酶的磷酸化与脱磷酸化的比较

磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点:①须由另一种酶催化,而且酶的活性形式与其非活性形式的相互转变,正、逆两个方向是由不同的酶分别催化的。②其修饰过程出现酶分子上共价键的变化,使酶的化学结构有所改变。③酶分子出现组成的变化。化学修饰常见形式为磷酸化与去磷酸化,但也可为甲基化、乙酰化等。这些化学修饰都可引起酶分子组成的变化。④酶的化学修饰反应是由酶催化的反应,酶的催化效率很高。一个酶分子可催化多个作用物分子(酶蛋白)出现上述组成变化,因而有放大效应。酶的别构调节与化学修饰调节,都是调节现有酶的活性、通过影响现有酶的结构转而影响其活性。但在是否需要其它酶的参与、酶分子有无共......阅读全文

酶的磷酸化与脱磷酸化的比较

磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点

抗体磷酸化与非磷酸化的区别与关系

非磷酸化是测该蛋白的含量,不能知道其活性状态,抗体磷酸化是测该蛋白的磷酸化水平如何,侧重于了解该蛋白的一种活性状态。很多信号通路的蛋白在受到某些刺激后都是通过改变其磷酸化水平的改变而引起细胞的一系列反应,其蛋白含量并不见得会有多大的变化。首先要说明的就是检测的蛋白质在你检测的组织或者细胞中是表达的,

什么是磷酸化与去磷酸化

磷酸化,将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。去磷酸化:磷酸基团的除去,对许多生物起着“开/关”作用。防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行单

磷酸化酶的性质

糖基转移酶类下的一个组群,即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中,包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase,EC2.4.1.1,分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.

磷酸化酶的相关知识

1) 磷酸化酶激酶;磷酸化酶b激酶;phosphorylase kinase;phosphorylase b kinase2) 多核苷酸磷酸化酶;多聚核糖核苷酸;正磷酸核苷酸基转移酶;多聚核苷酸磷酸化酶;PNP酶;polynucleotide phosphorylase;PNPase3) 磷酸化酶磷

酶法检测磷酸化实验

基本方案1 非特异酸性磷酸酶消化磷酸蛋白质 基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质             实验方法原理实验材料 含 100~200 μg 总蛋白的样品 试

酶法检测磷酸化实验

实验方法原理实验材料 含 100~200 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒  50 mmol L NN'-2-羟丙磺酸哌嗉(PIPES)Sephadex G-25 柱(可选)PIPES 2-ME 或 RPERS DTT 缓冲液马铃薯酸性磷酸酶2 × SDS-PAGE 样品缓冲液100 mmol

嘌呤核苷磷酸化酶的分类

按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmoph

嘌呤核苷磷酸化酶的应用

在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。

嘌呤核苷磷酸化酶的分类

按照PNP底物专一性和分子量大小,可以将不同生物来源的PNP分为为高分子量同源六聚体类和低分子量同源三聚体类。多数细菌PNP属六聚体,亚基分子量为25kDa,底物专一性不强,能接受腺苷、鸟苷、肌苷为底物;哺乳动物和部分微生物(Bacillus cereus、Bacillus stearothmoph

磷酸化酶的基本信息

磷酸化酶(phosphorylase),可添加磷酸基团到受体上。以无机酸磷酸作为磷酸基团供体。

磷酸化酶的理化性质

糖基转移酶类下的一个组群,即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中,包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase,EC2.4.1.1,分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.

嘌呤核苷磷酸化酶的应用

在体外反应时,若加入另外一种嘌呤碱基或其类似物,可以合成新的嘌呤核苷或类似物,现已广泛用于微生物酶法生产核苷类抗病毒药物,如阿糖腺苷、利巴韦林等。

关于磷酸化酶的性质介绍

  糖基转移酶类下的一个组群,即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中,包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase,EC2.4.1.1,分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.

嘌呤核苷磷酸化酶的作用

该酶可逆地催化嘌呤核苷磷酸解反应,将底物嘌呤核苷分解成对应的嘌呤碱及核糖-1-磷酸。

淀粉的合成──淀粉磷酸化酶

原理   植物的组织中有一种淀粉磷酸化酶,能利用1—磷酸葡萄糖合成淀粉,生成的淀粉可用I2 —KI染色检出。     仪器药品   台天平     离心机 水浴锅     研钵 移液管     1%1—磷酸葡萄糖 0.1mol/L柠檬酸  0.2mo

使用Azurespot分析软件定量非磷酸化与磷酸化蛋白

  背景去除背景扣除对于有效定量是必不可少的。 例如,AzureSpot有五个自动后台选项和三个手动选项。> 如果背景不均匀,请使用 Rolling Ball。 类似指定半径的圆盘在泳道轮廓下“滚动”,对信号求平均,从而产生平滑小的变化。 半径越大,滚动越平滑。> 如果轮廓的末端与轮廓的其余部分没有

使用Azurespot分析软件定量非磷酸化与磷酸化蛋白

  在上期我们回顾了使用多重来成像磷酸化蛋白的技巧,在这部分中,我们将介绍使用Azurespot分析软件进行定量。   背景去除   背景扣除对于有效定量是必不可少的。 例如,AzureSpot有五个自动后台选项和三个手动选项。    > 如果背景不均匀,请使用 Rolling Bal

通过被磷酸化和去磷酸化来被调节活性的酶有哪些

磷酸化和去磷酸化就是细胞内的信号级联放大系统。简单来说,就是细胞针对外界各种信号(物理或者化学)在体内引发一系列指数级的催化反应(多为磷酸化),导致核内特定基因的表达,成功完成对外界信号的应激性。当这种应激完成之后,再经由去磷酸化去除这些蛋白的活力,使细胞恢复到正常状态。磷酸化是可逆共价修饰中最常见

磷酸化位点分析实验用酶和化学方法去磷酸化

实验材料蛋白样品实验步骤这种方法得到特别关注、但它能提供磷酸肽中磷酸化氨基酸的定位,可以在非磷酸肽占主导地位的混合物中鉴别磷酸肽,此方法使用的是磷酸酶 。用简单的 MALDI-TOF仪器就可以得到磷酸化蛋白水解后产生肽段的质量,同样的样品用磷酸酶处理后,除去了丝氨酸,苏氨酸和酪氨酸上的磷酸,再分析其

酶法检测磷酸化实验1

基本方案1 非特异酸性磷酸酶消化磷酸蛋白质对可逆蛋白质磷酸化在调节植物和动物细胞生理过程中起重要作用的认识正不断加深,许多技术都能用于揭示共价结合于蛋白质的磷酸基的存在。用 32P 代谢标记细胞随后分离 32P 标记蛋白质是揭示蛋白质磷酸化的最直接方法。实验材料含 100~200 μg 总蛋白的样品

酶法检测磷酸化实验2

基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质实验方法原理蛋白质磷酸酶和上面讨论的普通磷酸酶不同,它可在磷酸蛋白质底物的不同位点选择性脱磷酸化,因而可用于研究与蛋白质键合的特定磷酸基的功能性作用。实验材料含 100 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒 50 mmol/L Tris • Cl缓冲液 /

焦磷酸化酶的基本信息

中文名称焦磷酸化酶英文名称pyrophosphorylase定  义催化将某一基团从其焦磷酸酯化合物转移至另一分子并释放无机焦磷酸的酶类:X-P-P-P+P-Y←→X-P-P-Y+PP。X-P-P-P通常指核苷三磷酸,归属于核苷酰基转移酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

磷酸化酶激酶的基本信息

中文名称磷酸化酶激酶英文名称phosphorylase kinase定  义编号:EC 2.7.1.38。催化磷酸化酶的两种变构形式(磷酸化酶a及b)转换的酶。在ATP存在下,催化无活性的磷酸化酶b的磷酸化,使成为有活性的磷酸化酶a。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

磷酸化酶激酶的基本信息

中文名称磷酸化酶激酶英文名称phosphorylase kinase定  义编号:EC 2.7.1.38。催化磷酸化酶的两种变构形式(磷酸化酶a及b)转换的酶。在ATP存在下,催化无活性的磷酸化酶b的磷酸化,使成为有活性的磷酸化酶a。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

焦磷酸化酶的基本信息

中文名称焦磷酸化酶英文名称pyrophosphorylase定  义催化将某一基团从其焦磷酸酯化合物转移至另一分子并释放无机焦磷酸的酶类:X-P-P-P+P-Y←→X-P-P-Y+PP。X-P-P-P通常指核苷三磷酸,归属于核苷酰基转移酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

关于糖原磷酸化酶的基本介绍

  GP是一种二聚体酶,存在3种同工酶,其中GP-BB存在于心和脑中,是体现心肌缺血较好的早期指标。糖原主要贮存在肌肉和肝脏中,肌肉中糖原约占肌肉总重量的1-2%约为400克,肝脏中糖原占总量6-8%约为100克。肌糖原分解为肌肉自身收缩供给能量,肝糖原分解主要维持血糖浓度。  糖原分解不是糖原合成

磷酸化的和非磷酸化的抗体有什么不同

通常来说,磷酸化抗体芯片上检测某一个磷酸化位点会设置一对抗体,即:磷酸化的和非磷酸化的抗体。说到区别,可能从制备讲起你可以更加清晰一些。首先就是多肽合成,由于磷酸化位点的保守性,对某一个磷酸化位点周边20个氨基酸左右的序列合成多肽,磷酸化多肽肯定带有磷酸基团,非磷酸化多肽就掉了这个磷酸基团。然后就是

磷酸化的和非磷酸化的抗体有什么不同

通常来说,磷酸化抗体芯片上检测某一个磷酸化位点会设置一对抗体,即:磷酸化的和非磷酸化的抗体。说到区别,可能从制备讲起你可以更加清晰一些。首先就是多肽合成,由于磷酸化位点的保守性,对某一个磷酸化位点周边20个氨基酸左右的序列合成多肽,磷酸化多肽肯定带有磷酸基团,非磷酸化多肽就掉了这个磷酸基团。然后就是

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的