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试剂、试剂盒 氯化镁Rockstart 缓冲液three-reaction 主混合液琼脂糖凝胶仪器、耗材 PCR 仪 PCR 管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯化镁,35 mmol/LRockstart 缓冲液（http://klentaq.com)three-reaction 主混合液82ul 5mol/L 的甜菜碱3.2ul 每一种浓度为 10 mmol/L 的 dNTP 混合物1ul Klentaq LA 酶混合物（Clontech 8421-1)6.3ul 左侧 PCR riboprimer(储存液浓度10umol/L)6.3ul 右側 PCR riboprimer(储存液浓度 10umol/L)(没有模板）153.5ul H20 补至总体积 252ul2. 凝胶琼脂糖凝胶，1.4%3. 特殊设备PCR 仪PCR 管二、方法1. 向 3 个 PCR 管中都加入 10ul Rockstart 缓冲液和 10ul......阅读全文
利用核苷酸交换和剪切技术进行DNA碎裂和定向进化 实验材料 T4 DNA 连接
3.6 纯化片段的定量为了分析和比较纯化得到的 DNA 的产量，我们首先使用 SYBR Greenn 试剂来定量。因为 NExT DNA 混编方法的重复率很髙，我们只定量一次即可（见注 16 )。通常我们都能获得浓度为 40~60 ng/μl 的 DNA 片段。( 1 ) 取 2 μl 纯化的 DN
3.5 片段纯化经酶解和化学裂解得到的基因片段（见 10.3.3 ) 即可通过硅胶树脂直接从切割反应液中纯化（见 10.3. 5.1)，也可通过制备型尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化（见 10.3.5.2) 。最初我们认为如想得到特定大小的片段必须通过凝胶电泳来纯化，以确保在重组装反应中没有较长片段甚
在偏远地区进行分析测试会遇到在实验室中不会遭遇到的一系列挑战，特别是在不发达的地区，这种情形尤其如此。聚合酶链式反应（PCR）是一种强大的、快速的和常规的核酸扩增技术。它依赖于PCR反应器中循环地加热和冷却，这需要消耗大量的电力。 常规的PCR反应器大多通过对流热循环（convective t
【摘要】 目的建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法。方法：针对转基因大豆基因组中被导入的35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因，自行设计了两对引物，采用双重PCR同时扩增上述基因，用8g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质，在50cm×100μm i．d．涂壁毛细管中，于一1
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆实验实验材料 寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 电转感受态细胞试剂、试剂盒 氨苄青霉素卡那霉素仪器、耗材 琼脂糖凝胶实验步骤 3.1 概论3.1.1 PCA 对空间排列的要求PCA 片
实验材料寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 电转感受态细胞试剂、试剂盒氨苄青霉素卡那霉素仪器、耗材琼脂糖凝胶实验步骤3.1 概论3.1.1 PCA 对空间排列的要求PCA 片段的三维朝向对于 PCA 报告蛋白是否能正确折叠至关重要，它取决于形成复合体的目的蛋白 N 端或 C 端的朝向（图 15.1
试剂盒成分 1、 YSY Buffer 2、2*PCR Master Mix（使用实验室常用的酶即可，由客户自备） 储藏条件：4oC实验步骤 1、细胞与动物组织的准备： 1.1 培养细胞准备： 以培养密度为 1´106
微流控芯片已经广泛于医学、生物、电子、流体、化学等领域，且微流控芯片可把样品制备、反应、分离、检测、扩增、分析等集成到一块几微米至几百微米尺度的芯片上并自动完成所有基本过程。目前，微流控芯片已经广泛地应用到医学基因诊断方面，例如基因多态性检测、基因高效性测序、基因快速性扩增等，为此，本文主要对微流控
利用 DNA 混编模仿自然进化过程是优化 DNA 和蛋白质性质的常用方法。这里我们介绍这类方法的一个新进展，即利用标准的聚合酶链反应（PCR)放大基因文库时与其他 4 种标准 dNTP—起掺入 dUTP 作为确定 DNA 碎裂位点的交换核苷酸。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特
1.1.3.2 模板制备程序完全的体外大规模模板制备工作是达成高通量、低价格测序技术的前提。已广泛使用的乳液PCR扩增技术就是一种很好的方法。不过，由于很难在热循环测序反应中保证乳液微滴的稳定性，因此最开始实验的模板扩增方法是恒温扩增法（isothermal）。乳液PCR不需要借助细菌的帮助就能扩增
实验材料:小麦 试剂、试剂盒:β-巯基乙醇 &nb
来自清华大学、中科院微生物研究所的研究人员报告称，他们开发出了一种新技术，通过Cas9辅助靶向染色体片段（CATCH），可一步靶向克隆出大基因簇。这一重要的研究成果发布在9月1日的《自然通讯》（Nature Communications）杂志上。 清华大学的朱听（Ting Zhu）研究员、特
—、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱（SigmaB-2629)蓝色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四环素Ticarci
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物，接着用酶处理 PCR 产物，然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤，即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导致了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。 一、GST pull-down实验 GST是指谷胱甘肽巯基转移酶，GST pull-down实验是一个行之有效的验
实验材料 T4 DNA 连接酶感受态细胞试剂、试剂盒 Taq 聚合酶PCR 缓冲液溴化乙锭（EB) 溶液过硫酸铵（APS) 水溶液仪器、耗材 琼脂糖凝胶实验步骤 3.1 克隆NExT 混编过程中，使用包含限制性酶切位点的混编引物的配对位点应设置在紧挨着目标基因的两侧，理
为什么有人吃东西总是那么“津津有味”，说话总能“津津乐道”？那是因为他们的唾液质量好，产生唾液的能力也好。您有仔细观察过自己舌头上的味蕾是什么样子吗？味蕾就像小触角在舌头上面飘着，如果没有唾液的滋润，舌头是干的，味蕾的功能就会退化，那么你吃什么东西都会是一个味儿：味同嚼蜡。我们吃东西觉得好吃，靠的是
新的基因合成方法可使蛋白质表达最优化。 在合成生物学与生物技术中，定制基因序列的可靠性和成本效益对于相关应用是至关重要的。尽管脱氧核糖核酸（DNA）微阵列对于基因合成的短寡核苷酸池也是一个划算的来源，但是这些复杂混合物必须经过放大和正确的组装。一项最近的研究描述了一种方法，即将30
基因组编辑技术CRISPR/Cas9被《科学》杂志列为2013年年度十大科技进展之一，受到人们的高度重视。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称，Cas是CRISPR相关蛋白的简称。CRISPR/Cas最初是在细菌体内发现的，是细菌用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。图片
1. 制出正义链（top strand)。TRAFIG 程序可以在没有基因要翻译的情况下被运行，但可以指定输出为 40bp 长、度的线性链。这就可以很方便地提供一个设计序列的正义链的列表，它按 40bp 的线性链排序。如此每一个线性链都可以被标上一个名字或者编号，从而方便地以 E-mai
实验步骤1. 制出正义链（top strand)。TRAFIG 程序可以在没有基因要翻译的情况下被运行，但可以指定输出为 40bp 长、度的线性链。这就可以很方便地提供一个设计序列的正义链的列表，它按 40bp 的线性链排序。如此每一个线性链都可以被标上一个名字或者编号，从而方便地以 E-mail
实验步骤 1. 制出正义链（top strand)。TRAFIG 程序可以在没有基因要翻译的情况下被运行，但可以指定输出为 40bp 长、度的线性链。这就可以很方便地提供一个设计序列的正义链的列表，它按 40bp 的线性链排序。如此每一个
克隆（Clone）是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆（Molecular Cloning）是指由一个祖先分子复制生成的和祖先分子完全相同的分子群，发生在基因水平上的分子克隆称基因克隆（DNA克隆）。其基本原理是：将编码某一多肽或蛋白质的基因（外源基因）组装到细菌质粒（
基因芯片 技术的诞生为生物技术工作人员打开了一道科研的便利之门，曾被评为1998年年度十大科技进展之一。本文对基因芯片的实验原理、技术基础、分类、用途、操作主要环节等内容做详细的介绍。 1.基本原理和技术基础 基因芯片以DNA杂交 为基本原理，基于A和T、G和C的
基因检测技术是近年来伴随“精准医疗”概念的提出而迅速发展起来的一门科学技术，它可以从基因组机制上阐释遗传学、发育生物学、进化生物学等学科的经典概念，在全基因组水平延伸了染色体高级构象、细胞异质性、功能模块等新概念，为精准医学开辟了应用性新领域。 近年来，随着分子水平的基因检测技术平台不断发展和
细胞工厂操作系统 自然微生物能生产的化学品种类很少，远不能满足生产能源、化工、材料和药物领域各种化学品的需求。另一方面，自然微生物即使能生产某些化学品，其产量也很低，不具备经济可行性。 如何拓展微生物细胞生产化学品的种类和如何提高细胞的生产效率是限制