加拿大开发出DNA条形码融合技术实验效率可提高10倍

据最新一期《分子系统生物学》报道,加拿大研究人员开发出一种新技术,可将DNA(脱氧核糖核酸)条形码拼接在单个细胞内,以同时搜索数以百万计蛋白质对之间的相互作用。 近年来,DNA条形码技术使科学家开展高并行试验(许多不同类型的细胞在同一试管内进行试验)成为可能,而新一代DNA测序技术的发展,进一步提高了对条形码计数和读取结果的效率。 然而,可在同一试管内进行的试验次数,却受限于编码的细胞类型数量。一直以来,DNA条形码都是一维的,也就是一个条形码只能做一次试验。允许条形码在细胞内融合在一起,意味着科学家们现在可以打破这一障碍。新技术可显著提高在单一试管内进行的实验次数,在同等成本条件下能将效率提高10倍。 在广泛使用的酵母双杂交(Y2H)方法中,携带一个“诱饵”蛋白的酵母细胞与携带一个“猎物”蛋白的酵母细胞配对。对Y2H系统进行操纵后,只有“诱饵”与“猎物”蛋白黏在一起的细胞才能存活,从而使科学家可以观察到哪些蛋白间互相......阅读全文

单个细胞级别的粘附力测定(一)

单细粘附力的测定一直以来都缺乏一种能够在不改变细胞性质的同时测量细胞整体粘附力的设备。现如今FluidFM 技术的出现改变了这一状况。高精密的流体力探针能够在精准感知压力的同时通过内压而非蛋白结合的方式在不改变细胞性质的同时牢固的抓取细胞,为单细胞粘附力测定提供新的可能。当今,机械生物学是一个新

单个细胞级别的粘附力测定(二)

FluidFM 测定细胞粘附力的应用随着时间推移,越来越多的学者开始使用FluidFM 技术进行测定细胞粘附力。以下就近五年的具有代表性的应用进行总结。Cohen 等使用FluidFM 技术对MCF7-MCF10A、MCF7-HS5 的细胞粘附力进行了测定,并与以往的文献进行对比,发现其数据与Hos

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验

外周血单个核细胞分离的操作步骤

1、取外周静脉血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混匀。2、将分层液加入试管中,用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。3、置于水平离心机离心,1500r/min,10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面,呈白膜状。4、用尖吸管吸取界面的细胞层,置于另一试管中

脾脏单个核细胞悬液如何制备

(1)大鼠断颈处死后,无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不锈钢筛于平皿中,脾脏置于筛网中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏,使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中, D-hanks冲洗一次;(3

活细胞提取及应用——单个细胞级别的活细胞提取

由于细胞异质性的存在,单细胞层面的分析就变得十分重要。目前对于单细胞分析的方法主要还是通过化学、生物学的方法进行裂解后,提取内容物进行分析,然而这种方法往往会对样本造成一些损伤。直接提取活细胞具有诸多优点,但是操作苦难。如今一种全新使用FluidFM科技的技术新报道有望提供一种活细胞提取新型的简易方

-利用荧光DNA探测分子-单个碱基突变也能被发现

  DNA序列中最轻微的变异也会影响深远,无论对研究还是医学应用,可靠识别这些序列都非常重要。据物理学家组织网近日报道,美国华盛顿大学和莱斯大学研究人员合作,开发出一种荧光DNA探测分子,能检查出一段目标DNA链中单个碱基的变化。而这些微小突变可能是造成某些疾病的根源,或耐抗生素细菌的原因。这一成果

加拿大开发出DNA条形码融合技术提高人类对疾病认知度

  据最新一期《分子系统生物学》报道,加拿大研究人员开发出一种新技术,可将DNA(脱氧核糖核酸)条形码拼接在单个细胞内,以同时搜索数以百万计蛋白质对之间的相互作用。  近年来,DNA条形码技术使科学家开展高并行试验(许多不同类型的细胞在同一试管内进行试验)成为可能,而新一代DNA测序技术的发展,进一

名校学者:单个癌细胞生成5个子细胞

  来自加州大学洛杉矶分校 Henry Samueli工程学院的研究人员发表了题为“Increased Asymmetric and Multi-Daughter Cell Division in Mechanically Confined Microenvironments”的文章,研发了

外周血单个核细胞(PBMC)中,是否包含有B细胞

PBMC中主要包含单核细胞和淋巴细胞,淋巴细胞中包含T和B细胞。

如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞?

 淋巴细胞分离液可用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞,适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞,在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。  如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞?  1)分离外周血中的单个核细胞  1.抽取正常人静脉血加

加拿大开发出DNA条形码融合技术-实验效率可提高10倍

  据最新一期《分子系统生物学》报道,加拿大研究人员开发出一种新技术,可将DNA(脱氧核糖核酸)条形码拼接在单个细胞内,以同时搜索数以百万计蛋白质对之间的相互作用。  近年来,DNA条形码技术使科学家开展高并行试验(许多不同类型的细胞在同一试管内进行试验)成为可能,而新一代DNA测序技术的发展,进一

华南植物园鼎湖山植物DNA条形码研究获进展

  日前,中科院华南植物园研究人员在鼎湖山木本植物DNA条形码研究方面取得重要进展。相关结果在线发表于《多样性及其分布》上。  DNA条形码技术是一种利用标准的简短基因片段来实现物种快速识别的工具。动物界,线粒体COI基因应用非常成功。但是在植物界,由于进化历史复杂,标准条形码还没有达成共识。  针

第四届国际DNA条形码大会在澳大利亚召开

  11月28日至12月3日,第四届国际DNA条形码大会在澳大利亚阿德莱德召开,来自全球61个国家和地区的479位代表参加了本次会议。本次会议由生命条码联盟(CBOL,即the Consortium for the Barcode of Life)和澳大利亚阿德莱德大学共同主办。本届会议我国

植物DNA条形码研究项目2010年度会议在昆明召开

  会 场  中国科学院大科学装置开放研究项目—依托种质资源库的植物DNA条形码研究年度进展会议于8月12日至13日在中国科学院昆明植物研究所召开,其间还举办了第二期“植物DNA条形码技术培训班”。来自中科院昆明植物研究所、中科院植物研究所、中科院华南植物园、中科院武汉植物园、中科院

科学家在种子植物DNA条形码研究方面取得重要进展

  DNA条形码(DNA Barcoding)是利用标准基因片段对物种进行快速和准确鉴定的新技术。加拿大科学家Paul Hebert等于2003年提出这一概念后,DNA条形码已成为生物学领域发展最迅速的学科前沿之一。线粒体细胞色素C氧化酶基因CO1由于其引物通用性高、长度合适、进化速

纳米温度计可测量单个细胞温度

  据美国每日科学网8月29日(北京时间)报道,美国科学家日前开发出了一种能测量人体单个细胞温度的纳米温度计,并首次证实细胞内部温度并不像整个机体那样遵循平均37℃的标准,不同细胞个体在温度上往往存在显著差异。对这一差异的研究将有助于开发出预防和治疗疾病的新方法。   该研究由普林斯

PNAS突破:单个细胞核转录组测序

  研究人员成功地从单个脑细胞细胞核中分离出全部的信使RNA并对其进行了测序。这项发表在《美国科学院院刊》(PNAS)上的新研究,将帮助研究人员更好地了解一些器官在健康和疾病状态下的功能机制,为开发出个体化治疗提供了又一块跳板。   动物和植物中的大多数细胞都包含有一个细胞核,里面储存着细胞的DN

Science公布单个循环肿瘤细胞RNA测序结果

  由麻省总医院,哈佛大学主持的一项最新研究发现了前列腺癌细胞对一种常见的癌症治疗方法产生抗性的原因,研究人员完成了前列腺癌单个循环肿瘤细胞的RNA测序,其中找到了非经典Wnt信号所起的关键作用。  这一研究成果公布在9月18日的Science杂志上。  Androgendeprivationthe

人单个核细胞分离液使用注意细节

人单个核细胞分离液1.077是一种用于分离人外周血单个核细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。外周血中单个核细胞(PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和粒细胞密度较大,1.090g/mL 左右,淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090g/mL,血小板

外周血单个核细胞分离实验的操作步骤

  1、取外周静脉血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混匀。  2、将分层液加入试管中,用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。  3、置于水平离心机离心,1500r/min,10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面,呈白膜状。  4、用尖吸管吸取界面的细胞层

单个DNA分子的凝聚动力学研究中获得新成果

  无论是在病毒还是在细胞中,DNA皆以紧密压缩的结构存在。比如,在真核细胞中,DNA缠绕在组蛋白周围形成核小体,并进一步凝聚成大家熟知的染色体结构。在哺乳动物精子中,DNA凝聚成更致密的面包圈状(toroid)结构。了解DNA这些紧密排列的结构,并分析它们形成的动力学过程,对认识DNA复制甚至繁殖

通过序列杂交和条形码进行单细胞原位分析

  现代系统生物学有两种革新技术:基因组学和单细胞生物学,前者具备同时监测生物体中所有基因和蛋白质的能力,后者则可以在自然微环境中跟踪单细胞的一些特定基因。  两种技术都很强大,但具有互补的局限性:基因组学平均了一个细胞群的异质性和空间复杂性,而单细胞技术一次只能探测几个基因。因此,将基因组学与单细

2008中国真菌DNA条形码系统建设研讨会召开

一场给所有物种派发“身份证”的分类学革命 在超市的收银台前排队等候结账是一件无聊的事情,但如果没有条形码,你可能会感到更加无聊。现在,几乎所有超市的商品上都印有不同的条形码。利用光学识别系统,可以很容易地把保存在这种条纹图案上的信息阅读出来,加快顾客结账的速度。不久的将来,生命科学家会给每种生物派

纳米孔测序!耗资1.8亿美元的DNA“条形码”旨在发现新物种

  几百年以来,生物学家都在以一种极其缓慢的速度探索新物种,描述其定义特征。如今,伴随着新一代测序技术的突破,生物学家已经可以在几个小时内确定一份样本是否为新物种,并且这一成本将有望降至几美分。这是一场由短链DNA驱动的科技革命,这段DNA我们称之为DNA“条形码(barcode)”。它们的多样性足

DNA条形码技术确定物种身份:擦亮物种鉴别的“火眼金睛”

  黑白纹相间的条形码大家都非常熟悉。在超市收银台前,收银员用扫描仪一扫商品条形码,无论您买了口香糖或啤酒,一扫便知。但是,您听说过DNA条形码么?  14年前,科学家研发出了生物的条形码,同样用于身份识别,只不过,这个条形码存在于动植物的DNA中。中国生命条形码南方中心副主任王文智介绍,DNA条形

我国构建近海生物DNA条形码数据库-满足科研需求

  科技部18日透露,通过科技基础性工作专项部署了“我国近海海洋生物DNA条形码资源库构建”重点项目,具体由中国科学院海洋研究所承担。根据不同类群的特点,项目将选择有代表性的重要海洋生物类群,如原核生物、植物、浮游动物、大型底栖无脊椎动物及鱼类等,在准确形态鉴定的基础上,系统并规模化地获取

美国最新研制针尖粗细内窥镜可勘测单个细胞

  据国外媒体报道,内窥镜从根本上改变了医学治疗,医生能够使用一个微型相机附在线绳粗细的连线末端,无需做大手术便能窥探患者身体内脏器官。目前,美国斯坦福大学研究人员最新研制一款新型内窥镜,是迄今世界上直径最细的内窥镜,甚至能够探测到患者体内的单个细胞。   据国外媒体报道,内窥镜从根本上改变了医学

外周血单个核细胞的分离如何进行呢

  外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重介于1.075~1.090之间,红细胞及粒细胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之间,因而可利用一种比重介于1.075~1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。  对分离介质的基本要求

《自然》:利用单个干细胞成功造出前列腺

它将有助于科学家研究前列腺癌是否起源于干细胞出错  美国科学家近日利用单个干细胞,建造了小鼠完整的前列腺。这是继2006年科学家在小鼠中利用乳腺干细胞制造出乳腺后,第二次成功地利用单个干细胞制造出完整器官。这一成果代表了干细胞研究和人们对于前列腺发育理解的巨大进步。相关论文10月22日在线发表于