β内酰胺酶试验

用途:用于检测一些细菌所产β-内酰胺酶,如:金葡菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌、粪肠球菌、脆弱拟杆菌。 原理:纸片中含头孢硝噻吩。当这种β-内酰胺环中的酰基键被β-内酰胺酶水解后,发生快速的颜色反应,从黄色变为红色,当一个细菌产生足量的β-内酰胺酶,把这种细菌涂在纸片上,纸片会由黄色变为红色。头孢硝噻吩具有广泛的敏感性和特异性。作为商品化的检测β-内酰胺酶试剂,迄今为止尚未发现头孢硝噻吩会与其他的微生物酶发生反应。 β-内酰胺酶试验检验方法:1. 手持试条顶端,先稍稍润湿末端的测试区滤纸,然后直接用末端湿润的滤纸蘸取或刮取可疑典型菌落;2. 35℃±2℃孵育后观察有无红色产生,孵育时间因菌种类不同而不同,具体情况请见结果解释。 对大多数细菌而言阳性反应通常在5min内,但是,对于某些葡萄球菌阳性反应可长达1h。注:每张纸片只能测试一种菌株。β-内酰胺酶试验结果解释:......阅读全文

β内酰胺酶试验

用途:用于检测一些细菌所产β-内酰胺酶,如:金葡菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌、粪肠球菌、脆弱拟杆菌。 原理:纸片中含头孢硝噻吩。当这种β-内酰胺环中的酰基键被β-内酰胺酶水解后,发生快速的颜色反应,从黄色变为红色,当一个细菌产生足量的β-内酰胺酶,把这种细菌涂在纸片上,纸片会由黄色变为红

何谓β内酰胺酶产生此酶的菌株主要有哪些

能裂解青霉素族和头孢菌素族抗生素的基本结构β-内酰胺环,从而使其丧失抗菌活性的酶,称为β-内酰胺酶。大部分金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、革兰阴性厌氧菌和少数肺炎链球菌等菌株可产生β-内酰胺酶。

异相酶免疫试验和均相酶免疫试验

  Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性;  (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E

超广谱β内酰胺酶(ESBLs)检测的筛选与确证试验

 ESBLs是英文Extended-Spectrum β-lactamase的缩写,中文意思是超广谱β-内酰胺酶,它是当前抗生素出现的新的耐药趋势之一。目前大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、肺炎克雷伯氏菌是最常见的产ESBLs菌株的细菌,其次,阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、铜绿假单孢菌也可出现产

脂酶试验

  (1)原理:有些细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物,如果脂肪被分解,则维多利亚蓝被释放出来,呈现深蓝色。   (2)培养基:含维多利亚蓝的脂酶培养基。   (3)方法:将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中,置37℃孵育24h,观察结

脂酶试验

脂酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。  (1)原理:有的细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。从而使培养基中与脂肪结合形成无色化合物的维多利亚蓝释放出来,呈现深蓝色。  (2)培养基:脂酶培养基(含维多利亚蓝)。  (3)方法:将被检菌接种于上述培养基中,于37℃培

尿素酶试验

尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm

DNA酶试验

DNA酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。(1)原理:某些细菌产生DNA酶,可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀,寡核苷酸链则溶于酸,所以当在菌落平板上加入酸后,会在菌落周围出现透明环。(2)培养基:0.2%DNA琼脂平板。(3)方法:将被检菌点种于

尿素酶试验

培养基: KH2PO4 0.1g K2HPO4 0.1% NaCl 0.5g 0.2%酚红水溶液  0.5ml 蒸馏水  100ml pH 7.0高压后加20%的尿素溶液 10.4ml。 方法:与其他菌相同。注意接种量要大,4小时观察结果。

DNA酶试验

 (1)原理:某些细菌能产生DNA酶,可使长链DNA水解成为寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀,而寡核苷酸则溶于酸。故在DNA琼脂平板上加盐酸后,可在菌落周围形成透明环。  (2)培养基:0.2%DNA琼脂平板。  (3)方法:在DNA琼脂平板上点种待检菌,35℃孵育18~24h,用1mol/L盐

尿素酶试验

尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm

凝固酶试验

  (1)原理:凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使其变为纤维蛋白,发生凝集,包围于细菌外面而凝聚成块,可用玻片法测出;另一种凝固酶是分泌至菌体外,称为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血

关于β内酰胺的简介

  1980年代初期,首例产生青霉素酶的粪肠球菌被报告[1]。因为只制造少量的青霉素酶,所以使用标准方法侦测不出来,必须侦测青霉素酶或是用非常大的接种量才能发现。而这类粪肠球菌对于 氨苄青霉素、阿莫西林、氧哌嗪青霉素加上青霉素酶抑制剂,如棒酸、舒巴坦、他唑巴坦,仍具有感受性。

β内酰胺酶的分布

  第一个报道的金属酶是从蜡样芽孢杆菌( Bacill us cereus) 中发现的,该酶为锌依赖酶。20 世纪80 年代初期日本从嗜麦芽窄食单胞菌中鉴定出第二种锌依赖青霉素酶L1 型酶,随后又从嗜水气单胞菌和脆弱拟杆菌中鉴定出多种能水解亚胺培南的金属酶。这些酶都由染色体基因编码。该类金属酶分布在

β内酰胺酶的作用

  各种β-内酰胺类抗生素的作用机制均相似,都能抑制胞壁粘肽合成酶,即青霉素结合蛋白从而阻碍细胞壁粘肽合成,使细菌胞壁缺损,菌体膨胀裂解(胞壁粘肽合成过程见三十七章)。除此之外,对细菌的致死效应还应包括触发细菌的自溶酶活性,缺乏自溶酶的突变株则表现出耐药性。哺乳动物无细胞壁,不受β-内酰胺类药物的影

β内酰胺酶的介绍

  金属β-内酰胺酶可由染色体和质粒介导,可在铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、粘质沙雷菌、肠杆菌属菌、肺炎克雷伯菌、嗜水气单胞菌和不动杆菌等细菌中检出此类酶。我们平时所讲的β-内酰胺酶是一个大概念,包括所有β-内酰胺酶,如葡萄球菌等产生的青霉素酶、革兰阴性杆菌等产生的广谱β-内酰胺酶、AmpC酶、超

β内酰胺酶的检测

临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生 β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法: (一)微生物活性消失法 此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌,如待检菌株产生β内酰胺酶,破坏了青霉素,则

β内酰胺酶的检测

临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生 β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法: (一)微生物活性消失法 此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌,如待检菌株产生β内酰胺酶,破坏了青霉素

β内酰胺酶的检测

临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生 β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法:(一)微生物活性消失法 此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌,如待检菌株产生β内酰胺酶,破坏了青霉素,则在

β内酰胺酶的简介

  金属β-内酰胺酶,属Bush分类3群,Ambler分类B类,该群酶最大特点是可以水解青霉素类等抗生素,而对哌拉西林和氨曲南影响较小,其活性不被克拉维酸等β-内酰胺酶抑制剂所抑制,但可被乙二胺四乙酸(EDTA)所抑制。酶活性中心需金属锌离子的参与,故称为金属β-内酰胺酶。

免疫酶染色试验

实验方法原理 免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相应的底物时,能催化底物产生颜色反应,根据有色产物的有无及其浓

氧化酶试验

试剂   1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存。   1%α-萘酚-乙醇溶液。   试验方法   取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。阴性于两分钟内不变色。   以毛细吸管吸取试剂

RNA酶保护试验

    RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交,以检测RNA表达的技术。与Northern杂交和RT-PCR比较,RPA有以下几个优点:1. 检测灵敏度比Northern杂交高。由于Northern杂交步骤中转膜和洗

血浆凝固酶试验

【原理】    病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。葡萄球菌所产生的凝固酶有两种:结合凝固酶和游离凝固

血浆凝固酶试验

【原理】病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。葡萄球菌所产生的凝固酶有两种:结合凝固酶和游离凝固酶。结合

氧化酶试验

(1)原理:氧化酶(即细胞色素氧化酶),是细胞色素氧化酶系统中的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。因此,本试验结果与细胞色素C的存在有关。   (2)方法:   1)菌落法:直接滴加试剂于被检菌落上。   2)滤纸

β-内酰胺酶耐药及对策

     β-内酰胺酶的分类,主要包括分子结构分类(根据氨基酸序列的不同)及根据β-内酰胺酶底物谱和酶抑制剂谱分型(Bush 1995分型)两种。分子结构分类可以将β-内酰胺酶分为A、B、C、D四类,该分类将超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)归于其中A类,质粒型头孢菌素酶(Amp C酶)归

β内酰胺类抗生素

第三十六章  β-内酰胺类抗生素                 第一节  抗菌机制、作用类型及耐药性一、抗菌作用机制  通过抑制细菌细胞壁粘肽合成酶的活性而阻碍细胞壁粘肽的合成,使细菌胞壁缺损,菌体膨胀裂解。由于哺乳动物无细胞壁,不受β-内酰胺类抗生素的影响,故对机体的毒性小。研究证实,细菌细胞壁

过氧化氢酶试验(触酶试验)

(1)原理:具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。(2)方法:取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3%过氧化氢数滴,立即观察结果。(3)结果:若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。(4)应用:革兰阳性球菌中,葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性

氧化酶试验概述

  氧化酶试验是氧化酶不直接与氧化酶试剂起反应,而是先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应这样的原理进行的试验。本试验结果与细胞色素C的存在有关。