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简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一，与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是，慢病毒载体可转导非分裂细胞，并可携带更多的转基因盒，在细胞中的转基因表达时间也更长，即可获得更高的滴度，而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系，但原代细胞较难转导，需要进行载体浓缩以获得较高浓度。此外，一些载体因整合了会降低滴度的遗传元件，且大多数细胞类型也不耐受产毒细胞生长培养基或其分泌蛋白，所以浓缩及清洗是慢病毒载体使用的必要步骤。超速离心是病毒颗粒浓缩的常用方法之一，但其浓缩系数较低，每次处理量也偏小，且繁琐的多步操作会降低病毒颗粒回收率。离心过滤是相对较简单的浓缩方法，但过滤器本身会捕获截留大量载体，造成损耗。相较而言，切向流过滤（TFF）操作简单，损耗低，且可通过洗滤过程有效降低产毒细胞代谢物及分泌蛋白，但传统的一步式TFF浓缩程度仅可达50-100倍，本实验使用两步TFF，成功......阅读全文
简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一，与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是，慢病毒载体可转导非分裂细胞，并可携带更多的转基因盒，在细胞中的转基因表达时间也更长，即可获得更高的滴度，而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系，但原代细胞较难
简介单纯疱疹病毒2型（HSV-2）是溃疡性生殖器疱疹的主要病原，全球每年新增感染达2300万例，其治疗方式主要围绕口服抗病毒治疗展开，但已有HSV-2候选疫苗进入临床试验，包括灭活、活性衰减、亚单位、DNA及多肽疫苗等，其中，野生型病毒删除UL5和UL29基因构建的复制缺陷型HSV-2疫苗株病毒（d
在现代医学中，输血是出血性休克、贫血等病症重要的治疗方法，也是常规手术的重要组成部分，但是肝炎及AIDS等小概率传播风险，总是干扰着输血的安全进行。此外，输血前，还需对供体血液进行分型，并与受体血型交叉匹配，以避免出现排异现象。对此，一种相对简便的替代方法是，使用血红蛋白（Hb）类氧载体（HBOCs
背景/介绍抗体（Abs），或免疫球蛋白（Ig），被广泛用于许多不同的科研和治疗性应用1。特别是，单克隆抗体（mAbs）在诊断、蛋白质纯化以及医疗应用中的使用显著增加2-5。妨碍治疗性mAbs使用的一个主要障碍是皮下注射需要使用较高的浓度，因为这是优先选择的给药方法。按FDA要求，皮下给药时，注射体积
如图2所示，1.0mm内径纤维的起始通量高于0.5mm内径纤维（18L/m2/hr vs. 12L/m2/hr）。正如预期，通量随IgG溶液浓度的增加而降低。运行过程中，TMP恒定为5psig，直到接近运行结束时，增加至约10psig。此时，通量降低至0L/m2/hr。图2同时显示，在整个运行过程中
来自美国俄亥俄州立大学等的科学家们在2020年第117期的《Biotechnology and Bioengineering》杂志上发表了题为“Novel Manufacturing Method for Producing Apohemoglobin and its Biophysical
实验概要本文介绍了慢病毒浓缩与纯化的两种方法：超速离心沉淀法，PEG-8000浓缩法。实验材料慢病毒上清液实验步骤超速离心沉淀法： 1. 取6个Ultra-clear SW28离心管，用70%乙醇消毒后，放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟； 2. 每个Ultra-clear SW28离心管中
方法一 超速离心沉淀法1. 取6个Ultra-clear SW28离心管，用70%乙醇消毒后，放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟。2. 每个Ultra-clear SW28离心管中加入约32ml的预先处理的病毒上清液。3. 取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%的蔗糖溶液。将移液管一
慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统，其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本载体转染 293T 细胞实验步骤实验材料293T细胞