一滴血扫描出一生感染的病毒

“只需要不到一滴血,新的技术就可以找出人的一生感染过哪些病毒。” 来自马萨诸塞州波士顿的布莱根妇女医院和哈佛医学院的研究者说。 George Xu(一名哈佛大学生物物理专业和哈佛-麻省理工学院健康科学与技术的研究生)和他的同事说到,这项新的方法(ZL为VirScan)阐明了人的免疫力如何与病毒库(可能感染人类的所有病毒)相联系,他们的研究结果在线发表在6月5日的科学杂志。 “这项技术的独特之处在于‘规模’:现在,医生需要猜测是什么病毒在作怪,并一个一个测试。使用VirScan,我们只需要一个测试,就可以寻找几乎所有的病毒,甚至是罕见的病毒。 “共同作者Stephen Elledge博士(布莱根妇女医院和哈佛医学院遗传学教授)在一个新闻发布会上如是说。 作者发现大多数志愿者感染过大约10种病毒,但是至少两位志愿者感染过84种病毒。 Paul G. Auwaerter(医学博士,马里兰州巴尔的摩约翰霍普金斯大学医学院的传......阅读全文

病毒包装技术——病毒与非病毒载体

基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,一般实验方向

病毒包装技术——腺病毒包装流程

1. 细胞的准备a) 复苏293细胞,传代培养1-2代,调整好细胞状态,务必4代以内完成转染实验。b) 在转染前1天,用胰酶消化传代,将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中,加入2ml完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax),摇匀后置于5% CO2、95% 湿润

病毒包装技术1——病毒与非病毒载体介绍

  基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。   锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,

病毒冷冻保藏技术

实验概要Snap freezing, or flash freezing, is the process by which samples are lowered to temperatures below -70°C very rapidly using dry ice or liquid

病毒包装技术——腺病毒载体的制备

1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄

病毒包装技术6——腺病毒包装流程介绍

  1. 细胞的准备   a) 复苏293细胞,传代培养1-2代,调整好细胞状态,务必4代以内完成转染实验。   b) 在转染前1天,用胰酶消化传代,将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中,加入2ml完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax),摇匀后置于5%

病毒包装技术——病毒包装实验经验总结

第一,细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等)是三个主要影响病毒质量的因素。第二,细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断,比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意,一般在

病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(一)

摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AA

病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(二)

2.3 蛋白质分析 为了分析AAV Rep和Cap蛋白质表达,按照2.2部分所述进行质粒转染。转染后48小时,将培养物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),细胞低速离心沉淀收获。细胞沉淀在冰上用200ml STM-NP缓冲液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl,pH8

病毒蚀斑技术(2)

(三) 操作实例1.赤羽病病毒(AKV)的滴定或纯化 (1) 于55mm直径的灭菌塑料培养皿中培养绿猴肾细胞(Vero),使形成单层。细胞培养时间约3-4天,接种量约为2 000 000/ml个细胞。选取单层细胞全部覆盖,不留有空洞的培养皿用作试验。 (2) 用细胞培养液对AKV病毒作10倍

病毒蚀斑技术(1)

1952年,Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学,从而使病毒蚀斑技术 (Virus plaque formation)成为许多病毒的滴定和研究方法。(一) 原理 病毒感染细胞后,由于固体介质的限制,释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期,便形成一个局限性病变细胞区

病毒蚀斑技术介绍

1952年,Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学,从而使病毒蚀斑技术(Virus plaque formation)成为许多病毒的滴定和研究方法。 1、原理 病毒感染细胞后,由于固体介质的限制,释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期,便形成一个局限性病变细胞区,此

病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程

一、实验流程(1和2为并列步骤)慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,PCR(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(CDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。

病毒包装技术5——腺病毒载体的制备介绍

  1 菌液的准备   1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。   1.2. 将单

病毒包装技术7——腺相关病毒(AAV)包装介绍

  锐赛小课堂技术篇0702-113   摘要:   腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH

关于腺病毒包装技术的技术要点介绍

  重组腺病毒的包装制备:重组腺病毒是从由侵染色斑组成单位(pfu)中分离获得的。一个单色斑是线性载体质粒转染后在20×15 cm板上由293A细胞连续侵染后被挑选和扩增形成的。重组腺病毒可通过超速离心纯化,并测定滴度及进行PCR鉴定。纯化后重组腺病毒的滴定浓度为1010pfu/ml,获得的量为2-

病毒的大规模纯化技术

实验概要现代病毒研究往往需要大量的纯病毒粒子,以便于化学研究或制备抗体。本文简明地描述了一下脊髓灰质炎病毒(Polio virus)的纯化步骤。它是一种已被广泛研究的危害人体健康的病毒。实验步骤1. 在大型装置中培养病毒。为获得足够的用于化学研究的病毒,必须制备大量病毒。每种病毒的培养都有不同的

TERS技术最新应用——病毒检测

  距离2020年全球最大公共卫生事件——新冠病毒的爆发已接近半年,病毒仍在肆虐并在全球蔓延,感染人数也持续攀升。尽管欧美一些国家的新增死亡病例有所下降,然而全球的新增确诊人数却在急速上升。疫情何时能控制住仍未可知,但我们有理由期待一个更美好的明天。   在全球医护人员都为抗击疫情奋战的同时,

新技术让病毒无处遁形

  4月9日,深圳检验检疫局植物隔离检疫中心技术人员正紧张地在仪器前操作,“阴性对照OD405=0.03,阳性对照OD405=2.868,待测样品的OD405分别为1.86和2.079,结果判定为阳性。深圳罗湖检验检疫局送检的样品中检出建兰花叶病毒。”   这是该局植物隔离检疫中心成立后,首次利用

病毒中和试验的技术特点

中文名称病毒中和试验英文名称virus neutralization test定  义一种检测特异性抗体的技术。即用已知病毒测定待测血清中的中和抗体。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

腺病毒包装技术的简介

  腺病毒(Adenovirus)是最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点:   1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。   2. 因

病毒介导基因转移技术介绍

病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运

病毒包装技术8——病毒包装实验经验总结介绍

  锐赛小课堂常识篇0703-115   病毒包装实验经验总结   第一,细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等)是三个主要影响病毒质量的因素。   第二,细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断,比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立

美国快速检测冠状病毒技术技术有哪些?

  近期,美国食品和药物管理局(FDA)批准了一项由总部位于加利福尼亚的造父变星公司(Cepheid)研制新的冠状病毒快速检测技术。  该检测可以在45分钟内诊断出新型冠状病毒,在公司遍布全国的5000台机器上不需要经过医生培训就可以处理。  3月13日,FDA还批准了罗氏公司(Roche)的一项检

病毒包装技术3——慢病毒载体构建及包装流程介绍

  1 菌液的准备   1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。   1.2. 将单

病毒包装技术——慢病毒生产及使用操作手册

一、实验流程制备慢病毒表达质粒及其辅助载体,四个质粒共转染293T细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。二、实验材料慢病毒载体包装系统为四质粒系统, 组成为Gag/pol、vsvg、rev及pLenti-X-EGFP表

病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术

实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象,即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色,即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮,从而清楚地显示出被衬物的

我国掌握蓝舌病病毒检测技术

日前,解放军军事医学科学院传来消息,由该院野战输血研究所成功研制的两个蓝舌病病毒检测试剂盒(逆转录—聚合酶链式反应核酸通用检测试剂盒和荧光定量逆转录—聚合酶链式反应核酸通用检测试剂盒),经农业部批准进入临床试验。临床试验完成后,将按国家有关要求,分别申报国家兽用生物制品一类新药证书。 项目负责人、解

轻松人造病毒的新技术平台

  在自然界中,噬菌体(bacteriophages)随处可见。本质上它们属于病毒,主要攻击并杀死特定细菌。利用这种特性,研究人员和医务人员希望通过人工改造噬菌体来对付细菌感染,例如某些食品工业已经采用天然噬菌体来破坏食品中的病原体了。  然而,基因工程噬菌体却是一个极具挑战的项目。在苏黎世联邦理工

植物病毒的电镜技术法检测

从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种