NatCommun：基于荧光素酶的高效医疗诊断工具
在生物学和医学领域，我们经常会需要检测生物学分子，比如在癌症诊断中，医生往往需要快速可靠的方法来知晓肿瘤细胞是否存在于患者机体中；尽管存在很多检测手段，但通常这些技术都非常耗时、昂贵。近日，刊登在国际杂志Nature Communications上的一项研究报告中，来自欧洲分子生物学实验室的科学家们对萤火虫发光的酶类进行了化学修饰，以该修饰后的酶类分子来帮助寻找靶向的生物学分子，相关研究或可提供一种快速、廉价且高效的准确检测系统来帮助进行未来的医学研究。 研究者Kai Johnsson教授说道，我们给萤光素酶添加了一种小型化学标记，这种标记可以检测靶向蛋白，而荧光素酶则为我们提供了一种光信号来让我们用肉眼就可以识别；早在2014年研究者就开发出了一种快速简单的药物监测分子，而本文研究中，研究者标新立异，绕过蛋白质工程的麻烦，通过对荧光素酶突变来使其对靶向蛋白更加敏感，同时给荧光素酶吸附上了一种小分子标记。 这种标记可以作......阅读全文
荧光素酶基因是怎样产生的
用作报告基因的荧光素酶基因emphasis：role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸参与下，使脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下，催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素，同时放出光
荧光素酶基因是怎样产生的
用作报告基因的荧光素酶基因emphasis：role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸参与下，使脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下，催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素，同时放出光
双荧光素酶实验原理是什么
v双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴
荧光素酶基因是怎样产生的
用作报告基因的荧光素酶基因emphasis：role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸参与下，使脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下，催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素，同时放出光
荧光素酶基因是怎样产生的
用作报告基因的荧光素酶基因emphasis：role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸参与下，使脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下，催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素，同时放出光
双荧光素酶报告基因测试
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因
双荧光素酶实验原理是什么
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理是什么
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理是什么
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素标记试剂与酶标试剂
(1)酶标试剂：酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异，而非发射光来检测，底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域，因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。 酶反应后出现沉淀，在酶所处位置周围产生不溶性显色产物，通过底物的显色来检出
荧光素酶的作用原理及应用
荧光素酶（luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素，在荧光素氧化的过程中，会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达，是检测转录因子与目的基因
荧光素酶基因是怎样产生的
用作报告基因的荧光素酶基因emphasis：role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物，在还原型黄素单核苷酸参与下，使脂肪醛氧化为脂肪酸，同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下，催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素，同时放出光
双荧光素酶实验原理是什么
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
双荧光素酶实验原理是什么
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣
荧光素酶的作用原理及应用
荧光素酶（luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素，在荧光素氧化的过程中，会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达，是检测转录因子与目的基因
双荧光素酶转烟草如何观察
观察双荧光素酶转烟草可以通过以下步骤：1.准备转基因烟草植株：使用含双荧光素酶基因的转基因烟草，使其表达荧光蛋白。2.观察烟草植株：使用荧光显微镜观察转基因烟草植株，检查其是否表达荧光蛋白。荧光显微镜可以用来观察转基因烟草叶片、茎、花和果实等部位，以检查是否存在荧光信号。3.测定荧光强度：可以使用荧
纤维素酶能否酶解纤维素
成熟棉纤维的主要成分是纤维素，纤维素是天然高分子化合物，由葡萄糖分子按β-1，4糖苷键连接而成。棉纤维中大分子的排列比较复杂，纤维内某些区域由于大分子的横向吸引使大分子排列比较整齐密实，缝隙孔洞较少，这称为结晶区。相反，另一些区域大分子排列比较紊乱，堆砌比较疏松，其中有较多的缝隙孔洞，密度较低，这称
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的技术流程
启动子的预测转录因子的预测报告基因质粒的构建实验方法及结果分析 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。扩增转录因子质
荧光素酶报告基因的技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase