荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白(GFP)有什么区别

只能先就标题的问题谈谈我的认识。后面的追问我了解得也不全面。1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤,因为荧光素酶是个酶,不发荧光,发荧光的是它的底物,荧光素。荧光素在细胞里(要说萤火虫细胞我就不知道了哦)是没有的。所以检测荧光素酶的通常步骤是裂解细胞,释放荧光素酶,与荧光素及其他所需化学物质混合,才得到荧光。现在虽然也有活细胞内检测荧光素酶的手段,但要将荧光素送入活细胞,本身就已要对细胞进行相当的干扰。所以一般来说荧光素酶实验的同一批细胞不适合再做其他并行实验。2。两者的结果含义不同。gfp如果说是定量检测表达蛋白的话,这个定量只能够指,表达的细胞是多少个,不表达的细胞是多少个。gfp对于单个细胞来说,就有阳性和阴性两种结果罢了。gfp不能够定量地告诉你,这个/群细胞里的......阅读全文

GFP抗体|GFP抗体检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗体

检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范

GFP单抗的概述

  GFP单抗,又叫GFP单克隆抗体,或维多利亚水母绿色荧光蛋白单抗,是蛋白质研究过程中非常重要的工具,尤其是在鉴定重组的带有GFP标签的蛋白质是否表达或者表达的相对丰度时有着极重要的作用。

iRNA干扰GFP表达实验

实验概要本文介绍了iRNA干扰GFP表达实验的原理及方法步骤。实验原理RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中,RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特

iRNA干扰GFP表达实验

【原理】RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中,RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链siRNAs(smallinte

绿色荧光蛋白GFP性质

  GFP荧光极其稳定,在激发光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比荧光素(fluorescein)强,特别在450~490nm蓝光波长下更稳定。  GFP需要在氧化状态下产生荧光,强还原剂能使GFP转变为非荧光形式,但一旦重新暴露在空气或氧气中,GFP荧光便立即得到恢复。而

活体GFP绿色荧光成像系统

  系统提供动物活体绿色荧光蛋白的实时观察与成像等一系列的荧光检测。能够应用在像深度肿瘤,大动物等活体肿瘤追踪观察成像研究。    该设备是一个高灵敏度的图像成像工作系统,主要利用特定波长的激光进行激发后,通过高灵敏度的致冷CCD进行实时检测后,获得所需的各类 特性的图像,有利于进一步的分析作用 。

GFP:荧光蛋白的起源

  绿色荧光蛋白(简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定,在激发光照射下,其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记;此外,GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。   1962年,下村脩和约翰逊在一

GFP:荧光蛋白的起源

     绿色荧光蛋白(简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定,在激发光照射下,其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记;此外,GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。       1962年,下村

GFP:荧光蛋白的起源

作者: 罗辑科学        绿色荧光蛋白(简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定,在激发光照射下,其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记;此外,GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。   

GFP与YFP有哪些区别

YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP则不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光,也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题,只是有几个问题应该考虑:1. 应该标记在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果将

gfp激发波长和发射波长

gfp激发波长是488nm,发射波长是507nm。gfp是绿色荧光蛋白的简称,是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。绿色荧光蛋白主要应用1.由于荧光

GFP与YFP有哪些区别

YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP则不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光,也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题,只是有几个问题应该考虑:1. 应该标记在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果将

Flow-Sorting-Fibroblasts-with-GFP-and-P.I.

ProtocolWash cells with PBS and trypsinize to a single cell suspension.Count an aliquot on a hemocytometer. Meanwhile centrifuge the cells (e.g. 1000

Measurement-of-GFP-Expression-and-DNA-Content-in-Permeabilized-Cells

ReagentsCells to be studied expressing green fluorescent protein (GFP). Note that the same cell type without GFP is needed as a control.1 X PBS2% Buff

pcDNA3.1GFP转染细胞实验

实验概要本实验学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法 — 脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白)。实验原理外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于

什么是gfp蛋白及其应用

绿色荧光蛋白GFP的研究进展及应用作者:吴沛桥~巴晓革~胡海~赵静【摘要】 源于多管水母属等海洋无脊椎动物的绿色荧光蛋白(GFP)~是一种极具应用潜力的标记物~有着极其广泛的应用前景。我们就GFP的理化性质、荧光特性、改进和应用研究进行了综述。【关键词】 绿色荧光蛋白,GFP,,标记物,荧光特性,进

绿色荧光蛋白(GFP)的应用

  骨架和细胞分裂  Kevin Sullivan's 实验室  酵母菌内SPB 和微管动力学  酵母菌中肌动蛋白的动力  果蝇中MEI-S332蛋白  果蝇有丝分裂和mRNA运输  网丙菌属细胞骨架  RNA剪切因子的核内运输  网丙菌属的趋化作用  网丙菌属中细胞骨架动力和细胞运动  核

免疫双扩散检测抗GFP血清抗体

实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇,当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物,这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时,在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线,这叫免疫双扩散实验

Nature子刊:首个电镜版GFP问世

绿色荧光蛋白GFP曾给分子生物学领域带来了一场革命,科学家们用GFP标记细胞内的特定蛋白,就能够通过荧光显微镜轻松的进行识别和定位。但GFP无法用于电镜,而电镜的分辨率可比荧光显微镜高多了。 日前,麻省理工的化学家们就开发出了类似GFP的电镜标记,利用这一新技术科学家们可以在电镜下观察标记的蛋白,

GFP骨的冰冻切片实验方法

Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4�C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol

免疫双扩散检测抗GFP血清抗体

实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇,当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物,这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时,在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线,这叫免疫双扩散实验

T克隆绿色荧光蛋白(GFP)基因实验

【原理】经TaqDNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A。正是基于这一原理,pGEM-T质粒经EcoRV切成平端后,在开口端加上一个T制成T载体,一方面避免了自身环化,另一方面由于T-A互补,从而提高了T载体与PCR产物之间的连接效率。由于T-A克隆只需纯化PCR产物,因而操作较为简便。pGE

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

亚细胞定位的GFP融合蛋白表达法

  GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白(GFP)是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。通过基因工程技术,绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组,在后代中持续表达,并且能根

GFPTrap如何设计成功的IP实验?

借助Chromotek公司GFP-Trap如何设计成功的IP实验?How to plan an immunoprecipitation of your GFP-fusion protein when using the ChromoTek GFP-Trap®PreambleThis document

基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达

实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上,采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2,0.1 M亚精胺,等渗培养基

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些?

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达

实验试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2 ,0.1 M亚精胺,等渗培养基(MS培养基)实验设备高速离心机,1.5 ml Ep管,涡旋器,超净台,基因枪,气瓶,激光共聚焦显微