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日本成功地利用一滴血克隆出小白鼠

日本理化学研究所生物资源中心遗传工学基础技术所的小仓敦郎所长领导的研究小组开发出了从血液中高效提取白血球细胞,并利用提取后的白血球细胞进行核移植,成功地克隆出了小白鼠。与目前从脏器中提取移植细胞的方法相比,该方法能更高效地克隆出小白鼠,并且不会对克隆母体产生损伤。相关研究成果发表于美国科学期刊《Biology of Reproduction》电子版。 小仓敦郎的研究小组从小白鼠的尾巴中采集0.015-0.045毫升的血液,从中提取白血球细胞并进行核移植操作后即可克隆出小白鼠,利用该方法克隆出的小白鼠的出生率、繁殖能力以及寿命等与现有克隆方法相比没有任何差异。现有方法主要从捐献者的体细胞中提取细胞核,将细胞核移植到去核卵细胞并植入子宫进行克隆。为了获取捐献者的细胞核通常需要从子宫等脏器内获取体细胞,从而会对捐献者产生一定的损伤。此次理化学研究所研发出的新技术只需一滴血便可实现高效、无损伤的克隆。 ......阅读全文

石英晶体微天平和传统QCM的区别

  一、克隆的早期研讨   克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁衍系。同一克隆内一切成员的遗传构成是完整相同的,例外仅见于有突变发作时。自然界早已存在自然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实践上就是一种克隆。但是,自然的哺乳动物克隆的发作率极低,成员数

关于目前克隆技术研讨现状分析

  一、克隆的早期研讨   克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁衍系。同一克隆内一切成员的遗传构成是完整相同的,例外仅见于有突变发作时。自然界早已存在自然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实践上就是一种克隆。但是,自然的哺乳动物克隆的发作率极低,成员数

克隆技术研究现状

一、克隆的早期研究    克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而,天然的哺乳动物克隆

现代免疫学时期概述

  自天然耐受现象的发现,克隆选择学说的提出为免疫生物学的发展奠定了理论基础,使现代免疫学的发展方向发生了重大变化。使免疫学从抗感染免疫的概念中解脱出来,进而发展为生物机体对“自己”和“非己”的识别,藉以维持机体稳定性的生物学概念。这一发展时期自60年代迄今发现了胸腺的免疫功能,确认了淋巴

从皮肤里提取万能细胞:无伦理学争论的重大发现

干细胞的另一个名字叫“万能细胞”,它们通常能够成为受损组织与器官的“个性化”替代品。身体里有个类似于女娲的“干细胞”。女娲是抟土造人,干细胞的任务就是分化出各种功能细胞。然后这些细胞再进行特定的组合,行成我们身体内的各个组织和器官。故称为让生命延续的干细胞。我们的皮肤划破了,过两天自己就会愈合,又或

CRISPR 技术进行细胞 TP53 基因敲除

实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体,转染 293T 细胞,构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理:pCas9/gRNA1 载体表达

原代细胞的培养与建系-1

                      原代细胞的培养与建系   细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆            

英国培育出四只新克隆多莉羊

4只克隆羊在遗传上与多莉毫无差异。多莉诞生于14年前,是第一个使用成熟细胞克隆的哺乳动物。多莉是第一个使用成熟细胞克隆的哺乳动物,1996年诞生于英国爱丁堡附近的罗斯林研究所。  克隆羊多莉(Dolly)已经获得“重生”。最初进行此项克隆研究的英国科学家又培育出4只克隆羊,被形象地称

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利...(二)

3.3 文库的克隆和回收( 1 ) 插入片段和载体的理想比例是(2 : 1 ) ~(3 : 1 )。我们将用于连接的 DNA 浓度限制在 10 ng/μl,使用 1 mmol/L 的 ATP,16°C 连接过夜(见注 8 )。( 2 ) 连接反应体系于 65°C 处理,使酶失活,用氯仿抽提,然后用乙

“黄禹锡事件”9年后科学家终获人体胚胎干细胞

  研究人员使用婴儿DNA成功制作出胚胎干细胞,但他们还不能证明当核供体细胞是成人细胞时,该技术同样能起作用。   这次看起来是玩儿真的:研究人员利用与克隆多利羊相似的方法制作出个体化的人体胚胎干细胞,而成功的“秘诀”之一便是额外添加了一罐咖啡。   这项实验制作出的干细胞所携带的DNA属于一个

总RNA提取试剂(Trizol法)使用说明

『用途与特点』1.    本试剂盒可用于几乎所有新鲜或液氮保存的动物和植物组织、昆虫和细胞RNA的快速提取,通用性好。2.    无须DNA酶、RNA酶抑制剂等。3.    所需样品量少,并且可根据起始材料的多少自行调整。4. 

科学家称过低发育效率阻碍哺乳动物克隆

  距离第一个克隆生命——“多莉”羊诞生已有15年,克隆人一直是伦理学划定的禁区,但与此同时,人们总能不断听到来自科学界的种种关于克隆人将会实现的声音。近日,美国哈佛大学医学院的遗传学家乔治·丘奇表示,自己能够利用克隆技术“复活”早在3.3万年前就已灭绝的尼安德特人。面对人类克隆,你

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成

实验材料寡核苷酸引物Tag 聚合酶BL21 电转感受态细胞试剂、试剂盒氨苄青霉素卡那霉素仪器、耗材琼脂糖凝胶实验步骤3.1 概论3.1.1 PCA 对空间排列的要求PCA 片段的三维朝向对于 PCA 报告蛋白是否能正确折叠至关重要,它取决于形成复合体的目的蛋白 N 端或 C 端的朝向(图 15.1

基因转染和实验设计原则

磷酸钙-DNA共沉淀法核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项

中国最早人兽胚胎研究缘何被中断

首个正式发表论文的带头人盛慧珍因多种原因离开团队  最近英国原则上批准了一类人兽混合胚胎实验。其实类似的研究在中国早已进行,并发表了论文。但由著名科学家盛慧珍领导的这一工作目前已基本中断,整座大楼显得空空荡荡。 9月5日,英国“人工受精与胚胎学管理局”(HFEA)原则上批准了一类人兽混

克隆鱼诞生50年 中国克隆技术陷入困境

  在不久前上映的美国大片《遗落战境》中,由汤姆·克鲁斯饰演的克隆人在发现自己的身份后,奋起反抗外星人,最终获得胜利。   紧接着,电影《侏罗纪公园》再次讲述了科学家利用DNA技术复活恐龙却遭遇疯狂猎杀的故事。   两部大片不仅给观众带来了强烈的视觉冲击,也再度激起了人们对克隆技术的浓厚兴趣。

真核表达文库的构建与筛选实验

实验材料 宿主细胞质粒或λ噬菌体表达载体包装提取物电转化感受态大肠杆菌试剂、试剂盒 限制性内切核酸酶缓冲液限制性内切核酸酶通过 poly(A)+富集的 mRNAcDNA 文库含适当抗生素的 Terrific 球脂平板含适当抗生素的 Terrific 肉汤培养基仪器、耗材 cDNA 合成试剂盒实验步骤

养细胞的细胞生物学

一、体内、外细胞的差异和分化1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此,培养中的细胞可视为一种

端粒酶活性检测操作必知

近几年来端粒酶由于与长寿、癌症等的研究相关联而备受关注,而端粒酶活性检测具体方法又有那些呢?小编整理了端粒酶活性检测的原理、基本操作技巧 、结果判断、扩增片段检测等方面内容,以飨读者。端粒酶 (Telomerase)是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶。人端粒酶RNA组分(hTR)于1995年被

美成功克隆猴子胚胎 人体克隆可能性增大

美国科学家新近取得的一种技术突破可帮助利用成年猴子克隆胚胎,预示着克隆人类胚胎终于有可能成为现实。这种新技术承诺将革命性地提高科学家把人类卵子转化为克隆胚胎的效率,同时也引发新一轮关于克隆人伦理的讨论。  据悉,被克隆的是一只10岁的雄性恒河猴。(华盖图) 基于新的卵子处理方法&nb

【技术指南】流式细胞仪和流式细胞术

Jay Haron Ph. D.   jay.haron@gmail.com   BD Biosciences, San Diego, United States 引用 实验材料和方法  从1968年最

真核表达文库的构建与筛选实验

            实验材料 宿主细胞 质粒或λ噬菌体表达载体 包装提取物 电转化感受态大肠杆菌

真核表达文库的构建与筛选实验

类似方案 1、方案 2 描述了在真核表达载体上进行 cDNA 文库构建与筛选的方法, 流程分为以下两个阶段:1. 在真核表达载体上构建 cDNA 文库;2. 在真核表达载体上构建的 cDNA 文库的筛选。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。实验材料宿主细胞质粒或λ噬菌体表达载体

体细胞克隆小鼠Oct-4相关基因的不完全再活化

实验概要大部分体细胞克隆小鼠能发育到囊胚阶段,但是在着床后就死亡了。Oct4基因对于维持胚胎发育全能性起着重要的作用。缺乏Oct4基因的小鼠胚胎能发育到囊胚阶段,但是因为它们缺乏全能性胚胎细胞,在着床后便死亡了。基于类似原因,我们推断由不同体细胞核移植获得的克隆胚胎因为Oct4之类关键胚胎基因的错误

日本科学家克隆培育出581只完全相同的老鼠

  据英国每日邮报报道,目前,日本科学家经过25轮克隆培育,最新繁殖出581只相同的克隆老鼠,它们的基因都源自同一只老鼠。 日本科学家经过25轮克隆培育,繁殖出581只相同的克隆老鼠   科学家表示,这项完美克隆实验为实验室培育能够产奶和提供肉食的“超级动物”奠定了基础。据悉,研究人员使用培育“

克隆技术(七)

研究成果克隆羊“多利”的诞生在全世界掀起了克隆研究热潮,随后,有关克隆动物的报道接连不断。1997年3月,即“多利”诞生后近1个月的时间里,美国、中国台湾和澳大利亚科学家分别发表了他们成功克隆猴子、猪和牛的消息。不过,他们都是采用胚胎细胞进行克隆,其意义不能与“多利”相比。同年7月,罗斯林研究所和P

脑这一辈子,攒了多少“突变”?丨两篇Science共同关注

  随着时间的推移,DNA复制可能出现错误,转录或其他过程也可能出现问题,就会导致人体内的细胞产生突变。但要了解体细胞突变的本质和程度(以及由此产生的组织镶嵌)却很难,直到近年来技术有所进步,人们从单个细胞或少数克隆体内提取少量DNA,就足以进行基因组测序。  当前,体细胞突变分析技术蒸蒸日上,脑成

酵母三杂交系统检测和分析RNA-蛋白相互作用实验

酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方

DNA重组(DNA recombination)技术:外源基因的蛋白表达-2

2.包涵体的分离与纯化细胞破碎时提取细胞内产物的关键。对于细菌的裂解常用的有酶溶法、超声破碎法、化学渗透法、玻璃珠研磨等。包涵体可通过超声波、匀浆等常规的方法是菌体破碎后,离心就可得到。密度梯度离心后可得到高纯度的包涵体。包涵体一般不溶于水,为了获得可溶性的蛋白质可加入强蛋白质变性剂后使其溶解。一般