人晶状体上皮细胞培育的增殖及永生化

实验概要人晶状体上皮细胞原代的和永生化细胞培养是为了一个能够调查研究人类晶状体上皮生理及白内障的模型系统而建立的。人晶状体上皮细胞培养是靠分离来自进行早产儿视网膜病变治疗的婴儿晶状体上皮碎片,并且允许上皮细胞从外植体生长。通过使细胞培养感染腺病毒(Adl2-SV40)来达到细胞永生化。实验步骤1. 原代培养人类晶状体是在24小时内获得的,来自5至12个月大的接受早产儿视网膜病变治疗的病人。在晶状体囊的后部切一小部分,用眼科镊夹持,切下的晶状体囊和相连的上皮放入一个60mm组织培养皿。这个上皮被切成2-3部分,每部分分装在单独的培养皿中,加入3mLDMEM培养基(含有20%胎牛血清以及50µg/ml庆大霉素)。在37°C, 5%CO2的培养箱中培养,每周换2次培养基介质。定期使用尼康血滴比色法相差显微镜检查,并且用35mm Nikon N2020 照相机拍摄。2. 病毒感染在原代培养完成融合后,细胞使用含EDTA的胰蛋......阅读全文

细胞培育根本技能

为了削减污染对细胞培育的影响,有必要树立细胞冻存库。细胞冻存库应该分主细胞库(Master cell bank,MC和作业细胞库(Working cell bank,WC,当需求做试验时从主细胞库中复苏细胞树立作业细胞库。每一个冻存标本都应明确记载细胞的性质、代数及有无污染。一起还应树立标

细胞培育的关键

一、万物的成长离不开水,细胞也是相同的,若要它成长,有必要要用新鲜的双蒸水,不含任何杂质和有离子等成分。    二、PBS(也可用BBS、如:Hanks D-Hanks液装备)-此产品主要用于免疫组化染色时安排或细胞的漂洗。Sciencell的DPBS(SicenCell No.0303)是一种无毒

细胞传代培育的办法

一、原理细胞在培育瓶长成细密单层后,已基本上饱满,为使细胞能持续生长,一起也将细胞数量扩展,就必须进行传代(再培育)。传代培育也是一种将细胞种保存下去的办法。一起也是使用培育细胞进行各种实验的必经进程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才干分瓶。二、材料和试剂1、细胞:贴壁细胞株2、试剂

浅谈原代细胞的培育办法

一:安排块培育法(1)依照前述办法取材,将安排剪成或切成1mm3巨细的小块,并参加少许培育基使安排湿润。(2)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块距离0.2 cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面积为17.5cm2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内参加适量培

细胞培育悬浮培养方法介绍

悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以了。深度超过5mm,需要搅动培养基,超过10cm,还需要深层通入CO2和空气,

日用鼠iPS细胞培育出角膜细胞

日本科学家成功用实验鼠的诱导多功能干细胞(iPS细胞)培育出了鼠角膜上皮细胞,这项成果将有助于解决为患者移植他人角膜后出现的排异反应问题。 据日本《读卖新闻》报道,日本庆应大学教授坪田一男等研究人员向实验鼠的iPS细胞内添加特殊的蛋白质等物质并加以培养,从而使iPS细胞分化成另一种细胞。 分化出

日开发高效培育肝脏细胞技术

  日本科学家开发出一种用胚胎干细胞高效培育肝脏细胞的技术,能够使90%的小鼠胚胎干细胞发育成肝脏细胞,效率相当于原有方法的约9倍。   这项技术是日本东京工业大学教授赤池敏宏率领的研究小组开发的,研究成果发表在最新一期《生物材料》杂志上。新技术的关键是利用特殊的培养基,使胚

从新视角审视细胞培育技术

  新近研发的细胞培养基允许使用血清移液器进行操作,在安全工作台上同样可以使用,细胞培养基瓶偏平的侧面保证瓶身能够稳定站立并使其操作简单。    图1 新型培养瓶能够稳定站立——站立或倾斜45度   微风沙沙作响,轻轻拂过实验室安全工作台。试验助理正利用长吸管吸取细胞培养液

细胞培育的一般过程

一、细胞准备工作 准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培育基与其他试剂的制造、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培育箱及其他仪器的检查与调试等。 二、选材 在无菌环境下从机体取出某种安排细胞,通过必定的处理后接入培育器血中,这一进程称为选材。理论上讲各种动物和人体内的所有安排都可以用于培

神经干细胞的培育流程!!

一、  神经干细胞的定向诱导分解将一部分次代神经球机械别离制成单细胞悬液后别离参与条件培育液和有血清培育基(含10%胎牛血清的DMEM/F12)中对照贴壁培育,7d后均行ChAT免疫细胞化学染色。二、BrdU符号将BrdU溶于无血清培育基,过滤除菌后参与神经球构成后再次机械别离克隆制作的单细胞悬液中

细胞培育的一般进程

一、细胞准备工作 准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培育基与其他试剂的制造、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培育箱及其他仪器的检查与调试等。 二、选材 在无菌环境下从机体取出某种安排细胞,通过必定的处理后接入培育器血中,这一进程称为选材。理论上讲各种动物和人体内的所有安排都可以用于培

干细胞培育卵子精子前体细胞获成功

科学家希望有朝一日来自男性的皮肤细胞能够生成精子细胞,从而治疗不孕不育症。图片来源:南伊利诺伊大学  本报讯 以色列与英国研究人员利用人体皮肤细胞在实验室中培育出人类精子与卵子的前体细胞。尽管面临着大量争议和监管障碍,这一成就依然向着治疗不孕不育症迈出了重要一步。  这项试验利用诱导多能干(iPS)

干细胞培育卵子精子前体细胞获成功

  以色列与英国研究人员利用人体皮肤细胞在实验室中培育出人类精子与卵子的前体细胞。尽管面临着大量争议和监管障碍,这一成就依然向着治疗不孕不育症迈出了重要一步。  这项试验利用诱导多能干(iPS)细胞——能够分化成几乎所有细胞类型的一种再编程细胞——在小鼠体内培育出精子和卵子,这些生殖细胞随后通过体外

日本培育出人类胎盘干细胞

  日本研究人员在新一期美国《细胞-干细胞》杂志上报告说,日本研究人员发明了利用人类胎盘细胞培养胎盘干细胞的技术,这有助于研究胎盘的形成、功能以及胎盘异常相关疾病,还有望用于生殖医疗及再生医疗。图片来源于网络  胎盘是向胎儿提供营养和氧气的重要器官,胎盘干细胞具有自我复制和分化为胎盘细胞的能力。虽然

培育细胞遗传学的检测技能

   细胞培育是体外研讨细胞生物学性状、遗传学及分子生物学特性zui直接有效的手法。培育细胞遗传学的主要检测技能,包含性染色体的检测、染色体闪现、染色体显带及染色体基因定位等。对培育细胞的分子生物学检测主要包含细胞DNA检测、RNA检测及蛋白质的检测,而相关的生物学检测主要包含细胞酶学检测及细胞凋亡

新型塑料表面能高效培育干细胞

  据英国广播公司(BBC)网站7月17日报道,英国科学家研制出了一种新的塑料表面,其能更好地培育出更多的成人干细胞。科学家有望据此设计出更好的干细胞疗法来让骨头和组织再生以及治疗关节炎等病症。最新研究发表在《自然·材料学》杂志上。   这种最新的“纳米图形化”表面使用制造蓝光光盘的

肝病患者皮肤细胞培育出肝脏细胞

  英国剑桥大学8月25日发布公报说,该校研究人员成功利用肝病患者的皮肤细胞培育出肝脏细胞,这样得到的肝脏细胞与病人肝脏中的细胞高度相似,将有助于对特定肝病患者进行研究并开展治疗。  公报说,研究人员从7名有遗传性肝脏疾病的患者身上提取了皮肤细胞,先将其改变为诱导多功能干细胞,然后培

新型干细胞有培育胚胎内外组织潜能

  国际著名学术期刊《细胞》日前在线发表了北京大学邓宏魁研究组关于多能干细胞的突破性研究成果:他们在国际上首次建立了具有全能性特征的多能干细胞系,获得的细胞同时具有胚内和胚外组织发育潜能。  多能干细胞最重要的功能特性是能嵌合进入早期胚胎中,并参与胚胎各个细胞谱系的发育,但其发育潜能仅限于胚胎内组织

皮肤干细胞培育出人类“迷你”心脏

  美国科学家对从人体皮肤提取的多能干细胞进行遗传重组,培育出了一颗拥有人的心脏细胞的微心室。这颗“小心脏”能像完整大小的心脏那样跳动。研究人员表示,这种“迷你”器官可替代动物实验,筛查新药或测试药物对婴儿的影响,而且还将帮助科学家们揭示更多人体心脏形成和发育的秘密。   该研究的合作者、加

培育单倍体干细胞-找寻生命树成长“钥匙”

   胎盘是维持胎儿生命的重要器官,被誉为“生命树”。日前,南开大学药物化学生物学国家重点实验室帅领研究团队利用可诱导过表达转录因子CDX2的方式在体外获得单倍体滋养层干细胞,该新型单倍体干细胞只有一套基因组,可在体外无限增殖并具备分化成为胎盘谱系各种细胞的潜能。因此该研究犹如找到了生命树成长发育的

新型干细胞有培育胚胎内外组织潜能

  国际著名学术期刊《细胞》日前在线发表了北京大学邓宏魁研究组关于多能干细胞的突破性研究成果:他们在国际上首次建立了具有全能性特征的多能干细胞系,获得的细胞同时具有胚内和胚外组织发育潜能。  多能干细胞最重要的功能特性是能嵌合进入早期胚胎中,并参与胚胎各个细胞谱系的发育,但其发育潜能仅限于胚胎内组织

阻碍iPS干细胞培育的“坏”基因现身

  京都大学iPS细胞研究所2日发表的一份公报称,该机构研究人员发现数个会阻碍“诱导多功能干细胞”(iPS细胞)培育成功的基因。这一发现有望更高效地培育iPS细胞。   iPS细胞是指体细胞经过基因“重新编排”,回归胚胎干细胞的状态,从而具有类似胚胎干细胞的分化能力。在培育iPS细胞的过程中,需向

干细胞培育毛囊技术有望治疗秃头症

  日本研究人员在新一期英国《自然·通信》杂志上发表报告说,他们利用成年实验鼠干细胞和人类干细胞分别培育出毛囊,并移植到没毛发的实验鼠皮肤上,都成功让它长出毛发,未来有望将这一技术用于治疗秃头症。   东京理科大学教授辻孝领导的研究小组从实验鼠皮肤上获取了两种干细胞,并在实验室中将它们培育成毛囊

日本将用不易排异血液培育干细胞

  日本京都大学iPS细胞(诱导多功能干细胞)研究所和日本红十字会12月26日达成合作意向,在献血者中寻找不易产生排异反应的血型,并利用其血液细胞培育iPS细胞,日后再使其分化、发育成特定细胞或组织。   京都大学iPS细胞研究所由今年获得诺贝尔生理学或医学奖的日本科学家山中伸弥领导,该研究所有一

日本利用皮肤细胞直接培育出软骨细胞

  日本研究人员17日报告说,他们向人类皮肤细胞植入三种基因,不经诱导多功能干细胞(iPS细胞)阶段就培育出具有软骨细胞特征的细胞。利用这种基因直接重组的方法人工培育出的软骨细胞或可应用于治疗因疾病和受伤而变性的软骨组织。   iPS细胞是指体细胞经过基因“重新编排”,回归胚胎干细胞的状态,从而具

荷兰研究从动物身上提取干细胞培育成肌肉细胞

  6月26日报道,荷兰科学家近日宣布,全球第一个“试管汉堡”即将在一年内问世。   这种汉堡所取用的汉堡肉,不需要通过屠宰动物获得,而是在实验室里“培养”出来的。科学家们正在进行的这项研究,是通过从牛身上提取的10000个干细胞,在实验室里以人工培育的方法使其不断分裂增殖超过10

干细胞培育出携氧红细胞-“人工造血”有望实现

  日本研究人员成功利用干细胞培育出能够携带氧的红细胞,在此基础上有望大量培育用于输血的红细胞,帮助医疗系统缓解用血紧张状况。   哺乳动物的红细胞没有细胞核,不能自我复制,这让严重贫血患者目前只能通过输血进行治疗。对红细胞进行实验室大规模培育,在日本一直是受重视的课题。   虽然成熟的红细胞不

瑞典成功实施自体干细胞培育的气管移植

  瑞典卡罗林斯卡医学院7月7日宣布,一个国际医学专家小组首次用患者自体干细胞培育的气管组织成功为患者实施移植。卡罗林斯卡医学院发表声明说,接受移植手术的是一名36岁男性患者,其气管癌已到晚期,尽管已接受化疗,但肿瘤仍在增大,几乎完全堵塞气管。由于没有合适的移植配型,只能利用患者自身干细胞培育移植所

日本培育出用于脏器细胞移植的小猪

  日本明治大学等机构的研究小组最近培育出可用于脏器和细胞移植的小猪,将于明年初向有关机构提供这种小猪以开展移植临床研究。图片来源于网络  日本《读卖新闻》5日报道,根据日本政府2016年修订的为人类移植动物脏器和细胞的“异种移植”有关规定,明治大学和京都府立大学等机构的一个研究小组首次培育出用于“

研究利用干细胞培育出结肠“类器官”

图片来源:James M. Well 等  近日,美国科学家利用干细胞在实验室中培育出人类结肠“类器官”(HCO)。研究人员表示,分化自人类多能干细胞的胃部和小肠类器官,有望带来肠胃发育和疾病研究革命。相关成果刊登于《细胞—干细胞》期刊。  “类器官”是用干细胞在实验室里培育出的多细胞结构,虽然不是