蛋白质测量溯源新途径基于同位素的无机质谱联用技术
随着蛋白质组学研究的深入，人们已不仅仅满足定性分析蛋白质组，而进一步要求更加准确地定量描述蛋白质组。目前，蛋白质定量在临床检验、生物医药等重要领域起着关键作用，对于肿瘤标志物测定、临床疾病的诊断和治疗，蛋白质和多肽药物的质量检验等具有重要意义。准确的对蛋白质进行定量是定量蛋白组学的最终目标，在蛋白质测量分析研究中，对蛋白质定量结果的准确性、可比性和溯源性也提出了越来越高的要求。 无机质谱，也能开展蛋白质测量？ 与生物质谱不同的是，电感耦合等离子质谱（ICP-MS）的离子源工作在约7000K 高温条件，进入ICP 蛋白质分子的化学键很容易被打开而成为原子，之后原子被电离为一价离子进入质谱仪。所以，在ICP-MS 不但可以分析元素周期表中的几乎所有元素，而且这种元素的特征响应（Element-specific response）与其原子所处的分子环境无关。这意味着在ICP-MS 中，如果定量蛋白......阅读全文
定量蛋白质组学方法分类
1 背景和意义从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律（特别是疾病防治和病理研究）已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究，识别功能模块和路径，监控疾病的生物标志物，这些研究都
定量蛋白质斑点印迹实验
试剂、试剂盒 鼠抗-σ32 单克隆抗体 辣根过氧化酶共价标记的羊抗鼠免疫球蛋白 G ECLTM#1 和#2 试剂 十二烷基肌氨酸钠 Tris-缓冲盐溶液
蛋白质检测和定量方法
蛋白质定量方法最早出现在20世纪50年代早期，当时物理学家和化学家进入生物学领域，并将他们的技术应用于蛋白质的分析和测量。 Lowry蛋白质分析是第一个确定溶液中蛋白质总水平的生化分析。不久之后，该测定通过其他测量方法引入，包括紫外（UV）系统和氨基酸分析。所有这些方法都能够表征水中的蛋白质或非
定量蛋白质斑点印迹实验
试剂、试剂盒 鼠抗-σ32 单克隆抗体辣根过氧化酶共价标记的羊抗鼠免疫球蛋白 GECLTM#1 和#2 试剂十二烷基肌氨酸钠Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 硝酸纤维素膜斑点印迹装置ECLTMHYPERFILM或柯达 X 光底片缓冲液 A实验步骤 材料与设备样品，由各步纯化操作所得硝酸纤维素膜 (0.
蛋白质定量检测方法——BCA法
BCA（Bicinchoninc acid procedure，4,4’-二羧-2,2’-二喹啉）法与Lowry法相似，主要差别在碱性溶液中，蛋白质使Cu2+转变Cu+后，进一步以BCA 取代Folin试剂与Cu+结合产生深紫色，在波长562 nm有强的吸收。 它的优点在于碱性溶液中B
蛋白质定量实验_胺衍生法
试剂、试剂盒OPA 储存液实验步骤1.于分析前至少 30 min 将 15uL 2-巯基乙醇加人到 5 mL OPA 储存液中, 这一试剂可稳定维持一天。所有荧光样品和相关反应在所有时间内都需要避光。2.蛋白质标准品 (0.2~10 ug/mL) 和未知浓度的待测样品在分析前需要调节 pH 至 8.
比色法蛋白质定量介绍
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。比色方法一般有 BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。Lowry 法：以最早期的 B
福林酚法定量测定蛋白质
实验概要本实验用福林酚法(Folin—酚试剂法)测定了蛋白质的含量。实验原理Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏
蛋白质定量/蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法)
实验概要运用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595
蛋白质和氨基酸的代谢试验
1.吲哚（靛基质）试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。2.硫化氢试验 主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。如沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。沙门菌属中也有硫化氢阴性菌种。3.尿素分解试验 主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。奇异
构成蛋白质的氨基酸的条件
构成蛋白质的氨基酸均为a-氨基酸,就是氨基必须直接和中心碳原子（手性碳原子）相连.这种氨基酸均为天然氨基酸,为20种左右.
蛋白质和氨基酸什么区别
蛋白质是由氨基酸组成的大分子有机化合物，而氨基酸是构成蛋白质的基本单元。 蛋白质是由许多氨基酸通过肽键连接而成的长链状分子，每个氨基酸都由一个氨基（-NH2）和一个羧基（-COOH）组成，并且都有一个特定的侧链。蛋白质在生物体内具有多种功能，如构成细胞和组织、调节代谢、传递信号等。 氨基酸是
构成蛋白质氨基酸有哪些类型
甘氨酸 (Glycine, Gly)：是分子量最小的氨基酸，因其侧链仅为一个氢原子，从而使得其在蛋白质结构中具有极大的灵活性。 丙氨酸 (Alanine, Ala)：具有较小的疏水性侧链，使其能够在蛋白质内部稳定存在。 缬氨酸 (Valine, Val)：是一个分支链氨基酸，其较大的疏水性侧
蛋白质是由氨基酸组成的，那么吃氨基酸片和蛋白质粉有什么差别？
在人体内起的作用都一样，主要是吸收速度不一样。通常情况下，蛋白质需用2－4小时才能被消化。但如果将蛋白质分裂为短肽（微肽由2－3个氨基酸构成）和单个的自由氨基酸 ，则在30－60分钟内就能被人体吸收。因此，氨基酸非常容易被人体消化吸收，这也是氨基酸的最大优势。
蛋白质定量实验_考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法
实验方法原理蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基，其化学结构中的共轭双键，具有吸收紫外光的特性，吸收高峰在280 nm处，蛋白质溶液的吸光度(A280)与蛋白质含量成正比关系，可作为样品中蛋白质定量测定。该方法简便、灵敏、快速，且样品用量少且可回收，低浓度的盐类也不干扰测定，但测定
蛋白质定量检测方法——酚试剂法
取6支试管分别标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。优点：灵敏度高，对水溶性蛋白质含量的测定很有效。缺点：①费时，要精确控制操作时间；
蛋白质定量检测方法——紫外吸收法
大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号，前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，1号试管不加标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，而不加标准蛋白溶液，每支试管液体总
定量蛋白质组学方法分类介绍
【蛋白研究系列专题】-4丨定量蛋白质组学方法，您值得拥有 1 背景和意义 从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律（特别是疾病防治和病理研究）已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下
蛋白质定量分析（Protein－determination）
Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 （CBG） 可与蛋白质结合而变色的特性来定量 （Bradford, 1976）；若试样中的蛋白质量较多，则结合到蛋白质而变色的CBG 也多，因而呈色较深。下例是以一组
定量蛋白质组学的研究内容
1.蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。 2.翻译后修饰：很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化，糖基化，酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式，因此对蛋白质翻译后修饰的研究对
蛋白质定量分析(Protein－determination)
实验概要本文介绍了蛋白质定量分析(Protein determination) Bradford 的dye-binding method的原理、样品配制及操作步骤等。实验原理Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250
蛋白质的直接定量（UV法）简述
这种方法是在280 nm波长，直接测试蛋白。选择 Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除 320 nm的“背景”信息，设定此功能“开”。与
蛋白质－氨基酸分解产物试验的简介
蛋白质、氨基酸分解产物试验是对细菌的新陈代谢产物进行分析并对细菌代谢特点进行分类。菌的代谢通路包括合成与分解两大类。细菌的合成代谢与真核细菌类似，但其分解代谢因细菌酶系统的不同，差异甚大。分解代谢可伴有ATP及其他形式能量的产生。
蛋白质、氨基酸分解产物试验检查作用
蛋白质、氨基酸分解产物试验是对细菌的新陈代谢产物进行分析并对细菌代谢特点进行分类。蛋白质、氨基酸分解产物试验对于有头痛、恶心、呕吐症状不减，颈强直、嗜睡并伴有脑膜刺激征等乙型副伤寒杆菌症状表现的病人意义重大。
蛋白质分子中氨基酸的连接方式
在蛋白质分子中，氨基酸之间是以肽键(peptide bond)相连的。肽键就是一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合形成的键。 氨基酸之间通过肽键联结起来的化合物称为肽(peptide)。两个氨基酸形成的肽叫二肽，三个氨基酸形成的肽叫三肽……，十个氨基酸形成的肽叫十肽，一般将十
基于氨基酸组成的蛋白质预测软件
根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质，也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序：http://www.expasy.ch/tools/AACompIdent：与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同，AACompIdent工具利用未
卵黄蛋白质和氨基酸的利用
卵黄蛋白质来自VtgA，完全分裂产生氨基酸。这种模式是通过分析斑马鱼胚胎和成鱼组织及鲚鱼胚胎中ctlsa、 ctlsb及ctlsc基因表达得以识别。在鳞鱼中，组织蛋白酶原L（Ctsl）异构体最可能涉及卵黄蛋白质水解。天冬氨酸蛋白酶组织蛋白酶D（Csd）的活动似乎通常涉及脊椎动物卵黄蛋白质的降解，尤其
卵黄蛋白质和氨基酸的利用
卵黄蛋白质来自VtgA，完全分裂产生氨基酸。这种模式是通过分析斑马鱼胚胎和成鱼组织及鲚鱼胚胎中ctlsa、 ctlsb及ctlsc基因表达得以识别。在鳞鱼中，组织蛋白酶原L（Ctsl）异构体最可能涉及卵黄蛋白质水解。天冬氨酸蛋白酶组织蛋白酶D（Csd）的活动似乎通常涉及脊椎动物卵黄蛋白质的降解，尤其
氨基酸与蛋白质是什么关系？
氨基酸和蛋白质之间存在着基本的构成与功能关系。 氨基酸是蛋白质的基本构成单元。蛋白质是由20种标准氨基酸通过肽键连接而形成的高分子链状结构。每个氨基酸分子包含一个中心的碳原子，附着着一个氢原子、一个氨基（-NH2）、一个羧基（-COOH）和一个特定的侧链（R基）。不同的氨基酸具有不同的R基，这
方案9－蛋白质的同位素亲和标签实验
实验材料透析或沉淀处理蛋白样品试剂、试剂盒DTTEDTAICAT 试剂三丁基膦Tris胰酶实验步骤第一阶段 ICAT 标记蛋白第二阶段 阳离子交换清洗 ICAT 样品第四阶段 ICAT 标记多肽的质谱分析展开