细胞生命四阶段全部可见
英国《自然·方法》杂志31日在线发表的一篇论文，描述了一种使用新型荧光蛋白在活细胞中同时可视化4个细胞周期的方法。这项技术有助于改进对细胞周期及其调控的表征，增进人们对发育生物学和癌症形成的理解。 细胞的生命是一个持续更新、持续从头开始的过程。从它的母细胞分裂开始，到它的子细胞形成或细胞自身死亡结束。而细胞周期就是指从一次细胞分裂形成子细胞开始，到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程。细胞在这种前期、生长、DNA复制和分裂等阶段间循环。一直以来，区分细胞这4个阶段并非易事，因为要同时对来自许多不同报告蛋白（作为报告基因的蛋白）的信号进行成像，在技术上是非常困难的。 为了克服这一限制，美国斯坦福大学研究人员迈克尔·林及其同事，此次开发了一种名为mMaroon1的荧光蛋白，其荧光位于可见光谱远红端，能同时与青绿、绿色和橙色荧光蛋白成像。研究团队使用这种远红报告蛋白来标记一种标志着S期（DNA复制）和G2期（细胞生长）......阅读全文
Ettan－DIGE荧光差异蛋白表达分析系统
原理和应用： Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上，结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品，并第一次引入了内标的概念，极大地提高了结果的准确性，可靠性和重复性。在DIGE技术中，每个蛋白点都有它自己的内标，并且软件全自动根据
绿色荧光蛋白分子标记的研究
分子标记 作为一种新型的报告基因，GFP已在生物学的许多研究领域得到应用。利用绿色荧光蛋白独特的发光机制，可将GFP作为蛋白质标签（protein tagging），即利用DNA重组技术，将目的基因与GFP基因构成融合基因，转染合适的细胞进行表达，然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内
自动荧光显微系统：高效光控蛋白
光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一，通过结合遗传学和光学方法，科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性，以及蛋白相互作用。 在进行光遗传学实验的时候，研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式（photobleaching mode）。虽然目前特殊激光或其它通过光学
荧光蛋白的发光原理是什么
生命的颜色在海洋中，栖息着一类美丽而神奇的生物——水母。水母是一类古老的水生无脊椎软体动物。多数水母拥有颜色绚丽的伞性身躯及自体发光的能力，可散发出点点淡蓝色荧光，与摇曳的海水相映成辉，常引人无限遐想。没有人知道水母发光的能力是如何进化而来的，这些美丽的海洋精灵遍布在世界各地的海洋中，如繁星般点缀着
绿色荧光蛋白的概念和发现
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
核蛋白的免疫荧光定位实验
免疫荧光技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。实验方法免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗
绿色荧光蛋白的研究与应用
1962年，已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代，对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初，科学家才克隆到
关于荧光藻蓝蛋白的作用介绍
1、简介 荧光藻蓝蛋白是从螺旋藻中分离纯化的，具有独特光学性质的新型荧光标记物。 【英文名】：Fluorescence Phycocyanin，FPC）。 【特性】：FPC能发射强烈的荧光，具有很好的吸光性能和很高的量子产率，其荧光强度比常用的荧光素强30倍，在可见光谱区有很宽的激发及发射
核蛋白的免疫荧光定位实验
实验方法原理：免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算
核蛋白的免疫荧光定位实验
免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合
核蛋白的免疫荧光定位实验
实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算
核蛋白的免疫荧光定位实验
核蛋白的免疫荧光定位可应用于：（1）定位细胞内核蛋白分布；（2）病毒研究。实验方法原理免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这
如何选择荧光蛋白的激发波长？
表一：波长组指定激发发射适用于UV - 紫外线360 - 380nm415nm长波通DapiVI - 紫罗兰400 - 415nm450nm长波通蓝色荧光蛋白青色荧光蛋白RB - 皇家蓝440-460nm500nm长波通绿色荧光蛋白RB - 皇家蓝440-460nm500 - 560nm带通
ACS－Nano：荧光成像膜蛋白标记方法揭示膜蛋白几何构型
南通大学生命科学学院教师陈昌盛与德国弗莱堡大学合作，在活体细胞单分子层面构建出一种新型的荧光成像膜蛋白标记方法，可研究膜蛋白复合体的亚基组成及其几何构型。4月28日，相关研究成果《锌指蛋白介导的蛋白标记方法揭示膜蛋白的几何构型》在《美国化学学会纳米杂志》发表。 表达于细胞膜表面的膜蛋白一直以来
绿色荧光蛋白肿瘤发病机制的应用
GFP是一个分子量较小的蛋白，易与其他一些目的基因形成融合蛋白且不影响自身的目的基因产物的空间构象和功能。GFP 与目的基因融合，将目的基因标记为绿色，即可定量分析目的基因的表达水平，显示其在肿瘤细胞内的表达位置和量的变化，为探讨该基因在肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制提供便利条件。 在肿瘤
绿色荧光蛋白的功能特点和作用
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
黄色荧光蛋白的结构和功能特点
黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于维多利亚多管水母（ Aequorea victoria）。相对于绿色荧光蛋白，其荧光向红色光谱偏移，而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm，最大
绿色荧光蛋白的研究与使用历史
1962年，已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代，对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初，科学家才克隆到
超分辨荧光蛋白开发研究获进展
绿色荧光蛋白（GFP）的发明因其能够提供对于活细胞和活体动物的靶向基因修饰标记而获得2008年诺贝尔化学奖。进一步，由基因改造的光激活荧光蛋白（PA-FP）能够提供单分子特性，而实现了超分辨显微，使得这一技术获得2014年诺贝尔化学奖。随后，超分辨的发展向着活细胞动态超高时空分辨率显微迈进。其中
Nature子刊：荧光蛋白计时器
要想真正了解活细胞中蛋白质组的动态，就必须对蛋白质周转（protein turnover）以及蛋白质迁移（protein mobility）进行评估。通常这需要不止一种方法，然而现在一种新型的荧光蛋白计时器使得同时追踪蛋白质周转和移动变为可能。相关论文发布在近期的《自然生物技术》（Nature B
蛋白质的荧光激发波长如何选择？
荧光蛋白的波长组指定激发发射适用于UV - 紫外线360 - 380nm415nm长波通DapiVI - 紫罗兰400 - 415nm450nm长波通蓝色荧光蛋白青色荧光蛋白RB - 皇家蓝440-460nm500nm长波通绿色荧光蛋白RB - 皇家蓝440-460nm500 - 560nm
LSCM绿色荧光融合蛋白表达载体的构建
绿色荧光融合蛋白表达载体的构建 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP) 及其突变体能在各种不同的生物系统中表达，这对细胞生物学的研究具有重要意义。而荧光蛋白的折叠能力及其同细胞内蛋白的融合能力，使研究 者能直接在细胞体内观察到蛋白质的特性。研究者不需要把蛋白质经过
T克隆绿色荧光蛋白（GFP）基因实验
【原理】经TaqDNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A。正是基于这一原理，pGEM-T质粒经EcoRV切成平端后，在开口端加上一个T制成T载体，一方面避免了自身环化，另一方面由于T-A互补，从而提高了T载体与PCR产物之间的连接效率。由于T-A克隆只需纯化PCR产物，因而操作较为简便。pGE
绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位
一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法，在光镜水平进行研究，不需要制样，没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD，经激光扫描共聚集显微镜激光照射后，可产生一种绿色荧光，从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共
量子产率超过90％荧光标记的最强荧光——藻胆蛋白
藻胆蛋白是源自微藻和蓝细菌的光合作用光捕获蛋白家族。这些蛋白质具有共价连接的线性四吡咯基团，称为藻胆素，其在捕获光能中起关键作用。在微藻和蓝细菌中，由这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移（FRET）有效地转移到叶绿素色素用于光合作用反应。与化学合成荧光染料相比，藻胆蛋白由于其相对高的荧光量子产率
荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白（GFP）有什么区别
只能先就标题的问题谈谈我的认识。后面的追问我了解得也不全面。1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白，很直观，能够直接检到荧光，在普通的细胞培养条件下都能够观察到，对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤，因为荧光素酶是个酶，不发荧光，发荧光的是
荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白（GFP）有什么区别
1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白，很直观，能够直接检到荧光，在普通的细胞培养条件下都能够观察到，对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤，因为荧光素酶是个酶，不发荧光，发荧光的是它的底物，荧光素。荧光素在细胞里（要说萤火虫细胞我就不知道了
Nature－Methods：评估荧光蛋白的光激活效率
光控的荧光探针，是对局部进行超高分辨率显微分析的核心。其中，荧光蛋白可以通过基因编码，实现与目的蛋白的1:1标记。所以，荧光蛋白探针特别适合于单分子计数。 近日，ICFO的科学家们首次在单分子水平上，确定了多个荧光蛋白的光激活效率，这一参数对于单分子计数非常重要。文章发表在一月五日的Nat
Nature－Methods：评估荧光蛋白的光激活效率
光控的荧光探针，是对局部进行超高分辨率显微分析的核心。其中，荧光蛋白可以通过基因编码，实现与目的蛋白的1:1标记。所以，荧光蛋白探针特别适合于单分子计数。 近日，ICFO的科学家们首次在单分子水平上，确定了多个荧光蛋白的光激活效率，这一参数对于单分子计数非常重要。文章发表在一月五日的Nat
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，P