中国科研工作者对抗体试剂问题的反思

2015年5月19日 Nature杂志从美国和加拿大几位资深科学家的亲身经历,深度阐述了目前抗体试剂的现状与问题,给全世界科研工作者敲响了警钟。身为中国科研工作者,我们遇到的抗体试剂问题只怕比国外同行来得更多,当下除了抱怨,我们更应深刻反思:如何才能获得高质量、合适的抗体试剂。 获得高质量、合适的抗体试剂也并非难事,我们需要在以下三个方面加以甄别:1.优秀的抗体供应商;2.过硬的冷链物流体系;3.正规的销售(直销/分销)渠道。 1. 优秀的抗体供应商 优秀的抗体供应商应具备以下条件或者能为客户提供以下信息:抗原序列选择、抗体纯化方式、抗体验证数据、应用指南。 i. 抗原序列选择 抗原序列选择至关重要,直接决定了抗体的特异性/低交叉反应和抗体产量,因此抗原序列选择不仅要保证全基因组内同源序列最低,同时还要排除信号肽和蛋白跨膜区序列。 ii. 抗体纯化 抗体纯化目前主流的三种方式分别是:盐析法粗纯、Protein ......阅读全文

国际抗体验证工作组发布验证抗体特异性五大策略

   国际抗体验证工作组(IWGAV)是全球范围内由研究方向各异的蛋白质生物学家组成的独立工作组。IWGAV 9月19日在瑞典斯德哥尔摩披露,为满足在抗体特异性、功能性和重复性的迫切需求,该工作组已于9月在《Nature Methods》在线发表了初步的战略建议。“针对建立广泛可接受的抗体验证标准和

美FDA发布对进口食品实施外国供应商验证程序实施条例

  2013年7月29日,FDA发布提案,拟采纳一项针对进口人用及兽用食品实施外国供应商验证程序(FSVPs)的条例,该条例是对FDA《食品安全现代化法》(FSMA)关于外国供应商验证程序相关规定的具体实施措施。   实施条例将要求进口商确保进口到美国的食品在满足了包括合理的风险控制在内的过程与工

Nature-Methods:抗体验证指南首次出炉

  据估计,因抗体质量不佳,生命科学领域每年的损失达到8亿美元。同时,这也造成了无数的实验失败,浪费了宝贵的样本和科学家的青春。尽管科学界已经意识到这个问题,但目前仍然缺乏抗体验证的整体框架。  为了刺激研究界实现更高标准的抗体重复性,国际抗体验证工作组(IWGAV)近日出台了一套指南。这些指南发表

抗体偶联药物(ADC)的生产工艺验证

  抗体偶联药物(Antibody-Drug Conjugate,ADC)是通过连接子(linker)将具有生物活性的小分子药物偶联至单克隆抗体(单抗)上而产生的。目前绝大部分 ADC 是由靶向肿瘤抗原的抗体通过连接子与高效细胞毒性的小分子化学药物偶联而成,利用抗体与靶抗原特异性结合的特点,将小分子

抗体特异性检测提议问答国际抗体验证工作组

  The International Working Group on Antibody Validation:  国际抗体验证工作组  Proposal for Antibody Specificity Testing Q&A  关于抗体特异性检测提议的常见问题及回答  1.What is th

JBC:针对WB抗体验证提出最佳操作建议

  2020 年 1 月 28 日,英国剑桥和美国林肯:Abcam 和 LI-COR 欣喜地宣布,双方在同行评审期刊《生物化学杂志》(JBC)[1] 上发表了共同撰写的手稿,旨在提高整个生命科学行业的试剂可重复性标准。Pillai Kastoori 等人的新论文Antibody Validation

定量western-blot疑问解答:为什么需要验证抗体?

验证抗体对于结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗

定量western-blot疑问解答—为什么需要验证抗体?

验证抗体对于结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗

上样质控和抗体验证用于Western-blot定量

今天的帖子的灵感来自于我和同事在教他们SDS-PAGE和western blot的实验交谈中。 他们对于qRT-PCR(R)和流式细胞术(R)精通,特别关心如何以及为什么使用某些上样质控,还有其它的技术被使用验证,蛋白质表达和抗体特异性的变化。样品准备和上样质控理想地,上样质控是多步骤过程的一部分,

上样质控和抗体验证用于Western-blot定量

今天的帖子的灵感来自于我和同事在教他们SDS-PAGE和western blot的实验交谈中。 他们对于qRT-PCR(R)和流式细胞术(R)精通,特别关心如何以及为什么使用某些上样质控,还有其它的技术被使用验证,蛋白质表达和抗体特异性的变化。 样品准备和上样质控 理想地,上样质控是多步骤过程的

定量western-blot实验为什么需要用验证抗体

 验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗

定量western-blot实验为什么需要用验证抗体?

验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体

基因敲除(KO)在验证抗体特异性的应用

抗体作为基础科学研究和临床试验常用的工具之一,主要通过抗原-抗体的反应揭示蛋白质在生命活动中的变化。尽管它们被广泛的使用,但是没有相关标准以确保商业抗体特异性和质量上的一致性。这使得科学界一直存在“重现危机”,浪费了科学家们大量的时间和金钱,妨碍生命科学研究的快速发展。因此,对抗体进行敏感性和特异性

定量western-blot实验为什么需要用验证抗体

   验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而

你用的配对抗体经过病毒培养物验证了吗?

新冠抗原检测试剂盒面对愈演愈烈的新冠肺炎疫情,美国总统特朗普于8月28日表示,美国政府计划购买雅培公司(Abbott Laboratories)1.5亿人次的新冠抗原检测试剂盒,试剂盒单价为5美元,采购总额达到7.5亿美元。在此之前,美国食品药品监督管理局(FDA)在8月26日晚间向雅培的便

常见的流式细胞术抗体特异性验证方法

常见的流式细胞术抗体特异性验证方法:免疫荧光染色共定位:使用该抗体与已知针对同一细胞结构或分子但标记不同荧光素的另一种抗体同时进行染色。通过观察两种荧光信号的共定位情况,如果高度重合,说明该抗体具有较好的特异性。竞争抑制实验:在抗体染色前,先加入过量的未标记的相同抗原,然后再加入标记的抗体进行染色。

常见的流式细胞术抗体特异性验证方法

以下是一些常见的流式细胞术抗体特异性验证方法:免疫荧光染色对照实验:阳性对照:使用已知高表达目标抗原的细胞或组织切片进行染色,观察预期的阳性信号。阴性对照:选取已知不表达目标抗原的细胞或组织进行染色,应无明显信号。同型对照:使用与实验抗体同亚型、同荧光素标记但无特异性结合能力的同型抗体作为对照,排除

优宁维:全面的抗体供应商和一站式服务商

  分析测试百科网讯 2021年4月23日-24日,2021第六届(上海)细胞与肿瘤精准医疗高峰论坛在上海展览中心召开,此次大会内容涵盖了细胞治疗与基因治疗研发、干细胞的研究与申报、溶瘤病毒药物的开发、工艺与临床、生物创新药物的开发、临床研究与治疗进展等。来自细胞产业相关领域的专家、学者、技术人员齐

如何确定某个抗体是否能用于未经验证的种属?

Abcam不能保证某个抗体能够成功的用于未经我们验证的种属,即使其序列同源性很高。因为一个抗体能否用于检测其他种属的影响因素是非常多的。如果没有其他的选择,您需要考虑购买抗体用于未经检测的种属时,推荐您先确定下该抗体所用免疫原与您要检测蛋白的序列同源性。您可以通过网上说明书中“Swiss-Prot

如何优化流式细胞术抗体的特异性验证实验?

以下是一些优化流式细胞术抗体特异性验证实验的建议:多种方法结合:不要仅仅依赖于一种验证方法,而是综合使用多种,如免疫荧光染色对照、竞争抑制实验、敲除细胞株验证、交叉反应检测等,以从不同角度评估抗体特异性。优化细胞模型:除了常用的细胞系,考虑使用原代细胞或更接近体内生理状态的 3D 细胞培养模型,以提

中国科研工作者对抗体试剂问题的反思

  2015年5月19日 Nature杂志从美国和加拿大几位资深科学家的亲身经历,深度阐述了目前抗体试剂的现状与问题,给全世界科研工作者敲响了警钟。身为中国科研工作者,我们遇到的抗体试剂问题只怕比国外同行来得更多,当下除了抱怨,我们更应深刻反思:如何才能获得高质量、合适的抗体试剂。  获得高质量、合

药品供应商岂能“打酱油”

  国家食品药品监督管理总局日前证实,云南白药集团中药资源公司曾购买桂林兴达药业有限公司违法生产的6900公斤银杏叶提取物。据食药总局5月19日的通报,包括云南白药等三家上市公司在内的24家药企,采购了桂林兴达药业有限公司非法生产的银杏叶提取物。  顶着“云南白药”的金字招牌,云南白药集团中药资源公

如何验证抗体参数,确保特异性,选择性和重复性?

你有没有从抗体供应商那里订购过抗体? 你遇到过抗体特异性,选择性和重复性出问题吗? 你是否曾将抗体退回给供应商,却收到另一份劣质产品吗? 如果你对上述问题的回答是肯定的,那么你也遭受过“坏”抗体的毒害。据估计,所有购买的抗体中约有50%是“坏的”,仅在美国就浪费了约3.5亿美元。 研究人员可以使

Supplier和Vendor,哪个才是供应商?

   Supplier和Vendor的中文意思都是“供应商”,但实际上两个词意义区别很大。在美国,这两个词有其一定的行业、职业背景。  先说职业。正规的采购与供应管理专业人士很少用Vendor。Supplier是正式用法。笔者认识一位供应管理总监,他的理论非常简单:如果面试者开口闭口谈Vendor,

一文了解限度验证和定量验证

  限度的制定根据分析方法的不同,制定原则各有不同。  对于含量方法的限度,根据处方、工艺、分析方法精度、分析方法耐用性等因素,对制剂规格量(原料为100%)的上限与下限进行适当调整。  对于杂质检查,除药典另有规定外(砷盐检查法、残留溶剂检查法、不溶性微粒检查、无菌检查法等),应根据处方、工艺、分

日本新开发过敏性皮炎瘙痒抗体-临床试验证明有效

  据日媒报道,由日本京都大学,九州大学和中外制药公司等组成的科研团队2日在美国医学杂志网站上发表研究成果称,旨在减轻过敏性皮肤炎瘙痒症状的"抗体制剂"临床试验结果显示具有有效性。  据称,因瘙痒导致的失眠状况也有显着改善。科研团队力争在2019年以后为获得《药事法》批准而提出申请,此次表示"希望作

流式细胞术抗体的特异性验证方法的局限性有哪些?

流式细胞术抗体的特异性验证方法存在以下一些局限性:细胞模型的局限性:在使用细胞系进行验证时,细胞系可能不能完全代表体内细胞的真实情况,因为细胞在体外培养过程中可能会发生表型和基因表达的改变。抗原复杂性:某些抗原可能存在多种异构体、修饰形式或与其他分子的复合物,而验证方法可能无法涵盖所有这些情况,导致

介绍一些常见的流式细胞术抗体的特异性验证方法

常见的流式细胞术抗体特异性验证方法:免疫荧光染色共定位:使用该抗体与已知针对同一细胞结构或分子但标记不同荧光素的另一种抗体同时进行染色。通过观察两种荧光信号的共定位情况,如果高度重合,说明该抗体具有较好的特异性。竞争抑制实验:在抗体染色前,先加入过量的未标记的相同抗原,然后再加入标记的抗体进行染色。

介绍一些常见的流式细胞术抗体的特异性验证方法

以下是一些常见的流式细胞术抗体特异性验证方法:免疫荧光染色对照实验:阳性对照:使用已知高表达目标抗原的细胞或组织切片进行染色,观察预期的阳性信号。阴性对照:选取已知不表达目标抗原的细胞或组织进行染色,应无明显信号。同型对照:使用与实验抗体同亚型、同荧光素标记但无特异性结合能力的同型抗体作为对照,排除

清洁验证方案

参照物质或最难清洁物质、最难清洁部位和取样部位,如何制订验证的合格标准即最大允许残留清洁验证方案必须符合一般验证方案的共性要求。验证方案中最关键技术问题为如何确定限度,用什么手段能准确地定量残留量,这包括取样方法和检测方法的开发和验证。