Nature遗传学:四链DNA是一种新调控?
DNA通常是螺旋梯一样的双螺旋,这种结构是最具代表性的生物学图标之一。实际上DNA还有一种独特的形态,那就是缠结在一起的四链体结构。在体外实验中,富含鸟嘌呤的DNA链很容易形成四链体。人们发现,这种四链体结构的确也存在于人类活细胞,可能具有重要的生物学功能。 2013年剑桥大学的研究团队在Nature Chemistry杂志上发表文章,通过有力证据首次证明G四链体结构的确存在于人体活细胞中。研究人员设计了一种特殊抗体,该抗体能够特异性的结合G四链体结构,但不能与双链DNA螺旋结合。他们将这种抗体与人类细胞在体外共同孵育,发现抗体结合在染色体上的多个不同位点。 现在这个团队又取得了新的突破。他们在Nature Genetics杂志上发表文章指出,G四链体往往位于基因(尤其是癌基因)的调控区域,可能在基因的启动和关闭中起重要作用。这些信息为癌症的诊断和治疗带来了新启示,有助于开发靶向性的新疗法。 “G四链体过去经常与癌症联......阅读全文
G显带染色体的识别
G显带核型分析已成为临床常规应用的染色体病诊断的手段。在进行G显带核型描述时,“深带”表示被 Giemsa 着色的带纹,“浅带”表示不着色或基本不着色的带纹。“浓”、“淡”表示深带着色的强度。
染色体-G-显带核型分析
核型分析简介染色体是细胞分裂期高度凝集的 DNA 蛋白质纤维,是间期染色质结构紧密盘绕折叠的结果。核型是指一个体细胞内的全部染色体按其大小、形态特征排列起来构成的图像。将待检细胞进行染色体数目、形态结构分析,确定其核型是否与正常核型一致,称为核型分析。染色体核型分析,是遗传学科学研究和辅助临
G带染色体的识别特征
G带染色体的主要识别特征1号染色体: 1号染色体着丝粒和次缢痕染色深: • 短臂:近侧段和中段各有一条深带,其中段深带稍宽,在处理较好的标本上,远侧段可显出2-3条淡染的深带。此臂分为3个区,近侧的深带为2区1号带,中段深带为3区1号带。 • 长臂:次溢痕紧贴着丝粒,染色浓。其远侧
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的正常值
Farr法结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法阴性。 斑点免疫结合试验小于1:40(阴性)。 (注具体参考值请根据各实验室而定。)
抗双链DNA抗体(aniDNA)的正常值
Farr法结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法阴性。 斑点免疫结合试验小于1:40(阴性)。 (注具体参考值请根据各实验室而定。)
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的注意事项
检查时要求:一般认为抗双链DNA的效价与病情相平行,即病情活动时,抗DNA抗体效价升高,病情缓解时,效价降低。由于各地测定的方法不同,所以正常值也不同,一般来说,结合率要大于20%以上才有临床意义。 检测技术的特异性都不是100%的。例如,绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA,但可能含少量组蛋白
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA
首先:可以通过分光光度计A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚
什么是抗双链DNA抗体测定
抗双链DNA抗体测定是对抗双链DNA抗体的测定。抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体,是抗核抗体的一种类型,几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为,它在红斑狼疮的发病中起一定的作用,在一些病人中,DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上,如肾脏、肺和脑组织,与血液中
分子遗传学词汇双链DNA
中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定 义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
抗双链DNA抗体参考值
健康人血清1:10稀释为阴性(绿蝇短膜虫法)。 健康人结合率≤20%(放射免疫分析法Farr试验)。 一般以待测血清A值/阴性对照A值(P/N)≥2.1为阳性,正常人P/N值<2.1(ELISA法)。 正常人为阴性(NC膜上不出现着色点)(滴金免疫渗滤试验)。
英国研究利用DNA链重建细胞“骨架”
英国伦敦大学学院领导的一项研究使用DNA链人工重建了构成细胞“骨架”的微小管和线状结构,这些结构赋予了细胞形状并支撑其功能实现。研究结果发表在《自然通讯》(Nature Communications)杂志上。 细胞“骨架”由蛋白质构成,可为细胞提供结构支持、帮助细胞移动以及在细胞内运输物质等。
单链DNA文库的SELEX筛选实验
单链DNA文库的SELEX筛选实验可用于:(1)体外诊断;(2)体内治疗等。实验方法原理SELEX 技术除了可以使用 RNA 文库以外,还可以使用单链 DNA 文库进行筛选。单链 DNA 形成高级结构的丰富性也足够用于对许多靶分子的筛选,而且 DNA 文库具有更好的稳定性,操作也相对简便。实验材料3
分子遗传学词汇单链DNA
中文名称:单链DNA外文名称:single-stranded DNA定义:大部分DNA以双螺旋结构存在,但一经热或碱处理就会变为单链状态。
单链DNA的功概念和作用
单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。某些噬菌体粒子内含有单链环状的DNA,这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
细胞化学词汇双链DNA结合域
中文名称:双链DNA结合域外文名称:dsDNA-binding domain定 义:双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作 用:双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA
DNA测序——双脱氧链末端终止法
实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3'-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理,将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体,
单链DNA文库的SELEX筛选实验
实验方法原理 SELEX 技术除了可以使用 RNA 文库以外,还可以使用单链 DNA 文库进行筛选。单链 DNA 形成高级结构的丰富性也足够用于对许多靶分子的筛选,而且 DNA 文库具有更好的稳定性,操作也相对简便。
限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。
双链DNA探针随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是:(1)Klenow片段没有5'→3'外切
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
抗双链DNA抗体的检测方法
检测抗DNA抗体的方法有多种,如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫(如绿蝇短膜虫)作基质测定抗dsDNA抗体。因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA,无其他抗原干扰;在阳性结果时,可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。因此该试验用于测定抗
单链DNA文库的SELEX筛选实验
实验方法原理 SELEX 技术除了可以使用 RNA 文库以外,还可以使用单链 DNA 文库进行筛选。单链 DNA 形成高级结构的丰富性也足够用于对许多靶分子的筛选,而且 DNA 文库具有更好的稳定性,操作也相对简便。实验材料 3' 引物链亲和素磁珠仪器、耗材 电泳仪PCR 仪离心机凝胶成像仪
单链DNA结合蛋白的功能简介
单链DNA结合蛋白(Single-stranded DNA-binding protein,缩写SSB或SSBP)又称单链结合蛋白,是专门负责与DNA单链区域结合的一种蛋白质,为DNA复制、重组和修复所必需的成分。 防止两条互补单链再次结合为双螺旋,维持单链状态。防止单链区域形成链内二级结构。
细胞DNA倍体分类
DNA含量分析参数实验步骤二倍体细胞实验步骤展开 近二倍体细胞实验步骤展开近二倍体细胞实验步骤展开四倍体细胞实验步骤展开非整倍体细胞实验步骤展多异倍体实验步骤