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脐带和脐血来源干细胞的培养实验_脐带和脐血的准备

实验材料脐带试剂、试剂盒培养基:脐带运输培养基:Eagle基础培养基(EBM)添加300 U mL青霉素300 μg mL链霉素150μg mL庆大霉素和lμg mL两性霉素B。 MSCs培养基:含2 mmol L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM(LG-DMEM)添加10% 热灭活胎牛血清(FBS)100 U mL青霉素和l00μg mL链霉素。仪器、耗材夹子针头注射器实验步骤(a)出生后,用两个夹子在近新生儿的末端和近胎盘的末端夹住脐带以封闭脐带;(b)剪下两个夹子间的脐带,一端在接近新生儿处,另一端剪去胎盘;(c)剪下脐带后放入运输培养基中送去实验室,整个处理过程在6〜12 h内。(a)夹住脐带,尽可能靠近新生儿处剪断脐带。(b)用Betadine或70%酒精的棉花擦拭针头插入位点,位点在脐带近胎儿末端。(c)为了收集到最大量的脐血,脐带的处理动作要尽可能小。(d)接着用收集袋或50mL注射器的针头插人步骤b中处理好的脐静脉插人......阅读全文

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_脐带和脐血的准备

实验材料脐带试剂、试剂盒培养基:脐带运输培养基:Eagle基础培养基(EBM)添加300 U mL青霉素300 μg mL链霉素150μg mL庆大霉素和lμg mL两性霉素B。 MSCs培养基:含2 mmol L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM(LG-DMEM)添加10% 热灭活胎牛血清(FBS)10

脐带和脐血来源干细胞的培养实验

脐带和脐血的准备 从脐静脉分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 酶消化法从Wharton胶中分离干细胞            

脐带和脐血的准备

脐带血(umbilicalcordblood,UCB)是出生后脐带(umbilicalcord,UC)和胎盘中的血液。这在过去一直被认为是医疗废物而废弃。然而,近年来逐渐认识到UCB是HSCs和其他干细胞的一个重要来源,还具有操作和伦理的优势。从]988年第一例UCB移植治疗范可尼贫血(Fancon

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞

实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和

脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法

种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带,保存在PBSA中,1〜24 h内处理标本。(b)去除血管,将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天,使细胞从

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法

实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后,可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管,将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管,用无血清DMEM洗,室温250g离心5min。(d)倒掉上清液,将离

脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离

实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物(10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体)ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白(HAG。用P

脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源多能前体细胞分离

实验材料脐血来源的MNCs。试剂、试剂盒灭菌培养基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)分离和制备脐血来源的MNCs。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)细胞复苏后在30 min内,用台盼蓝染色进行活细胞计数。(d)

脐血脐带中干细胞分离实验

非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞(cord blood-derived embryonic-like stem cells,CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞(cor

脐血脐带中干细胞分离实验

实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分