长春应化所细胞膜结构研究获进展

细胞膜(cell membrane)是由磷脂、糖和蛋白质组成的生物膜。因结构复杂和研究手段有限,一个世纪以来细胞膜的结构研究仍停留在模型假说阶段,细胞膜这一重要的细胞基本成分至今仍是未解难题。 中国科学院长春应用化学研究所研究员王宏达课题组,应用原子力显微镜、超分辨荧光显微镜和单分子力谱等高分辨、高灵敏的单分子技术,在接近生理条件下对多种细胞膜结构进行了系统深入研究(Nano Letters, 9, 4489 (2009); Nanoscale, 5, 11582 (2013); Cell Research, 24, 959 (2014); PLoS ONE, 9, e91595 (2014))。他们统一了多种模型观点,阐明细胞膜包括多种特征,如磷脂双层结构、流动镶嵌性、脂筏和非脂筏区域共存性、内外膜非对称性、不同功能细胞膜的差异性等,而不是单一模型可以解决所有的细胞膜问题。相关系列成果发表后被英国化学会《化学会评论》邀请......阅读全文

细胞膜的流动镶嵌模型的简介

  流动镶嵌模型突出了膜的流动性和不对称性,认为细胞膜由流动的脂双层和蛋白质组成。磷脂分子以疏水性尾部相对,极性头部朝向水相组成生物膜骨架,蛋白质或嵌在脂双层表面,或嵌在其内部,或横跨整个脂双层,表现出分布的不对称性。  不足之处:  1)不能说明膜在变化过程中如何保持膜的完整性和稳定性;  2)忽

关于细胞膜的晶格模型的介绍

  1975年,Wallach提出晶格模型。晶格模型是对流动镶嵌模型的补充,强调流动的整体性。用膜脂可逆地进行无序(液态)和有序(晶态)的相变来解释生物膜的流动性。膜镶嵌蛋白对脂类分子的运动具控制作用。镶嵌蛋白和它周围的脂类分子形成晶格状态,这些不移动的脂类分子称界面脂质,而流动的脂质呈小片、点状分

关于细胞膜三明治模型和单位膜模型的介绍

  J. Danielli & H. Davson1925 发现质膜的表面张力比油-水界面的张力低得多,推测膜中含有蛋白质,从而提出了”蛋白质-脂类-蛋白质”的三明治模型。认为质膜由双层脂类分子及其内外表面附着的蛋白质构成的。1959年在上述基础上提出了修正模型,认为膜上还具有贯穿脂双层的蛋白质通道

细胞膜的板块镶嵌模型的功能简介

  1977年,Jain和White提出生物膜是由具有不同流动性的板块镶嵌而成的动态结构。   脂筏模型  脂筏(lipid raft)是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域(microdomain)。大小约70nm左右,是一种动态结构,位于质膜的外小页。由于鞘磷脂具有较长的饱和脂肪酸链,分子间的作用

如何大量提取细胞膜蛋白

如何大量提取细胞膜蛋白如果是前者,可能确实需要从细胞提总蛋白,pierce的试剂盒肯定是首选的了,细胞量也应该问题不大,腹水收的细胞量还是相当大的但是如果是后者不如考虑异源表达,可能更方便后续的试验

细胞膜蛋白质提取方法

NRC Institute for Biological SciencesTriton X-114 extraction protocol (Hydrophobic protein preparation)Ressuspend cells in Solution A (dil 1/8) and ad

细胞膜的膜蛋白的相关介绍

  细胞膜蛋白质(包括酶)膜蛋白质主要以两种形式同膜脂质相结合:分内在蛋白和外在蛋白两种。内在蛋白以疏水的部分直接与磷脂的疏水部分共价结合,两端带有极性,贯穿膜的内外;外在蛋白以非共价键结合在固有蛋白的外端上,或结合在磷脂分子的亲水头上。如载体、特异受体、酶、表面抗原。占20%~30%的表面蛋白质(

细胞膜蛋白质的提取方法

  1.热变性及酸碱变性沉淀法 用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。   2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。   3.等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。

红细胞膜蛋白电泳分析的原理

  将制备的红细胞膜样品进行SDS-PAGE电泳,根据样品中各蛋白相对分子质量的不同,分离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱,从而可见各膜蛋白组分百分率。

B细胞膜表面免疫球蛋白的概述

  B细胞膜表面有一种特征性的免疫球蛋白(surface membrane immunoglobulin,SmIg)。早期的前B细胞表达 IgM,成熟的B细胞表达IgD、IgM或 IgA、 IgE等。用荧光标记羊抗人 IgG、 IgM、IgA、IgD或IgE抗体,分别与活性淋巴细胞反应,于荧光 显微

细胞膜蛋白质提取方法蛋白质沉淀法

1.热变性及酸碱变性沉淀法 用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。  2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。4.非离子多聚体沉淀法

简述蛋白质折叠的生长模型

  根据这种模型,肽链中的某一区域可以形成“折叠晶核”,以它们为核心,整个肽链继续折叠进而获得天然构象。所谓“晶核”实际上是由一些特殊的氨基酸残基形成的类似于天然态相互作用的网络结构,这些残基间不是以非特异的疏水作用维系的,而是由特异的相互作用使这些残基形成了紧密堆积。晶核的形成是折叠起始阶段限速步

细胞膜蛋白质提取方法——蛋白质沉淀法(二)

第二节 有机溶剂沉淀法有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出。该法优点在于:1)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀;2)沉淀不用脱盐,过滤较为容易;3)在生化制备中应用比盐析法广泛。其缺点是对具有生物活性的大分

细胞膜蛋白质提取方法——蛋白质沉淀法(一)

1.热变性及酸碱变性沉淀法 用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。  2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。4.非离子多聚体沉淀法

蛋白质结构和功能的基础模型

蛋白质设计程序使用在体内环境中驱动蛋白质的分子力的计算机模型。为了使问题易于解决,蛋白质设计模型简化了这些作用力。尽管蛋白质设计程序相差很大,但它们必须解决四个主要的建模问题:设计的目标结构是什么,目标结构允许什么样的灵活性,搜索中包括哪些序列,以及将使用哪个力场来分数序列和结构。目标结构蛋白质功能

简述极低密度脂蛋白结构模型

  极低密度脂蛋白:运输肝脏中合成的内源性甘油三酯。无论是血液运输到肝细胞的脂肪酸,或是糖代谢转变而形成的脂肪酸,在肝细胞中均可合成甘油三酯。在肝细胞内,甘油H酯与APOB100、胆固醇等结合,形成VLDL并释放入血。在低脂饮食时,肠粘膜也可分泌一些VLDL入血。VLDL入血后的代谢,大部分变成低密

蛋白质折叠的框架模型的介绍

  框架模型[4] 假设蛋白质的局部构象依赖于局部的氨基酸序列。在多肽链折叠过程的起始阶段,先迅速形成不稳定的二级结构单元; 称为“flickering cluster”,随后这些二级结构靠近接触,从而形成稳定的二级结构框架;最后,二级结构框架相互拼接,肽链逐渐紧缩,形成了蛋白质的三级结构。这个模型

胰蛋白酶处理时间延长是否会破坏细胞膜上的糖蛋白

胰蛋白酶主要是使动物细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解,从而使粘连的细胞脱壁悬浮。胰蛋白酶处理时间过长对细胞有毒性作用(一般视浓度在1-4min内终止)。因为其胰蛋白酶配置过程中有添加EDTA。

细胞膜表面免疫球蛋白测定的临床意义

  免疫缺陷疾病(如无丙球蛋白血症、联合免疫缺陷)时M -RFC降低明显,而EA-RFC、EAC-RFC亦降低。  在慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病时,M-RFC、EA -RFC、EAC-RFC均显著升高。

B细胞膜表面免疫球蛋白的参考值

  IFA法:SmIg阳性细胞均值为21%(16%~28%)。SmIgG为7.1%(4%~13%);SmIgM为8.9%(7%~13%);SmIgA为2.2%(1%~4%);SmIgD为6.2%(5%~8%);SmIgE为0.9%(1%~1.5%)。

细胞膜表面免疫球蛋白测定的临床意义

  免疫缺陷疾病(如无丙球蛋白血症、联合免疫缺陷)时M -RFC降低明显,而EA-RFC、EAC-RFC亦降低。  在慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病时,M-RFC、EA -RFC、EAC-RFC均显著升高。

锌指核酸酶能以蛋白质形态穿透细胞膜

  用于目标基因组修饰的锌指核酸酶(ZFN)能够以蛋白质的形态穿透细胞膜,这是近期《自然—方法学》上一项研究得出的结论。这将让ZFN被投递至细胞内的过程变得更简单、更具安全性。   经过设计的核酸酶比如ZFN,能够让多个种类的基因组产生特定变化,其对研究和基因疗法的辅助作用让人眼前一亮。核酸酶一般

B细胞膜表面免疫球蛋白的临床意义

  主要用于检测外周血B细胞的百分率。①SmIg降低:见于 免疫缺陷性疾病;②SmIg升高:见于慢性淋巴细胞白血病、多毛细胞白血病和原发性巨球蛋白血症。巨球蛋白血症患者SmIgM阳性细胞可高达78%。

细胞膜表面免疫球蛋白测定的正常值

  Smlg阳性细胞均值为21%;SmlgG7.1 %;SmlgM8.9%;SmlgA2.2%;mlgD6.2 %;SmlgE0.9%。

细胞膜蛋白激光检测技术研制成功

  据每日科学网近日报道,美国范德比尔特大学研究人员开发出一种新型激光技术,可检测细胞膜上的蛋白质和其它多种生物分子之间的相互反应。这种检测将在药物开发进程中发挥重要作用。  人类细胞中约有7000种蛋白质,其中30%在细胞膜上,控制细胞分子运作机制的信号有60%—70%由这些膜蛋白产生,

细胞膜表面免疫球蛋白测定的注意事项

  一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。  3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难;  有晕血史者请提前说明,另作特别安

抗肝细胞膜特异性脂蛋白抗体(ALSP)介绍

  ALSP是非疾病特异性,它最常发生于病毒性及原发性自身免疫肝炎,在非肝病的患者,其发生率较低.ALMA为肝特异性抗体之一.抗体的滴度与肝功能的损失程度呈正平行关系.ALSP常用间接免疫荧光法、ELIASA法测定. 间接免疫荧光法实验原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应. 第一步,用

抗肝细胞膜特异性脂蛋白抗体(alsp)介绍

  ALSP是非疾病特异性,它最常发生于病毒性及原发性自身免疫肝炎,在非肝病的患者,其发生率较低。ALMA为肝特异性抗体之一。抗体的滴度与肝功能的损失程度呈正平行关系。ALSP常用间接免疫荧光法、ELIASA法测定。 间接免疫荧光法实验原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用

如何提取细胞膜(动物细胞)上的蛋白质

一,蛋白质(包括酶)的提取大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,

极低密度脂蛋白结构模型的介绍

  极低密度脂蛋白:运输肝脏中合成的内源性甘油三酯。无论是血液运输到肝细胞的脂肪酸,或是糖代谢转变而形成的脂肪酸,在肝细胞中均可合成甘油三酯。在肝细胞内,甘油H酯与APOB100、胆固醇等结合,形成VLDL并释放入血。在低脂饮食时,肠粘膜也可分泌一些VLDL入血。VLDL入血后的代谢,大部分变成低密