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1. 细胞的准备a) 复苏293细胞，传代培养1-2代，调整好细胞状态，务必4代以内完成转染实验。b) 在转染前1天，用胰酶消化传代，将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中，加入2ml完全培养基（DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax），摇匀后置于5% CO2、95% 湿润空气、37℃培养箱中培养，以保证次日转染时细胞密度达70%左右。2. 转染a) 转染当天，从293细胞中移除培养基，分别换上新鲜的1.8ml DMEM+10%FBS培养基（不含抗生素），37℃孵育2h。b) 配制转染试剂混合物c) 使用转染试剂POLO3000：d) A管：将4ug DNA与 100ul DMEM（基本），混匀；e) B管：将6ul POLO3000与100ul DMEM（基本）......阅读全文
慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统，其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合
人类与病毒抗争已经有数千年的历史，早在古希腊的记载中，我们就可以看到疫情席卷一个又一个城市，然而当时的医生却束手无策。 疫苗的出现使人类第一次从预防的角度战胜了病毒。WHO宣布天花被消灭的那天，全人类都为这个消息感到兴奋。随着不断推出的疫苗产品，那些曾让人们闻风丧胆的传染病，最终停留在了历史书
不论是细胞治疗还是基因治疗都离不开病毒载体。目前使用最多的病毒载体类型包括：腺相关病毒（AAV）、慢病毒（Lv）、逆转录病毒（Rv）和腺病毒（Adv）等，这些常用病毒载体特性如下图所示：特征慢病毒Lentivirus逆转录病毒Retrovirus腺相关病毒AAV腺病毒ADV基因表达稳转/瞬转稳转瞬转
1腺病毒的包装，纯化和感染技术背景：Adeasy 系统利用了腺病毒具有的高感染能力，可高度浓缩等优点，并破坏了腺病毒基因组中的早期基因E1，使之成为较为安全、高效的病毒载体。利用带有E1 基因的293 细胞作为包装细胞，通过倍比扩增，富集病毒颗粒，并通过CsCl 梯度离心，透析进行分离纯化。对绝大多
原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今
2.2 rAAV shRNA克隆服务 Vigenebio为您提供了多种表达shRNA的rAAV，包括U6或H1启动子和作为哺乳动物表达标记的GFP或RFP。同时，也可根据您感兴趣的基因提供shRNA设计服务。2.3 rAAV载体容量腺相关病毒载体能够感染分裂和非分裂细胞。毒性和免疫原性低，适合以相对
创新药物的研发，是使我国由医药大国走向医药强国的必由之路。国家无论是“863计划”、“973计划”、还是今天的“国家科技重大专项”，都对新药研发寄予了厚望并给予了多方面的鼓励支持，国内药企亦不负众望，共同肩负起新药创制的重任。经多年厚积薄发，一个个具有自主知识产权的新药产品诞生并成功上市，“中国
核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的
在医学领域，基因治疗(gene therapy)是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。也包括转基因等方面的技术应用。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。修改人类DNA的第一次尝试是由Ma
腺相关病毒(AAV)载体是治疗多种人类疾病基因传递的主要平台。最近在开发临床所需的AAV衣壳、优化基因组设计和利用革命性生物技术方面的进展对基因治疗领域的发展作出了重大贡献。在AAV介导的基因替换、基因沉默和基因编辑方面的临床和临床上的成功帮助AAV作为理想的治疗载体获得了广泛的应用。 腺相关
293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因，治疗恶性肿瘤，心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展；利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质，如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293
病毒载体经典的病毒载体主要有四类，腺病毒，腺相关病毒，逆转录病毒和慢病毒。他们具备侵染细胞谱广，效率高等特点并广为研究人员熟知。它们的特点总结归纳如表一。表一：六大病毒载体技术的比较 载体感染广谱性靶细胞类型表达形式表达时间免疫原性外源片段容量(Kb)滴度(TU/ml)缺点腺病毒载体高分裂
1月25日，北京大学基础医学院王月丹、初明团队通过计算机辅助药物高通量筛选，发现氨溴索等药物有望用于武汉新型冠状病毒的治疗。氨溴索，又称沐舒坦，是一种呼吸道润滑祛痰药，临床上常用于急慢性支气管炎等疾病。北京大学基础医学院副教授初明告诉《中国科学报》，在药物筛选中发现13种候选药物，其中沐舒坦是常用药
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，一般实验方向
产品说明书本产品仅限用于研究，严禁用于疾病诊断。本产品仅供购买方内部研究使用，未经Vigenebio公司书面许可，严禁转售。产品有限责任担保Vigenebio保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了Vigenebio更换产品的责任。Vigenebio不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用
据不完全统计，3月166项食品及相关标准正式实施，其中新增标准134项，代替标准32项，新增标准占标准总数的80.7%。 3月起正式实施的标准中，国家标准37项，地方标准47项，行业标准49项，团体标准16项，其他17项。这些标准涉及产品或原料的标准，规程规范标准，检测方法标准等，其中，行业标
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控，突变分析等的常规工具。细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上。稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中。细胞转染途径（一） 物理介导：
随着电子商务迅速发展，快递包装物料的过度使用引发人们关注。近日，国家邮政局出台《推进快递业绿色包装工作实施方案》，提出快递业包装要在绿色化、减量化、可循环等方面取得明显效果。 近日，国家邮政局出台了《推进快递业绿色包装工作实施方案》（以下简称《实施方案》），《实施方案》的推出将为快递业带来哪些
IS PCR的技术特点 （1）既具有PCR的特异性与高灵敏性，又具有原位杂交的定位准确性；（2）测到低于2个拷贝量的细胞内特定DNA序列，甚至可检测出单一细胞中的仅含一个拷贝的原病毒DNA；（3）有助于细胞内特定核酸序列定位与其形态学变化的结合分析；（4）可用于正常或恶性细胞，感染或非感染细胞的鉴定
疫情防控阻击战突如其来，一场没有硝烟的战争在中华大地骤然打响。 疫情当前担使命，忠诚履职践初心。疫情发生以来，全国标准化战线不断提升政治站位，切实把思想和行动统一到习近平总书记重要指示精神和党中央重大决策部署上来，勇于担当、敢于负责，统筹推进疫情防控和经济社会发展工作，确保两手抓、两手硬、双胜
突发新型冠状病毒（2019 novel coronavirus，2019-nCoV）肺炎疫情以来，感染病例快速上升。随着疫情的发展和防控力度加大，全国各地乃至境外均有病例报道[1,2,3,4]，及时对急重症及疑似患者进行诊断需要快速有效的方法，病毒核酸检测可为诊断提供直接证据[5,6]。核酸检测
重组DNA技术可以用于：（1）据需要选择目的基因（DNA片段）在体外与基因运载体重组，转移至另一细胞或生物体内，以达到改良和创造新的物种和治疗人类疾病的目的；（2）是现代分子生物技术发展中最重要的成就之一，即是基因工程(Gene Engineering)的核心技术。实验方法原理Adeasy系统利用了
水是生命之源，对于每个人来说都是非常重要的。目前我国水资源状况不容乐观，首先水总量排在世界第六位，人均2300多立方米，人均排全世界110位，是被联合国列位13个贫水国家，是水资源非常短缺的国家。二是水污染严重。2003年公布的407个固 定检测点，7大水系，只有38%符合3类水标准。比如说太湖
基因编辑是一种遗传工程技术，针对某个序列已知但功能未知的序列，通过改变生物的遗传基因，使其特定的基因功能丧失作用，通过研究对生物体造成的影响，进而推测出该基因的生物学功能。本文为你科普基因编辑三大技术： 基因敲除 进行DNA水平编辑。一般用于构建基因敲除鼠模型。 CRISPR/Cas9：C
为加强药品生产监管，进一步指导和规范药品生产企业科学系统地开展除菌过滤技术及应用、无菌工艺模拟试验，国家药品监督管理局组织制定了《除菌过滤技术及应用指南》，作为实施《药品生产质量管理规范（2010年修订）》的指导性文件，现予发布，自2018年10月1日起施行。 特此通告。 附件：除菌过滤技术
时至年底，各大跨国药企的高层再次齐聚中国，出席各类会议论坛，充分表达对于中国市场的重视。 异于往年的是，2016年跨国药企的活跃度非同一般。据一位曾先后任职三家跨国药企管理层的人士透露，除了必须“拜见”的中央部委高层，2016年跨国药企高管们还积极走向地方省市，洽谈投资建厂。 2016年11
光遗传学技术是一种结合遗传学与光学技术，在复杂如自由活动个体的生物系统中实现定点的、快速的控制某一精确定义的生物学过程的技术。通过引入光敏感蛋白的受体或通道蛋白至特定组织特定细胞中，并经特定参数的光信号控制，光遗传学技术能够关闭或激活某一类细胞的生物学功能，从而实现在细胞、环路、器官和个体等多个层
rAAV的局限性有哪些？1.体外实验表达水平较低：主要是因为rAAV病毒的基因组是单链DNA，在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染rAAV病毒的同时感染辅助病毒比如Ad5型腺病毒或者终浓度10~50mM的丁酸钠等方法提高细胞实验的rAAV表达量。2.需较长时间开始表达
基因治疗方案和药物在全球范围内接连获批，2017年美国接连批准了三项基因治疗的上市，两个基因治疗方案和一个直接给药型的基因治疗药物。国内也不遑多让，12月8日至12月29日，已有多达5家企业的申报获得受理，另有一些公司也在积极布局CAR-T免疫疗法，有望在2018年申报临床。 基因治疗重返中
WHITE PAPER: Virotherapy Process Optimization采用一系列方法将病毒工程开发用于疾病治疗已经成为一种新型的应用，该应用广泛的定义为病毒疗法，包括用于基因治疗的病毒载体(Figure 1)和具有溶瘤细胞功能的病毒(Figure 2)。虽然这些产品大部分