研究获得iPSCs的新程序
胚胎干细胞能够分化成其他的细胞类型，因此用于医疗行业具有巨大的潜力。然而，它们的使用带来了伦理问题，因为要获得它们，就必须破坏胚胎。为此，医学研究使用所谓的诱导多能干细胞（iPSC）。事实上，我们可以通过简单的抽血并使细胞“回归”一个类似胚胎干细胞的状态，重编程成人细胞。重编程的细胞（iPSC）能够产生成年生物体的所有细胞类型，如脑或心脏细胞。 最近，European Academy Bozen/Bolzano（EURAC）和Sanford-Burnham医学研究所等处的研究人员，提出了一种获取诱导多能干细胞的新程序，这种具有经济划算的程序使用非整合型附加体质粒，用全血离心分离后的冷冻血沉棕黄层获得的外周血单核细胞（PBMNCs），产生iPSCs。研究人员在近期的《美国视频实验期刊》（Journal of Visualized Experiments，JoVE），详细描述了这一程序。 iPSC技术正在让医学科学产生变革......阅读全文
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
细胞划痕实验操作
细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。细胞划痕实验实验材料细胞样品试剂、试剂盒无血清培养基PBS仪器、耗材6孔板marker笔直尺枪头抗体Hamster IgG3, λ抗体Hamster IgG3, λ抗体Hamster IgG3,
细胞冻存实验
细胞冻存实验可以用于：（1）妥善贮存细胞；（2）维持细胞生存；（3）节约人力、物力、时间及减少污染机会；（4）维持细胞发生遗传性状的稳定。实验方法原理细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷冻。细胞冻存时向培养基中加入保护剂，即终浓度5%.15%的甘
细胞转染实验介绍
一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介
细胞铁染色实验
实验方法原理 骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素（细胞外铁）和幼稚红细胞的铁粒（细胞内铁）在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应．试剂、试剂盒 盐酸溶液亚铁氰化钾溶液碱性复红贮存液复染应用液甲醛实验步骤 一、 实验试剂：1. 4％盐酸溶液，小心取浓盐酸（38％）40ml慢慢滴加至冷蒸
细胞融合实验
实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell fusion)，即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合，在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合，也
细胞冻存实验
实验方法原理细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷冻（图 20.8）。细胞用胰酶消化后，加入含有细胞保护剂的培养基，分装至冻存管中，然后将其夹到铝条上，用纸质管包裹，放入隔热储存管中。将储存管及其内容物于-70℃或-80℃存放4h或过夜，最后将含有
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
富集活细胞实验
实验方法原理 在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料 细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒 Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材 离心管或常规容器生长培养基
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
细胞凋亡检测实验
实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和
肿瘤细胞侵袭实验
Matrigel 基质膜模型 实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯
细胞伤口愈合实验
细胞伤口愈合实验被研究者广泛应用和改进，用来研究各种实验条件比如基因敲除和化疗在细胞迁移和增殖中的作用。该实验的优势在于（1）操作简单（2）费用廉价（3）实验条件容易根据不同的目的改进。实验方法原理在单层培养细胞间制作划痕以产生愈伤区域，然后监控该伤口周围细胞的向划痕迁移的现象，即伤口愈合。改变细胞
细胞伤口愈合实验
原理：细胞伤口愈合实验被研究者广泛应用和改进，用来研究各种实验条件比如基因敲除和化疗在细胞迁移和增殖中的作用。该实验操作简单，费用廉价，实验条件容易根据不同的目的改进。该方法的基本原理是，在单层培养细胞间制作划痕以产生愈伤区域，然后监控该伤口周围细胞的向划痕迁移的现象，即伤口愈合。改变细胞迁移和/或
细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法。只有具备自身稳定生长特性的细胞才适合在观察细胞生长变化的实验中应用。因而在细胞系细胞和非建系细胞生长特性观察中，生长曲线的测定是最为基本的指标。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液牛血清R
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
红细胞计数实验
实验方法原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数地中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。试剂、试剂盒赫母代氏红细地稀释液氯化钠结晶硫酸钠氯化高汞蒸馏水柠檬进盐甲留盐水仪器、耗材显微镜血红蛋白吸管计数板盖玻片实验步骤三、实验试剂：l、赫母（Hayem）代氏红细地
昆虫细胞转染实验
实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1. 接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40 ul 无菌
肿瘤细胞侵袭实验
Matrigel 基质膜模型 实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为
白细胞计数实验
实验方法原理血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。用具及试剂：白细胞稀释液（0.38ml）试管一支，显微镜，盖玻片，血红蛋白吸管，小玻璃棒，小手巾，计数板。实验步骤1．用血红蛋白吸管吸血20mm3刻度处，拭去管尖血渍。2．将管内血液放入盛有白细胞稀释液的小试管内
细胞融合实验
实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结
细胞集落形成实验
实验概要非整倍体无限细胞系和癌细胞株中，仍然存在不同细胞亚群，它们的功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细胞集落率很低。细胞
白细胞计数实验
实验方法原理 血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。用具及试剂：白细胞稀释液（0.38ml）试管一支，显微镜，盖玻片，血红蛋白吸管，小玻璃棒，小手巾，计数板。 实验步骤
昆虫细胞转染实验
实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1. 接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40
细胞划痕实验详解
细胞迁移在许多复杂的生理和病理过程中起着重要作用。伤口愈合测定是研究体外细胞迁移的简单方法。该测定基于以下观察：当在汇合细胞单层上产生人工间隙时，所产生的间隙边缘上的细胞将迁移直至建立新的细胞。ibidi Culture-Insert 系列为伤口愈合实验提供了完整的解决方案，从样品制备到图像分析
细胞生长曲线实验
细胞生长曲线可应用于：（1）测定细胞绝对生长数；（2）判定细胞活力。实验方法原理细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲
细胞铁染色实验
实验方法原理骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素（细胞外铁）和幼稚红细胞的铁粒（细胞内铁）在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应．试剂、试剂盒盐酸溶液亚铁氰化钾溶液碱性复红贮存液复染应用液甲醛实验步骤一、 实验试剂：1. 4％盐酸溶液，小心取浓盐酸（38％）40ml慢慢滴加至冷蒸馏水340
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷