(ssDNA)抗体介绍

抗单链DNA(ssDNA)抗体介绍:  抗ssDNA是抗DNA抗体中临床意义和重要性都不如抗dsDNA的一种,DNA是一个大分子的复合物,由两条核苷酸链形成的双螺旋结构。加热时碱基间的氢键断裂,DNA变性产生ssDNA。抗ssDNA的反应位点主要是ssDNA上的嘌呤和嘧啶构成的碱基。抗单链DNA(s

揭示Cas12i2双镁离子依赖的DNA切割机制

  近期,中国科学院生物物理研究所研究员王艳丽课题组和中国科学技术大学教授龚为民课题组合作,在Nature Communications上,在线发表题为Structural basis for two metal-ion catalysis of DNA cleavage by Cas12i2的研究

硬实力!杨辉团队Cell,Nature系列子刊等发表8项研究成果

  近一年来中国科学院神经研究所杨辉团队连续取得突破,在Cell, Protein & Cell,Nature Communications ,Nature Cell Biology,Nature Protocol,Nature Methods 等杂志上发表了8项重要研究成果,在基因编辑领域取得重大

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_高效转化法

实验材料细胞试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 取 10 μl 细胞在 YPAD 平板上涂布 2 cm2,培养过夜;或者接种 5 ml 的 YPAD 液体培养基,于 30℃ 震荡培养过夜。2. 将一瓶 YPAD 培养基于 30℃ 平衡过夜。3. 去 50 m

研究人员拓展Cas12a基因编辑工具盒并优化其编辑效率

  近年来CRISPR基因编辑工具的出现,依靠其简单、快速、高效等优势,极大地优化了基因工程的操作方法和手段,并且为基因治疗等领域带来了变革。  目前,科学家已经鉴定出6种类型、20余亚类的CRISPR系统。但是,只有Cas9、Cas12a和Cas12b三种系统被成功改造为基因组编辑工具。其中,Ca

CRISPR将许下一个怎样的未来?

近日,CRISPR界的女神Jennifer Doudna在《Science》杂志上发表了综述文章,展望了CRISPR-Cas技术的应用前景,从基因编辑和转录调控,到成像和诊断。旷日持久的美国CRISPRZL之争终于落下帷幕。9月10日,美国联邦巡回上诉法院裁定,Broad研究所应获得基因编辑技术CR

仅需唾液!幽门螺旋杆菌的高敏高精检测新方法

  中国科学院广州生物医药与健康研究院李志远团队通过环介导等温扩增(LAMP)结合最新的CRISPR/ Cas12a技术,提出针对高致病性幽门螺旋杆菌菌株的高敏感度检测方法。该方法仅需检测唾液样本,就能快速精准检测出感染该菌株的阳性病人,相关研究成果近日以Harnessing enhanced CR

我国学者获得6种新Cas12a-可有效实现哺乳动物基因编辑

  近年来CRISPR基因编辑工具的出现,依靠其简单、快速、高效等优势,极大的优化了基因工程的操作方法和手段,并且为基因治疗等领域带来了变革。  目前,科学家们已经鉴定出6种类型、20余亚类的CRISPR系统。但是,只有Cas9、Cas12a和Cas12b(被来自动物研究所的同一研究团队首次改造为基

高分辨光镊仪器助力发现CRISPRCas12a-Rloop复合体形成机制

  2020年1月14日,Chemical Communications杂志在线发表了中国科学院生物物理研究所娄继忠课题组关于CRISPR-Cas12a系统R-loop复合体的分子机制的最新研究成果,题为Direct Observation of the Formation of CRISPR-Ca

遗传发育所利用环状RNA开发出基于Cas12a的引导编辑器

  基于CRISPR-Cas9的引导编辑器(prime editors,PEs)可同时实现任意碱基类型的精准替换,以及小片段的精准插入、替换和删除。目前,几乎所有的引导编辑器均是依赖于Cas9蛋白开发而成,但Cas9蛋白存在尺寸较大、脱靶效应高和受限于G/C-rich区域编辑的缺点,限制了引导编辑器

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化含有质粒菌株

实验材料细胞试剂、试剂盒YPAD仪器、耗材培养瓶SC 减样选择培养基实验步骤1. 在一个 250 ml 的培养瓶中,接种该菌株到 25 ml 相应的 SC 减样选择培养基中,200 r/min 培养过夜。2. 检测每毫升细胞数,按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。3. 将该体积的培养物加到

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化材料的制备

实验材料DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml 和 10

比Cas9更有效、安全的酶-使CRISPR基因编辑工具更好地工作

  Cas9是CRISPR的手术刀,但有时它会错误编辑基因组正常部分,扰乱健康的功能,而不是修复引起疾病的基因。长期以来,科学家担心这可能会无意中导致健康的细胞变成癌症,而这些担忧在今年6月开始加深,当时有两项研究表明,即使是成功编辑的细胞也容易发生致癌突变。此外,7月在《Nature Biotec

金纳米颗粒有望让基于CRISPR的基因疗法治疗HIV感染

在一项新的研究中,来自美国弗雷德哈钦森癌症研究中心的研究人员通过简化将基因编辑指令递送给细胞的方式,朝着让基因疗法变得更加实用的方向迈出了一步。通过使用金纳米颗粒替换灭活病毒,他们安全地在HIV和遗传性血液疾病的实验室模型中递送基因编辑工具。相关研究结果近期发表在Nature Materials期刊

基因编辑进展梳理-Part-II-基于CRISPRCas9的技术应用篇(五)

二、DNA标记与细胞谱系示踪发育生物学的重点包括构成器官或生物体的细胞类型的多样性以及这些细胞的发育谱系历史。这些方面通常作为一个方向被单独研究,但最近的四篇新论文报道了一种将单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术与基于CRISPR的谱系示踪技术相结合来同时解剖转录组细胞表型和谱系历史的方法。近

NSMB背靠背丨黄志伟-揭示其抑制type-V型Cas12a活性的新机制

  CRISPR-Cas适应性免疫系统为细菌和古细菌对抗噬菌体和质粒入侵提供了核酸序列特异性的防御机制【1】。CRISPR-Cas系统分为6个亚型,其中II型CRISPR-Cas9和V 型CRISPR-Cas12a(Cpf1)系统被广泛应用于基因组编辑和多种多样的生物技术应用【2,3】。在噬菌体感染

哥伦比亚科学家用遗传算法设计自组装ssDNA拼接粒子

  材料设计领域通常遵守所谓的“爱迪生法”,其实这是指一个不断尝试错误,直至找到正确答案的过程,而不是一种系统的理论方法。有人认为,爱迪生利用当时的理论并付诸于尝试法,是因为当时没有合适的理论。而更好的方案应该是一种先验的方法,即提前把想要的材料属性、相应的结构设计确定下来。相关论文发表在最近的美国

抗单链DNA(ssDNA)抗体检测的参考值及临床意义

  参考值  正常人:阴性,酶标法  临床意义  抗ssDNA的测定结果缺乏疾病特异性,除SLE患者有较高检出率(50%~60%)外,其他风湿病如混合性结缔组织病(mixel connective tissue disease,MCTD)、药物诱导的狼疮、硬皮病、皮肌炎、干燥综合征,类风湿性关节炎等

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_快速简便的转化法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 将 10 μl 接种物在 YPAD 平板上涂布 2.0 cm2,培养过夜。2. 对一个转化来说,在微量离心管中用 1.0 ml 灭菌水悬浮一接种环酵母菌。3. 离心沉淀细胞,将水去掉。4. 用 500 μl