研究获得iPSCs的新程序
胚胎干细胞能够分化成其他的细胞类型，因此用于医疗行业具有巨大的潜力。然而，它们的使用带来了伦理问题，因为要获得它们，就必须破坏胚胎。为此，医学研究使用所谓的诱导多能干细胞（iPSC）。事实上，我们可以通过简单的抽血并使细胞“回归”一个类似胚胎干细胞的状态，重编程成人细胞。重编程的细胞（iPSC）能够产生成年生物体的所有细胞类型，如脑或心脏细胞。 最近，European Academy Bozen/Bolzano（EURAC）和Sanford-Burnham医学研究所等处的研究人员，提出了一种获取诱导多能干细胞的新程序，这种具有经济划算的程序使用非整合型附加体质粒，用全血离心分离后的冷冻血沉棕黄层获得的外周血单核细胞（PBMNCs），产生iPSCs。研究人员在近期的《美国视频实验期刊》（Journal of Visualized Experiments，JoVE），详细描述了这一程序。 iPSC技术正在让医学科学产生变革......阅读全文
细胞传代实验
细胞培养技术 消化法 实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长
细胞计数实验
实验方法原理细胞悬液制备后，需要计算悬液中所含细胞数量；一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力，接种后能够生长增殖，所以在接种关应先检查一下细胞的活力。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒台盘蓝酒精培养液仪器、耗材吸管实验步骤1. 计数板用96%酒精冲洗计数板后，用干净鹿皮擦净，另擦净盖片一张；
细胞划痕实验
材料：6孔板marker笔直尺20微升枪头（灭菌）无血清培养基PBS准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流程：1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约
细胞传代实验
实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640双抗胰蛋白酶EDTANHCl
细胞计数实验
实验方法原理 细胞悬液制备后，需要计算悬液中所含细胞数量；一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力，接种后能够生长增殖，所以在接种关应先检查一下细胞的活力。 实验材料
细胞划痕实验
材料： 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS 准备： 所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内） 流程： 1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细胞转染实验的实验步骤
细胞传代(1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
细胞转染实验的实验目的
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。
细胞转染实验的实验原理
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和
细胞凋亡研究
前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展，体内平衡，甚至在不同的疾病，例如：癌症，的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里，科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中，细胞会有不同的形态变化。同时，细胞膜(plasma membrane)，线粒体(mitocho
细胞技术专题：细胞传代实验
根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代
细胞成团和细胞出芽实验
近几年来，3D（three dimensional）细胞培养系统开始成为生物学研究新的研究方法。使用3D系统培养系统能更好的模拟生物体内的真实生理环境，而2D（传统的贴壁培养）细胞培养系统不能有效的模拟细胞在生物体内的生理环境。3D细胞技术有很多种方法，使用多细胞形成的细胞团是其中主要的研究应用之一
Stem－cell：变革干细胞研究的突破性实验方案
来自威斯康星大学麦迪逊分校的一个工程师小组，创造出了一个有可能彻底改变干细胞研究的程序。这一程序将改进现有的技术来构建出用于中枢神经系统研究的人造神经干细胞。相关论文发表在2013年12月19日的《Stem Cells》杂志上。 一直以来，人们利用人类多能干细胞来再生神经系统细胞，用于
实验鼠不能取代人体胚胎干细胞研究
导读：美国耶鲁大学科学家5日宣布，他们新完成的研究详细地揭示了人体胚胎干细胞中的3种基因是如何控制人体发育的，该成果有望帮助人们深入了解如何培育这些细胞用于疾病治疗。研究人员在新出版的《细胞·干细胞》杂志上发表文章称，人体胚胎干细胞对人体的作用不同于实验鼠胚胎干细胞对鼠体的作用，这凸显了利用人体胚胎
埃及研究发现干细胞可恢复实验鼠卵巢功能
埃及科学家利用干细胞治疗方法，使生殖能力有缺陷的雌性实验鼠的卵巢功能得到完全恢复，这一成果有望为治疗女性卵巢早衰提供新思路。 据外电报道，埃及国家研究中心的科学家9月15日在德国举行的世界生殖和不孕大会上报告说，他们在研究中使用的是间充质干细胞。 间充质干细胞主要存在于结缔组织和器官间质中，
单细胞研究指南：细胞分离
多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过，近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们，每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制，即使是同类型细胞，基因表达也会出现差异。 那么，细胞之间的哪些差异有生物学意义，哪些差异来自于技术偏好呢？要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢？这
实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以：鉴定细胞凋亡形态；可以准确的进行凋亡细胞的计数；可以进行特异的定性分析和定量分析。实验原理细胞凋亡时，在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变，这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质，如细胞长成片之后，让细胞片与底物脱离，更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时，则细胞片能卷聚成球体形，成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶，每
体细胞杂交实验——单层全细胞融合实验
实验材料汇合至一定程度的受体细胞试剂、试剂盒受体细胞适合生存的培养基合适的选择性试剂含感兴趣染色体及合适遗传标记的供体细胞仪器、耗材10 cm 组织培养板25 cm 组织培养瓶倒置相差显微镜实验步骤基本方案 单层全细胞融合1.倘若不知道细胞的选择条件，通过以下方式来确定：将培养于 25 cm 培养瓶
上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成，人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养；肝脏具有取材方便和易于生长的优点，能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整，有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力，适用做多种研究；我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材
细胞融合实验的实验原理
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
真核细胞转染实验
学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验材料真核细胞试剂、试剂盒脂质体 转染液仪器、耗材CO2孵箱 离心管 6孔板
真核细胞转染实验
真核细胞的转染 实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒 脂质体 转染液
细胞划痕实验步骤
材料：6孔板marker笔直尺20微升枪头（灭菌）无血清培养基PBS准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流程：1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约
白细胞计数实验
实验方法原理血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。用具及试剂：白细胞稀释液（0.38ml）试管一支，显微镜，盖玻片，血红蛋白吸管，小玻璃棒，小手巾，计数板。实验步骤1．用血红蛋白吸管吸血20mm3刻度处，拭去管尖血渍。2．将管内血液放入盛有白细胞稀释液的小试管内