以毒攻毒——利用腺病毒选择性杀伤肿瘤细胞
IDIBAPS生物医学研究所和IRB Barcelona的生物医疗研究所的科学家们领导一个研究项目,他们利用一个新测量对病毒进行基因改造,让它们选择性地攻击肿瘤细胞,放过健康组织。 传统的肿瘤治疗手段因为欠缺细胞选择特异性,通常会造成一些不良的副作用。杜绝这些状况是非常重要的(病没治好,人先被药物拖垮了),因此,新一代的肿瘤治疗的方式就是力图只清除肿瘤细胞,保存健康细胞,如基因治疗、靶向治疗、肿瘤免疫疗法、癌症疫苗、抗体偶联药物等。 中科院学者Nature发表提高T细胞抗肿瘤免疫功能的新方法 近年来,一些科学家把目光投向了溶瘤细胞病毒,这是一种经过基因工程手段改造出来的只感染肿瘤的病毒。听起来很有前景,但是这种病毒或多或少有些细胞毒性。如何降低其对健康细胞的影响,变成了这个潜临床治疗手段主要面对的问题。 IDIBAPS and IRB(巴塞罗那)的研究人员发明了一种新方法——让腺病毒去高效地杀伤肿瘤。来自IRB 的R......阅读全文
肿瘤细胞的培养(二)
二、培养方法 肿瘤细胞培养成功关键在于:取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面,肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别,初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1.取材: 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要,体积较大的肿瘤组织中有退变或坏
原代肿瘤细胞选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验
实验方法原理在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而
《Cell》:新型肿瘤细胞富集系统,让循环肿瘤细胞无处可逃
在血流中对循环肿瘤细胞(CTC)进行计数可以预测癌症患者的预后和存活率。 然而,CTC的稀有性和异质性使它们在作为生物标志物使用时产生巨大的困难。 最近的研究报道了癌症患者中存在的新型循环非癌性肿瘤衍生细胞, 包括癌症相关巨噬细胞,肿瘤 -内皮簇(TEC)和癌相关成纤维细胞(CAF)。目前的
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选
实验方法原理 在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选...
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞, W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而,神经胶质瘤研究的结果表明,在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是
离心机用于腺病毒体外在293细胞中大量扩增
一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法zui终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗粒。如果要把病毒用氯化铯梯
细胞生物基本方法:肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除(成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长,致难以纯化肿瘤组织)。有以下一些方法:1.机械刮除法2.反复帖壁法3.消化排除法4.胶原酶消化法 1) 机械刮除法1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入
新观点|死亡肿瘤细胞或助肿瘤“卷土重来
上海仁济医院肝脏外科主任夏强教授团队的研究提出了肿瘤免疫新观点,死亡肿瘤细胞可能会协助肿瘤“卷土重来”。 中国专家提出肿瘤免疫新观点:死亡肿瘤细胞或助肿瘤“卷土重来 肿瘤细胞的死亡是否意味着肿瘤生物学事件的终结?上海交通大学医学院附属仁济医院15日披露,该院肝脏外科主任夏强教授团队的研究提出
如何利用肿瘤组织细胞构建肿瘤类器官?
利用肿瘤组织细胞构建肿瘤类器官通常包括以下步骤:肿瘤组织获取从患者手术切除的肿瘤组织、活检样本或转移性肿瘤病灶中获取新鲜的肿瘤组织。组织处理将肿瘤组织进行清洗,去除血液和坏死部分。使用酶消化法(如胶原酶、胰蛋白酶等)或机械解离法将组织分解成单个细胞或小细胞团。细胞筛选与培养通过细胞滤网过滤,去除未消
概述腺病毒的研究简史
人体腺病毒已知有52种,分别命名为adl~ad52,研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA,已知的转录单位至少有5个:EⅠ区位于病毒基因组左侧,可再分成EⅠA和EⅠB,与细胞转化有关;EⅡ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的复制;EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白;EⅣ区位于ad2
腺病毒肺炎的症状简介
腺病毒除引起上呼吸道感染外,还可引致小儿肺炎,多见于6个月至2岁的婴幼儿腺病毒肺炎最为危重,尤以北方各省多见,病情严重者也较南方为多。 腺病毒一般通过呼吸道传染。在集体儿童机构中往往同时发生腺病毒上呼吸道感染及肺炎。人群血清学研究说明,生后最初数月常存留从母体传递的腺病毒特异抗体,此后一直到2
腺病毒甲亢造模的机制
甲亢是一种常见的器官特异性自身免疫性疾病,是由于甲状腺合成释放过多的甲状腺激素,造成机体代谢亢进和交感神经兴奋。甲亢病因很多,与情绪,碘营养,自身免疫,家族遗传性都有关系,常见的有弥漫性毒性甲状腺肿(又称Graves’ disease,GD)、炎性甲亢、药物致甲亢、HCG相关性甲亢和垂体TSH瘤甲亢
小儿腺病毒肺炎的简介
小儿腺病毒肺炎是病毒性肺炎中较常见的一种,多见于6个月~2岁的婴幼儿。冬、春两季发病率较高,多通过呼吸道传染。起病特点为急骤发热,往往自发病第1、2日体温达39℃,一般可持续1周以上,抗生素治疗无效。 腺病毒肺炎是我国发病率较高的病毒性肺炎,流行地区广,以冬春季发病率最高,以三型、七型及十一型
腺病毒包装技术的简介
腺病毒(Adenovirus)是最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点: 1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。 2. 因
简述腺病毒的防治原则
腺病毒的甲醛灭活疫苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜炎爆发的危险性降至最小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控
怎样预防腺病毒55型?
腺病毒感染主要在冬春季流行,通过呼吸道和接触传播,其预防措施和预防其他呼吸道传染病相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫;平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身体;室内多通风,保持清洁;冬春流行季节尽量少去人员密集的公共场所,外出时戴口罩,以防感染。 一旦发生急性发热、咽喉
腺病毒肺炎有哪些症状?
发热:体温升高,一般在38℃以上。 咳嗽:开始时干咳,后来逐渐变成有痰的咳嗽。 呼吸困难:呼吸急促、气短、胸闷等。 喉咙痛:喉咙疼痛、发炎等。 鼻塞、流涕:类似于感冒的症状。 头痛、肌肉疼痛、乏力等全身症状。 严重病例可能出现呼吸衰竭、休克等并发症。
如何预防腺病毒感染?
勤洗手:经常用肥皂和水洗手,特别是在接触可能被感染的物品或人员后。 避免接触患者:尽量避免与已经感染腺病毒的人接触,特别是在他们咳嗽、打喷嚏或发热时。 保持室内通风:保持室内空气流通,可以减少病毒在空气中的传播。 注意个人卫生:不与他人共用餐具、毛巾等个人用品,避免接触眼、鼻、口等易感染的
关于腺病毒肺炎的简介
本病的临床特点:病情重,恢复慢,病死率较高,但近年来,该病发病有下降趋势。易发生在冬春季节,特别是冬季,常见于6个月-2岁的婴幼儿。 多数起病急,1-2日内体温升至39-40℃稽留不退,热程较长,轻症7-11日,重者10-20天才退至正常,少数可持续3-4周。发烧3-4天即出现 神经系统症状:精
概述腺病毒的生活周期
腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞,将基因组释放到宿主细胞核中,以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段,细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒,即第二阶段,作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内
预防腺病毒的方法介绍
腺病毒感染主要在冬春季流行,容易在幼儿园、学校和军营新兵中暴发流行。一般来说,腺病毒主要通过呼吸道飞沫、眼分泌物,经呼吸道或接触传播;肠道感染主要通过消化道传播。其预防措施和其他呼吸道、消化道传染病预防相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫。平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身
简述腺病毒的防治方法
腺病毒感染主要在冬春季流行,容易在幼儿园、学校和军营新兵中暴发流行。一般来说,腺病毒主要通过呼吸道飞沫、眼分泌物,经呼吸道或接触传播;肠道感染主要通过消化道传播。其预防措施和其他呼吸道、消化道传染病预防相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫。平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身
腺病毒载体有什么缺陷
它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原
腺病毒载体有什么缺陷
它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原
腺病毒载体的分类介绍
第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。 第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性
关于腺病毒的分类介绍
分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来,已陆续发现了100余个血清型,其中人腺病毒有52种,分为A、B、C、D、E和F六个亚群(subgroup)。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群,在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强,滴度通常可以达到109p
肿瘤相关巨噬细胞转化为癌症杀手,里应外合杀灭肿瘤
上皮肿瘤(如肺癌和胰腺癌的肿瘤)利用ανβ3分子获得了针对标准抗癌疗法的耐药性,从而成为高转移性得癌症。在一篇发表在《Cancer Research》上的最新研究中,来自加州大学圣地亚哥分校(University of California San Diego,UCSD)医学院的研究人员发现了一
《Cell》子刊揭示肿瘤干细胞如何驱动肿瘤发展
目前对于癌症干细胞样细胞(CSCs)如何与其更受限制的后代相互作用知之甚少。 在过去的十年中,越来越多的证据表明,某些肿瘤与其起源组织相似的谱系管控,这些谱系最顶端的细胞群由肿瘤干细胞样细胞(CSCs)组成。致瘤过程的多种特征与组织正常发育和再生过程相似:CSCs的可塑性和异质性以及它们在特定
浆细胞肿瘤概念与分类
1.概念 浆细胞肿瘤系单克隆浆细胞异常增生,并分泌单克隆免疫球蛋白和(或)多肽链亚单位的一组肿瘤性疾病。 2.分类 包括多发性骨髓瘤(浆细胞骨髓瘤)、浆细胞瘤、意义未定的单克隆免疫球蛋白病、免疫球蛋白沉积病、骨硬化性骨髓瘤等,以多发性骨髓瘤最常见。
肿瘤细胞的多药耐药
肿瘤细胞的多药耐药可以分为天然耐药(在化疗开始时就存在的耐药性)和获得性耐药(在化疗过程中由一种化疗药物诱导产生)。