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透过基金看热点:上百份肿瘤干细胞项目

国家自然科学基金委员会公布了2015年国家自然科学基金申请项目评审结果,其中面上项目16709项、重点项目624项、创新研究群体项目38项、优秀青年科学基金项目400项、青年科学基金项目16155项、地区科学基金项目2829项、海外及港澳学者合作研究基金项目136项、重点国际(地区)合作研究项目105项、国家重大科研仪器研制项目(自由申请)81项、部分联合基金项目(NSAF联合基金、天文联合基金和钢铁联合研究基金)130项,合计37207项。 围绕着“恶性肿瘤为什么会复发”这个难题,科学家们进行了大量的研究,结果发现:在肿瘤的特定区域内,秘密而顽固地散在着一小部分具有特殊生长能力的肿瘤细胞。它们是肿瘤发生、扩散、复发等过程中的“起始细胞”或“动力细胞”,即肿瘤干细胞。 这个概念学说其实形成由来已久,且渐渐成为了主导学说,但是针对其的靶向治疗却不见重大突破,直到2000年,美国FDA批准了针对CD33的抗体代表药物吉妥单抗......阅读全文

如何摸索慢病毒最佳MOI值?

MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

病毒包装技术7——腺相关病毒(AAV)包装介绍

  锐赛小课堂技术篇0702-113   摘要:   腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH

2019-nCov药物研发进展和策略

  一、2019-nCoV的简要回顾  目前的研究表明,新型肺炎是指由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的呼吸道疾病。因此,新型肺炎药物的研制离不开对2019-nCoV的认识。  2020年2月3日,上海公共卫生临床中心、复旦大学公共卫生学院张永振教授团队和中科院武汉病毒研究所石正丽教授团队分别

T7RNA聚合酶系统基因表达实验

两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统             实验方法原理

病毒免疫荧光实验

实验方法原理 实验材料 待检测病毒试剂、试剂盒 丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材 玻片实验步骤 1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

T7RNA聚合酶系统基因表达实验

实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因(「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染」)的重组质粒,通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞,在培养过程中,外源基因被高效的 T7 RNA

离心机用于腺病毒体外在293细胞中大量扩增

一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法zui终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗粒。如果要把病毒

50%终点法测定病毒滴度实验

实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后,接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞,将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线,找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动

潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JE..

潮汐反应器技术在以VERO细胞为载体生产日本脑炎病毒(JEV)疫苗领域的应用背景介绍 日本脑炎病毒(JEV)于1934年首次从一例致命的人类病例的大脑中分离出来。虽然有症状的日本脑炎很少见,但病死率可高达30%。在那些幸存下来的人当中,30-50%遭受永久性的智力、行为或神经问题。东南亚和西太平洋地

掌握了这些细节,师姐再也不用担心我养不好细胞啦~

很多小伙伴在养细胞的时候,总是会出现这样或那样的问题,很多时候,那是因为你没有注意以下的细节问题,现在我们一起来看看:细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热

正粘病毒培养和增殖

(1)培养〖HT5SS〗 甲型流感病毒虽能引起人和多种动物的疾病,但大多数毒株具有比较明显的宿主特异性。各型流感病毒都能在鸡胚内良好增殖。初代分离时最好应用羊膜腔接种法,但许多毒株也能适应于鸡胚尿囊腔,特别是已在羊膜腔内传代的毒株。丙型流感病毒只能在羊膜腔内增殖。多数流感病毒可在牛胚肾、

人晶状体上皮细胞培育的增殖及永生化

实验概要人晶状体上皮细胞原代的和永生化细胞培养是为了一个能够调查研究人类晶状体上皮生理及白内障的模型系统而建立的。人晶状体上皮细胞培养是靠分离来自进行早产儿视网膜病变治疗的婴儿晶状体上皮碎片,并且允许上皮细胞从外植体生长。通过使细胞培养感染腺病毒(Adl2-SV40)来达到细胞永生化。实验步骤1.

5月世界肝炎意识月,盘点肝炎研究进展

  肝炎是甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)或戊型肝炎病毒(HEV)感染导致的,其中以HBV和HCV感染最为严重,96%的肝炎死亡病例都是HBV和HCV感染导致的肝炎造成的。  据世界卫生组织统计,目前,全球有近2.4亿慢性乙型肝炎患者,每

流行病学-猪生殖和呼吸系统综合症病毒分析

7.流行病学美国1987年首先暴发PRRS,但后来用血清学方法证实1985和1986两年在美国收集的猪血清中就已经存在PRRSV的特异性抗体。1990年6月欧洲首次在德国发现该病流行,年末又在荷兰发现该病,两国的集约化猪场有近4000个猪群感染了PRRSV,并很快蔓延到其它欧洲国家。该病在北美和欧

外无细胞体系翻译病毒 mRNA

            实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶 肌

猪瘟病毒诊断

为了消灭猪瘟,需要快速而确实的诊断技术。流行病学、症状学和病理解剖学等方 面的资料,具有重要的参考价值,但确诊必须采取病料,进行病毒的分离鉴定或作抗体 测定。  疫情调查时,除需注意流行情况,还应了解是否已经进行免疫接种, 所用疫苗有无 残余毒力?非典型猪瘟在成年猪中大多表现为轻症疾病

病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备

实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养,森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞)培养,登革热病毒用白纹伊蚊

50%终点法测定病毒滴度实验

实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液仪器、耗材 细胞培养箱、细胞培养板实验步骤 1. 制备细胞 先制备好单层细胞培养物,在低倍显微镜下观察,挑选生长良好的细胞,按「传代细胞培养」法进行,将细胞单层洗涤、消化

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

腺病毒体外在293细胞中大量扩增的方法

在293 细胞中大量扩增腺病毒一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法最终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×101

正粘病毒遗传与变异

甲型流感病毒每个核苷酸在每个复制周期中的突变机率大约是15×10-5,与其它RNA病毒的突变率相似。但是,由于流感病毒的基因组分为8个或7个不相同的片段,在病毒增殖过程中很容易发生基因重排,因而使流感病毒的抗原性和致病性很容易发生变异。 (1)病毒变异的类型A.抗原性变异〓抗原性变异

HoloMonitor M4应用于登革病毒感染C6/36细胞的3D形态学

基于数字全息显微术的登革病毒感染C6/36细胞的3D形态学数字全息显微术是近年来开始应用于活细胞形态学研究的新技术。采用了数字全息技术与显微技术相结合方法,特异性测量细胞数目、细胞面积、厚度及体积等细胞形态学评估参数,提供空间、时间、高分辨率的三维形态学图像,经数据处理转化为细胞增殖、迁移、活性和细

3分钟了解新冠病毒检查哪些项目

  当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段,该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状(WHO已将其名为NCOVID19),疫情已在全国范围内肆虐超过20天,对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章,文章质量水平千差万别

病毒感染细胞实验

病毒感染细胞实验可以用于:(1)将目的基因整合到大多数真核细胞。(2)将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。实验方法原理病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质(RNA),但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒,其同时连有目的基因和报告基因,psPAX2为能表达慢病

分离病毒及构建假病毒在抗疫研究中的应用

新冠疫情已经在全球范围爆发,目前确诊感染人数已经超过190万,并且这一数值还在持续增长中。在疫情爆发初期,我国科研战线迅速行动,不到一周时间就确定了新冠病毒的全基因组序列并分离得到了病毒毒株,及时向全球共享。那么为什么分离病毒毒株这么重要呢?毒株分离的意义和难度病毒毒株的分离对于疫情的防控、抗病毒药

牛血清在细胞培养中的作用与质量要求

中国药品生物制品检定所 李德富研究员 生物技术已经被世界各国视为一种高技术,在整个科学技术中占据了特殊的显著地位,特别是生命科学的发展更离不生物技术,生命科学的发展备受各国的重视。我国在很多大学中都设立了生命科学院。现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技

长知识了!新冠病毒2019-nCoV实验室检测内容全都在这里

  当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段,该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状(WHO已将其名为NCOVID19),疫情已在全国范围内肆虐超过20天,对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章,文章质量水平千差万别

腺病毒系统使用指南(三)

腺相关病毒感染目的细胞预实验以2型AAV病毒为例,Vigenebio为您推荐的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T细胞得出的数据,不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前,进行预实验摸索最佳MOI值,推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒