简单两步改善WB中膜蛋白的检测
俄罗斯科学院的研究人员近日开发出一种简单的方法,可改善免疫印迹中膜蛋白的检测。他们在新一期的《BioTechniques》上介绍了这个成果。 利用Western blot,人们可精确鉴定复杂样品中的特定蛋白质。然而,每条泳道可加入的蛋白总量是有限的,这就限制了低丰度蛋白的检测。因此,低丰度蛋白需要预先富集,才能可靠检测。为此,研究人员设计了一种简单方法,从酵母细胞裂解液中富集膜蛋白,并制备SDS凝胶电泳的样品。 为了确定汉逊酵母(Hansenula polymorpha)中膜蛋白Pho87的水平,研究人员一开始用了常规的方法进行样品制备。这就是大家熟知的:用玻璃珠破碎细胞,再用Laemmli SDS凝胶电泳缓冲液煮沸细胞裂解物。尽管每条泳道的上样量相当高,但全长Pho87的条带却总是无处寻觅。相反,Pho87降解产物的条带却格外显眼。 由于Pho87是膜蛋白,研究人员便试着通过分离裂解液中的膜组分来浓缩。他们假设,在细......阅读全文
膜蛋白界面振动能量转移研究取得进展
中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家实验室、量子创新研究院、化学物理系罗毅教授研究团队研究员叶树集小组在膜蛋白界面振动能量转移方面取得进展。该小组揭示了生物膜界面蛋白质酰胺键骨架振动的能量转移速率与途径,研究成果以Ultrafast Vibrational Dynamics of Membra
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地刺激膜上的一种分子量为22
线粒体呼吸链膜蛋白复合物Ⅰ的结构揭晓
德国科学家成功揭示细胞线粒体呼吸链膜蛋白复合物Ⅰ的结构,并发现了分子复合物中的全新能量转换机制,细胞可通过该机制使用储存在营养中的能量。相关研究成果发表在7月1日的《科学》杂志网络版上。 有氧呼吸是动植物进行呼吸作用的主要形式,细胞在氧的参与下,通过酶的催化作用将糖类等有机
线粒体原位膜蛋白的高分辨结构解析首次实现
3日,记者从南京中医药大学获悉,该校医学院朱家鹏教授和耶鲁大学张凯教授联合研究团队突破了蛋白质纯化的传统概念,直接以线粒体成像,首次实现了线粒体原位膜蛋白的高分辨结构解析,得到呼吸链超级复合体的最真实最清晰的三维结构,为氧化磷酸化这一最基本的生命过程的研究提供了坚实的理论基础。相关科研成果发表在
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地刺激膜上的一种分子量为22
细胞膜蛋白靶向降解有了新策略
细胞膜蛋白作为药物研发的核心靶点,其重要性已被大量临床药物证实。细胞膜蛋白靶向降解技术能选择性清除致病蛋白,展现出更强治疗潜力,开辟了药物研发的新范式。 近日,由中国科学院深圳先进技术研究院医药所研究员房丽晶、副研究员陈亮与研究员李红昌组成的学科交叉团队,在细胞膜蛋白靶向降解技术方面取得重要进
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地刺激膜上的一种分子量为22
Cell子刊:胞外体,膜蛋白的转运仓
麻省大学UMass医学院的一项新研究显示,胞外体(exosome)能够在关键的信号传导过程中,将蛋白从神经元运送到肌肉细胞,文章发表在Cell旗下的Neuron杂志上。研究显示,胞外体可以转运膜蛋白,在神经系统的细胞间通讯中具有重要作用。此外,这项激动人心的发现意味着,胞外体可以用来装载治疗药物
溶解膜蛋白用的去垢剂的筛选实验
虽然 TriumX-100 是从鼠肝质膜溶解胰岛素受体的一种良好的去垢剂,但它未必适合其他膜蛋白的溶解。这里,介绍一种筛选去垢剂的策略以确定它是否适于溶解某一待分离的膜蛋白。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。实验步骤操作程序1) 将膜制备物悬浮于所选的缓冲系统(如,磷酸缓冲液或 H
红细胞膜蛋白电泳分析的原理
将制备的红细胞膜样品进行SDS-PAGE电泳,根据样品中各蛋白相对分子质量的不同,分离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱,从而可见各膜蛋白组分百分率。
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地刺激膜上的一种分子量为22
环腺苷酸对膜蛋白活性的调节
cAMP可促使非神经细胞膜上某些蛋白的磷酸化,使其构型发生改变,从而调节膜对一些物质的通透性。例如在红细胞中,cAMP激活细胞膜上的蛋白激酶,使膜上的Spectin蛋白磷酸化后,对红细胞膜的理化性质及红细胞的形态产生极为重要的调节作用。在血小板中,cAMP可通过APK有效地刺激膜上的一种分子量为22
微流控扩散技术膜蛋白研究新方法
背景膜蛋白是生物膜功能的主要执行者,在生物体内参与许多重要的生理过程。但是,由于很难获得稳定均匀且维持膜蛋白正确构象的膜模拟环境,膜蛋白研究远远滞后于水溶性蛋白。磷脂纳米盘(Nanodisc)是由高密度脂蛋白发展而来的用于膜蛋白研究的新类型膜结构。将膜蛋白与Nanodisc组装起来,是膜蛋白研究的有
线粒体原位膜蛋白的高分辨结构解析首次实现
3日,记者从南京中医药大学获悉,该校医学院朱家鹏教授和耶鲁大学张凯教授联合研究团队突破了蛋白质纯化的传统概念,直接以线粒体成像,首次实现了线粒体原位膜蛋白的高分辨结构解析,得到呼吸链超级复合体的最真实最清晰的三维结构,为氧化磷酸化这一最基本的生命过程的研究提供了坚实的理论基础。相关科研成果发表在国际
溶解膜蛋白用的去垢剂的筛选实验
溶解膜蛋白用的去垢剂的筛选实验 实验步骤 操作程序1) 将膜制备物悬浮于所选的缓冲系统(如,磷酸缓冲液或 HE
溶解膜蛋白用的去垢剂的筛选实验
虽然 TriumX-100 是从鼠肝质膜溶解胰岛素受体的一种良好的去垢剂,但它未必适合其他膜蛋白的溶解。这里,介绍一种筛选去垢剂的策略以确定它是否适于溶解某一待分离的膜蛋白。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。实验步骤操作程序1) 将膜制备物悬浮于所选的缓冲系统(如,磷酸缓冲液或 H
生物膜的膜蛋白的限制性运动
在重建膜上,许多膜蛋白的测向扩散系数都在10-8~10-9cm2·s-1范围,和Saffman-Delbrück公式算出的理论值相符。但在生物膜上,不少膜蛋白运动很慢,甚至几乎不能运动。如红细胞膜上的带3蛋白,DL=3.8×10-l1cm2·s-1)(26℃);细菌视紫红质在嗜盐菌的紫膜上呈晶格
科学家设计制造出跨膜蛋白质
美国华盛顿大学一个科研团队借助计算机设计,制造出了跨膜蛋白质,它可像天然膜蛋白那样形成多蛋白复合体,可应用在疫苗设计等领域。图片来源于网络 膜蛋白是生物膜中所含的蛋白质,嵌在细胞和细胞器的膜中。有些膜蛋白的两端暴露于膜的内外表面,被称作跨膜蛋白质。它们可作为物质跨膜转运的通道,许多药物设计将其
科学家利用非极性包装获高稳定膜蛋白
近日,北京大学深圳研究生院与美国加州大学合作利用非极性包装获得高度稳定的膜蛋白。该成果日前在线发表于《科学》。 膜蛋白作为生物膜功能行使的主要承担者,一直是生物学家重点研究的对象。相较于水溶性蛋白,膜蛋白的设计十分困难,主要原因在于人们对能显著影响膜蛋白稳定性的结构特征知之甚少。 “在水溶性
临床化学检查方法介绍颗粒膜蛋白140介绍
颗粒膜蛋白-140介绍: 许多疾病的发生都与血小板活化有关,血小板在活化过程中,不仅形态和生化代谢发生改变,其膜蛋白的结构和组分也发生变化。血小板α-颗粒膜蛋白是血小板活化释放的特异标志之一,可反映体内血小板的活化程度及血栓形成倾向,为人类血栓性疾病的早期诊断、治疗提供了一条新的途径,对其它疾
冷冻电镜结合-Nanodisc在膜蛋白研究的应用(二)
将膜蛋白组装到 Nanodiscs 中主要有两种方法。第一:组装溶解在去污剂中的膜蛋白在去污剂存在条件下将膜蛋白纯化,然后再添加 MSPs 和磷脂。含有膜蛋白的 Nanodiscs 能够自发地组装,在去除掉表面活性剂后可以通过凝胶过滤(排阻层析)等方式来纯化。第二:Nanodiscs 与无细胞表达体
Nature:揭示膜固醇激活七跨膜蛋白SMO的机制
Hedgehog信号转导是胚胎发育和出生后组织再生的基础。异常的出生后Hedgehog信号转导导致几种恶性肿瘤,包括基底细胞癌和儿童成神经管细胞瘤。Hedgehog蛋白结合并抑制跨膜胆固醇转运蛋白Patched-1(PTCH1),从而允许七跨膜转导蛋白Smoothened(SMO)激活,但是人们
生物膜的化学成分膜蛋白的介绍
生物膜所含的蛋白叫膜蛋白,是生物膜功能的主要承担者。根据蛋白分离的难易及在膜中分布的位置,膜蛋白基本可分为两大类:外在膜蛋白和内在膜蛋白。外在膜蛋白约占膜蛋白的20%~30%,分布在膜的内外表面,主要在内表面,为水溶性蛋白,它通过离子键、;氢键与膜脂分子的极性头部相结合,或通过与内在蛋白的相互作
膜蛋白和细菌总蛋白提取的三大方法
一、从新鲜样品中提取总蛋白(简易法)1、自配裂解液(pH 8.5-9.0):50 mM Tris-HCl,2 mM EDTA, 100 mM NaCl,0.5% Triton X-100,调pH值至8.5-9.0备用;用前加入100 μg/ml 溶菌酶,1μl/ml 的蛋白酶抑制剂PMSF。该裂
红细胞质膜蛋白及膜骨架的相关介绍
1、血影蛋白又称收缩蛋白(spectrin),是红细胞膜骨架的主要成份,但不是红细胞膜蛋白的成份,约占膜提取蛋白的30%.血影蛋白属红细胞的膜下蛋白,这种蛋白是一种长的,可伸缩的纤维状蛋白,长约100 nm,由两条相似的亚基:β亚基(相对分子质量220kDa)和α亚基(相对分子质量200kDa)
冷冻电镜结合-Nanodisc在膜蛋白研究的应用(一)
细胞生物膜所含的蛋白称为膜蛋白,其参与和行使了众多细胞功能,包括细胞与外界进行物质运输、信息传递、能量交换等。膜蛋白担任了各种神经信号分子、激素和其他底物的受体,构成了各种离子跨膜的通道,以及构成各类转运蛋白。在人体蛋白中,有大约 30% 是膜蛋白。FDA 批准的新药中,绝大多数都以膜蛋白为靶点
Nanodisc配合冷冻电镜提升膜蛋白的分辨率
Toxic, hot, and spicy: Nanodiscs improve membrane protein resolution in cryo-EM(作者:Cube Biotech) N
科学家设计制造出跨膜蛋白质
据新华社电 美国华盛顿大学一个科研团队借助计算机设计,制造出了跨膜蛋白质,它可像天然膜蛋白那样形成多蛋白复合体,可应用在疫苗设计等领域。 膜蛋白是生物膜中所含的蛋白质,嵌在细胞和细胞器的膜中。有些膜蛋白的两端暴露于膜的内外表面,被称作跨膜蛋白质。它们可作为物质跨膜转运的通道,许多药物设计将
乙型肝炎病毒外膜蛋白前S1抗原
乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面而起有十分重要作用。因此 前S1抗原(Pre-S1Ag)的检测同“二对半”一样很有