5×Tris硼酸(TBE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L......阅读全文
5×Tris硼酸(TBE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L
Tris硼酸(TBE)的配制
5×浓贮存液(每升):54g Tris 碱27.5g 硼酸20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释10倍。
Tris硼酸电泳缓冲液(5′TBE)使用说明
产品简介: Tris-硼酸电泳缓冲液简称 TBE。0.5´TBE 工作液中含有 45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。TBE 是常用的 DNA 电泳缓冲液。一般情况下,DNA 电泳常使用 0.5´TBE工作液,Tris-乙酸电泳缓冲液的优点:缓冲能力弱,适宜分离相对较小(小于 2
硼酸缓冲液(BBS)的配制
0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)硼酸钠(Na2B4O7.10H2O) 0.46g硼酸(H2BO3) 0.51g加蒸馏水至100ml 溶解。
电泳缓冲液-50×Tris乙酸(TAE)缓冲液的配制
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L
如何配制磷酸缓冲液和硼酸缓冲液
硼酸缓冲液一般PH6.77~9.24 A液:0.2mol/L硼酸 0.05mol/L NACL 配方:硼酸:1.2368g,NACL 0.2925g, 加蒸馏水至100ml B液:0.05mol/L硼酸钠 配方:硼酸钠1.907g,加蒸馏水至100ml 不同的PH值配方如下: PH A(ml) B(
常用缓冲液配制
实验概要常用缓冲液配制实验步骤一.电泳缓冲液 A: 测序凝胶加样缓冲液: 98%去离子甲酰 10mol/L EDTA(pH8.0) 0.025%二甲苯青FF 0.025%溴酚蓝 B: 甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,
Tris磷酸(TPE)的配制
10×浓贮存液(每升):108g Tris 碱15.5ml 85%磷酸(1.679g /ml)40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释10倍。
Tris甘氨酸的配制
5×浓贮存液(每升):15.1g Tris 碱94g 甘氨酸(电泳级)(pH8.3)50ml 10%SDS(电泳级)2×SDS 凝胶加样缓冲液100mmol/L Tris?HCl(pH6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4%SDS(电泳级)0.2%溴酚蓝20%甘油
实验室常用技术参数资料(二)
二、常用缓冲液 1.分子克隆常用缓冲液 2.磷酸缓冲液 (1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※pH1mol/L K2HPO4(ml)1mol/L KH2PO4(ml)5.88.591.56.013.286.86.219.280.86.427.872.26.638.161.96.84
0.1mol/LPH8.4-硼酸缓冲液(BBS)的配制
0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)硼酸钠(Na2B4O7.10H2O) 0.46g 硼酸(H2BO3) 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖是从琼脂中提取出来的,是由D-半乳糖和3、6-脱水-L-半乳糖结合的链状多糖,含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提高。琼脂糖电泳具有以下优点:①琼脂糖含液体量大,可达98%~99%,近似自由电泳,但样品的扩散度比自由电泳小,对蛋白质的吸附极微;⑦琼脂糖作为支持体有分辨率高、重复性好等优点;③电
PCR扩增产物的电泳分析1
凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。一、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约
关于琼脂糖的电泳方法的相关介绍
(1)凝胶类型 用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。 (2)缓冲液系统
变性聚丙烯酰胺凝胶的制备实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺溶液 过硫酸铵水溶液 去离子水 去污剂 乙醇 KOH 甲醇溶液 聚硅氧烷溶液 TBE
变性聚丙烯酰胺凝胶的制备实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺溶液过硫酸铵水溶液去离子水去污剂乙醇KOH 甲醇溶液聚硅氧烷溶液TBE 电泳缓冲液TEMED尿素仪器、耗材 弹簧夹干胶架封胶带胶板(配对的) 和隔板手套凡士林保护性的工作合纸鲨鱼齿梳子有臂的烧瓶隔板注射器试管架实验步骤 材料缓冲液和溶液参照附录 1 配制贮存液、缓冲液、试剂。稀
双向琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)实验
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题。【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构。双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的。双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类:中性/中性
双向琼脂糖凝胶电泳实验
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题.【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构.双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的.双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类:中性/
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)介绍
主要试剂:核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
变性聚丙烯酰胺凝胶的制备实验
测序中,4 个系列的 DNA 片段在变性的条件下在一个薄的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分析。本方案介绍了制备均一缓冲液和丙烯酰胺浓度胶的方法。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒丙烯酰胺溶液过硫酸铵水溶液去离子水去污剂乙醇KOH 甲醇溶
为什么在电泳中使用TBE缓冲液?
很多朋友想了解电泳缓冲液的知识,为什么在电泳中使用TBE缓冲液?因为限制性缓冲液将pH保持在适合酶活性的范围内,并提供催化所需的盐辅助因子。由于不同的限制性内切酶需要不同的盐条件和pH,因此可以使用单一的折衷缓冲液,其在各种限制性内切酶优选的条件之间达成平衡。
PCR-各种缓冲液的配方
PCR 各种缓冲液的配方电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 终浓度配制1L溶液成分 各成分的用量2mol/L Tris碱 242g1mo
PCR扩增产物的电泳分析
凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。一、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约数小
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置
电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量 2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水 242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L 5×Tris-硼酸
DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法2
3、 DNA分子的构象当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引
实验常用试剂的制备与储藏(三)
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液 染料 1%溴酚蓝(bromophenol blue) 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1%二甲苯青FF(xylene
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水 242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲
DNA的琼脂糖凝胶电泳简介
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系(1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段
琼脂糖DNA电泳的相关信息介绍
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。 1.核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系 (1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离方法介绍
1.核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系(1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于