海南医学院李孟森再发表AFP生物学功能的重要成果
近日,国际著名肿瘤杂志Oncotarget(2013年SCI影响因子:6.627)在线发表题为“Hepatitis B virus X protein induces expression of alpha-fetoprotein and activates PI3K/mTOR signaling pathway in liver cells”和Oncoscience发表题为“Alpha-fetoprotein activates AKT/mTOR signaling to promote CXCR4 expression and migration of hepatoma cells”的学术论文。这是百千万人才李孟森研究员团队关于甲胎蛋白(AFP)和乙型肝炎病毒-x蛋白(HBx)诱导肝癌发生,以及AFP促进肝癌细胞转移的重要成果。 发表在Oncotarget上的学术论文以朱明月博士和郭峻莉研究员为共同第一作者、美国德克......阅读全文
外源基因在原核细胞表达技术
原核细胞l 用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1. PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段,片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2. 含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3.
杆状病毒昆虫细胞表达系统2
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒
外源基因在原核细胞表达技术
原核细胞*用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1.PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段,片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2.含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3.重组质粒转化有lacIq 等位基因的大肠杆菌
胞质杂种和重建细胞的基因表达
为了更直接地研究核、质相互作用对细胞核基因表达变化的作用,运用了“细胞质杂交”(cybridization)和细胞重建(细胞核移植)技术。胞质杂种是由一个无核细胞或去核细胞与一个完整细胞融合而成的,开始时这个混合细胞质内只含有一个细胞核。细胞核的遗传标记(如抗溴脱氧尿苷)和线粒体标记(如抗氯霉素)的
外源基因在真核细胞表达技术
生化方法l 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞1. 转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃温箱孵育20~24 h。转染前1 h换液。2.
杆状病毒昆虫细胞表达系统3
七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新
胞质杂种和重建细胞的基因表达
1、去核的小鼠成纤维细胞与分化的大鼠肝癌细胞融合后,胞质杂种看上去丧失了合成白蛋白的能力。在融合形成后10-20小时,大多数胞质杂种的合成能力被抑制。这是一个明显的暂时现象,因为在融合48小时后又可以检测出大量的白蛋白。由此可以得出结论,合成能力的消失是通过一种短寿命的调节因子实现的。这种因子不能在
原核细胞的基因表达具有什么特点
由于原核生物大都为单细胞生物,缺乏核膜,因此极易 受外界环境的影响,需要不断地调控基因的表达,以适应 外界环境的营养条件和克服不利因素,提高生物的应变与 适应能力以完成生长发育与繁殖的过程。这种调控大多以 操纵子为单位进行。
CHO细胞的稳定转染与基因表达
1、pcDNA3.1+-gD的线性化: pcDNA3.1+使用说明书推荐了以下几个酶作为线性化酶(BglⅡ MfeⅡ Bst1107Ⅰ Eam1105Ⅰ PvuⅠ ScaⅠ SspⅠ),通过DNAMAN分析gD序列发现其带有MfeⅡ酶切位点。2、转染前一天,在60mm的dish中接种8×105个细胞
建立茎尖细胞特异基因表达图谱
基因差异表达是细胞分化和不同细胞类型形式特异功能的基础。细胞特征的转录图谱对于了解不同类型细胞如何生长发育、响应环境至关重要。但植物细胞由细胞壁固着,不易分离,很难获得细胞类型特异的转录数据。 中国科学院遗传与发育生物学研究所焦雨铃研究组在之前的工作中建立了器官边界区的细胞特异表达图谱 (Ti
T细胞基因的转录激活及其表达
TCR/CD3复合物与配体结合后,经多种信号转导途径传递信号,最终导致T细胞活化和增殖。信号转导中所涉及的基因根据其活化时间可以分为早早期、早期、晚期基因三种类型(表8-5)。早早期基因的转录不需蛋白的合成,而早期及晚期基因的转录则需蛋白的合成。早早期及早期基因转录在有丝分裂期之前,而晚期基因转
单细胞基因表达谱揭示小脑细胞分化机制
尽管小脑(Cerebellum)体积仅为全脑的十分之一左右, 但其神经元数量大约占全脑的一半以上。近来研究表明,小脑不仅对运动的调节和维持有着重要作用,而且影响情绪、认知等高级功能。小脑发育异常和功能障碍与许多神经和精神疾病有关,例如共济失调,震颤,自闭症障碍和精神分裂症等。了解疾病相关基因在小
质谱流式细胞技术推荐论文
研究人员将流式细胞技术与质谱分析技术结合在一起,发展出了质谱流式细胞技术(mass cytometry),这种融合技术能在单细胞水平上同时分析超过40种细胞参数,极大的增加了流式细胞分析评估复杂细胞系统和过程的能力。5月5日Cell杂志发表“Mass Cytometry: Single Cell
《自然》发表验证STAP细胞的研究论文
日本发育生物学研究所小保方STAP细胞是2014年最著名的学术不端闹剧,从2014年1月在《自然》发表两篇论文,随后被人指出论文存在伪造部分研究数据的嫌疑,被日本理化研究所调查证实存在学术不端,很快人们发现这一突破研究无法被重复而怀疑全面伪造,并被进一步调查,相关研究人员或者认为没有错误,或者认
神经细胞粘附分子的表达
NCAM不仅在神经系统中表达,在肌肉、上皮等组织中亦可有表达,但其在不同的组织、不同的时期表达是不同的。
加速干细胞疗法的基因表达分析技术
最近,美国国立卫生研究院(NIH)的研究人员开发出一种技术,将加快干细胞衍生组织的生产。 这种方法可同时测量多个基因的表达,使科学家们能够根据细胞的功能和发育阶段,快速地描述细胞。该技术将帮助研究人员使用患者的皮肤,再生视网膜色素上皮细胞(RPE,眼睛后面的一种组织,在几种致盲眼疾中受影响)。
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
Nature突破守则:干细胞基因表达新规则
十年前,基因的表达看上去是那么的简单:基因被开启或被关闭,不能同时开启又关闭。之后时间到了2006年,一个重磅级的发现指出,在小鼠胚胎干细胞中的发育调控基因可以即激活基因,又抑制基因,这样的基因被称为“二价标记基因(bivalently marked genes)”,在发育和分化过程中可以有
G418筛选稳定表达细胞系
1.G418的配制:取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存。2.细胞培养:取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药。3.制备筛选培养基:在100ug/ml~1000ug/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100
质粒转染细胞之后多久测外源性mrna表达
不整合入基因组中,可以整合到细胞基因组上进行表达,比如腺病毒类的表达载体;有些质粒上有整合的序列。一般的表达质粒上后面有自带的polyA序列,所以产生的mRNA是带polyA尾巴的质粒转染细胞后是整合到基因组中还是游离存在这要看你用的是哪一种质粒载体,有些质粒就在细胞中进行表达
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
T细胞受什么刺激开始TCR基因表达
t细胞激需要自b细胞信号b细胞已通高频突变优化bcr与抗原亲性所认t细胞没必要再重复程
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗HLA-B27 单抗全血试剂、试剂盒 溶血剂多聚甲醛仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1. 取荧光素 PE 标记的 CD3 单抗及 FlTC 标记的 HLA-B27 单抗 30 μl、EDTAK3 抗凝的全血 50 μl,混匀后室温染色 15 min ( 或 20 min)。2.
概述胞质杂种和重建细胞的基因表达
为了更直接地研究核、质相互作用对细胞核基因表达变化的作用,运用了“细胞质杂交”(cybridization)和细胞重建(细胞核移植)技术。胞质杂种是由一个无核细胞或去核细胞与一个完整细胞融合而成的,开始时这个混合细胞质内只含有一个细胞核。细胞核的遗传标记(如抗溴脱氧尿苷)和线粒体标记(如抗氯霉素
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
下面的方案是从蜕皮激素诱导的哺乳动物表达系统(Invitrogen 公司)附带的方案修改而来。Stratagene 公司也出售相似的系统。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒带有感兴趣的基因并
国外研究发现细胞基因表达新机制
捷克马萨里克大学中欧技术研究所的科研团队发现了一种新的细胞分化基因表达机制。该研究项目名为“植物减数分裂的调控及其操作技术的发展”,相关成果发表在《科学》上。 该团队开发了一种独特的方法,使用特殊显微镜实时连续成像观察植物细胞减数分裂,并掌握原生质体技术,成为目前全球仅有的两个可实时观察植物减
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
实验材料 带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒带有感兴趣的基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒pVgRXR培养的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 新霉素松甾酮 AZeocin培养液实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。新霉素松甾酮 A蜕皮激素的另一种类似物是 muristerone A(Sig
亚细胞定位的GFP融合蛋白表达法
GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白(GFP)是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。通过基因工程技术,绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组,在后代中持续表达,并且能根
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
实验材料 带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒 带有感兴趣的基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒 pVgRXR 培养的哺乳动物细胞
研究显示科学论文中表达不确定性的词汇减少了
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/505748.shtm