电泳缓冲液50×Tris乙酸(TAE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L......阅读全文
电泳缓冲液-50×Tris乙酸(TAE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L
电泳缓冲液的配制
Tris-乙酸(TAE):50×浓贮存液(每升):242g Tris 碱5 7.1ml 冰乙酸100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释50倍。
1×TAE缓冲液的配制方法
一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。50倍TAE缓冲液的配制方法为1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242gNa2 EDTA.2H2 O 37.2g2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解。3.加入57.1mL的醋酸,充分搅拌。4.加去离子水将溶液定容至1L后,
电泳缓冲液的配制方法介绍
50×TAE Buffer 配制方法: 1、称量氨基丁三醇242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2、向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀; 3、加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4、用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。 使
Tris硼酸电泳缓冲液(5′TBE)使用说明
产品简介: Tris-硼酸电泳缓冲液简称 TBE。0.5´TBE 工作液中含有 45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。TBE 是常用的 DNA 电泳缓冲液。一般情况下,DNA 电泳常使用 0.5´TBE工作液,Tris-乙酸电泳缓冲液的优点:缓冲能力弱,适宜分离相对较小(小于 2
5×Tris硼酸(TBE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖是从琼脂中提取出来的,是由D-半乳糖和3、6-脱水-L-半乳糖结合的链状多糖,含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提高。琼脂糖电泳具有以下优点:①琼脂糖含液体量大,可达98%~99%,近似自由电泳,但样品的扩散度比自由电泳小,对蛋白质的吸附极微;⑦琼脂糖作为支持体有分辨率高、重复性好等优点;③电
琼脂糖电泳protocol
试剂: 试样20μl DNA ladder 琼脂糖 TAE缓冲液 上样缓冲液含0.5μg/ml EB的电泳缓冲液50×TAE贮存液: Tris 242g冰乙酸 57.1ml0.5mol/LEDTA(pH
关于琼脂糖的电泳方法的相关介绍
(1)凝胶类型 用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。 (2)缓冲液系统
常用缓冲液配制
实验概要常用缓冲液配制实验步骤一.电泳缓冲液 A: 测序凝胶加样缓冲液: 98%去离子甲酰 10mol/L EDTA(pH8.0) 0.025%二甲苯青FF 0.025%溴酚蓝 B: 甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,
实验室常用技术参数资料(二)
二、常用缓冲液 1.分子克隆常用缓冲液 2.磷酸缓冲液 (1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※pH1mol/L K2HPO4(ml)1mol/L KH2PO4(ml)5.88.591.56.013.286.86.219.280.86.427.872.26.638.161.96.84
DNA电泳(agarose胶)
DNA电泳可用于:(1)分离不同大小的DNA片段;(2)鉴定目的DNA片段;(3)纯化和回收DNA片段。实验方法原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中向正极移动,且相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,能以
DNA电泳(agarose胶)
DNA琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场
实验常用试剂的制备与储藏(三)
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液 染料 1%溴酚蓝(bromophenol blue) 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1%二甲苯青FF(xylene
分子生物学常用试剂的配制(一)
1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制 配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入: 细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g 细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g NaCl 10g
电泳缓冲液
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。 电泳缓冲液
PCR扩增产物的电泳分析1
凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。一、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约
Tris硼酸(TBE)的配制
5×浓贮存液(每升):54g Tris 碱27.5g 硼酸20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释10倍。
Tris磷酸(TPE)的配制
10×浓贮存液(每升):108g Tris 碱15.5ml 85%磷酸(1.679g /ml)40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释10倍。
Tris甘氨酸的配制
5×浓贮存液(每升):15.1g Tris 碱94g 甘氨酸(电泳级)(pH8.3)50ml 10%SDS(电泳级)2×SDS 凝胶加样缓冲液100mmol/L Tris?HCl(pH6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4%SDS(电泳级)0.2%溴酚蓝20%甘油
水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA
实验概要学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒 DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDN
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)介绍
主要试剂:核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
关于DNA酶切及凝胶电泳的影响因素分析
1、 DNA的分子大小: 线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。 2、 琼脂糖浓度 一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶
琼脂糖DNA电泳的相关信息介绍
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。 1.核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系 (1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离方法介绍
1.核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系(1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于
电泳缓冲液的概述
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成, 是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率,应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子,防止电泳时激
电泳缓冲液的作用
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。电泳缓冲液的
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置
电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量 2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水 242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L 5×Tris-硼酸
DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法2
3、 DNA分子的构象当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引
水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA
学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理:闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同,在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率,因而在紫外灯下观察,能区别闭合环状质粒DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDNA)。实