慢病毒载体相关知识问答大总结
慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统，其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合体进入细胞核并整合到靶细胞的染色体DNA。由于靶基因或基因干扰序列整合到染色体上并且伴随着细胞分裂时DNA的复制一起复制，基因的导入能够获得稳定的表达。慢病毒的显著优势在于其可以整合到非分裂细胞，而其他载体(如非病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体)不具备整合到靶细胞染色体的特性，或者只能整合到分裂细胞的染色体(如常规的逆转录病毒)。目前我们使用的慢病毒载体是基于HIV-1改造而来，该载体使用最为广泛，经过科学家的多次改造在包装滴度和使用安全性等方面都非常理想。在实际的使用中我们可以用来表达目的基因或目的基因加上报告基因，近年来随着R......阅读全文
慢病毒载体相关知识问答大总结
慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统，其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合
病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程
一、实验流程（1和2为并列步骤）慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，PCR(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（CDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
高滴定度慢病毒载体产物实验
实验材料 293T细胞 试剂、试剂盒 杜氏改良培养基TE 缓冲液CaCl22 X HeBSPBS漂白剂 仪器、耗材 乙醇喷壶组织培养皿培养箱灭菌离心管过滤器组织培养瓶 实验步骤 展开
高滴定度慢病毒载体产物实验
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本载体转染 293T 细胞实验步骤实验材料293T细胞 试剂、试剂盒杜氏改良培养基
高滴定度慢病毒载体产物实验
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本载体转染 293T 细胞实验步骤 实验材料 293T细胞
人感染猪流感相关知识问答
人感染猪流感相关知识问答(供参考) 什么是猪流感? 猪流感是由A型流感病毒引起的猪的呼吸道疾病，是一种感染率高而死亡率低的动物传染病。猪流感通常只引起猪发病，但有时也能突破种间屏障而感染人。人感染猪流感，通常与接触猪有关，但目前墨西哥、美国发生的人感染猪流感已证实人与人之间可传播。
轮状病毒防治基本知识问答
1．什么是轮状病毒？轮状病毒于1973年最早由Bishop用电镜从澳大利亚腹泻儿童肠活检上皮细胞内发现，形如车轮状，故命为“ 轮状病毒”。 目前，轮状病毒分为7组，即A～G组。A、B、C三组能引起人畜共患的腹泻，其他各组主要引起动物腹泻。A组轮状病毒主要引起婴幼儿腹泻，发病高峰在秋冬季节，故
病毒包装技术3——慢病毒载体构建及包装流程介绍
1 菌液的准备 1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。 1.2. 将单
化合物活性预测相关知识问答
Docking相关 A:新手想问一下，docking结果怎么判断小分子和蛋白产生了结合呀，形成了疏水键或氢键吗? B:打分越低越好，一般会设置一个已知的配体用来做参照，或者说用来检验参数是否合理。 A:我是选择了有配体的蛋白，处理了蛋白和分子后进行docking，得到这个结果。
使用串联切向流过滤高效浓缩慢病毒载体
简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一，与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是，慢病毒载体可转导非分裂细胞，并可携带更多的转基因盒，在细胞中的转基因表达时间也更长，即可获得更高的滴度，而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系，但原代细胞较难