第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)通知

当前,我国以疫苗和单抗药物为主要领域的生物制药研发已经初具规模,生物工程中下游的关键技术与配套基础正在加速建立与完善,国际生物产业的发展也将加快向中国转移。基因工程下游技术、蛋白质分离纯化技术等作为生物技术研究与产业化中的一线技术,在新产品开发、工艺流程优化、基因工程项目规划与实施等方面极为重要。鉴于目前生物技术相关专业中蛋白质纯化等下游技术课程较为薄弱的问题,中国生物工程杂志社定于2011年6月在北京举办“第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)”。基础班旨在使生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员在从事蛋白质实验工作中,能够建立系统规范的掌握蛋白质纯化的概念和知识。此外,与以往举办的专题研讨班不同,中高级班专题研讨班以掌握蛋白质分离纯化全面知识和国际最新进展为主体,基础班则是系统讲解与演示生物工程下游技术的基础知识与操作技能。 本期研讨班将邀请中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课,并结合大量实例具体讨论蛋......阅读全文

反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1.  用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2.  以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15

生物信息学技术分离蛋白质组的介绍

  生物信息学在生命科学研究中起着越来越重要的作用。利用生物信息学对蛋白质组的各种数据进行处理和分析,也是蛋白质组研究的重要内容。生物信息学是蛋白质组学研究中不可缺少的一部分。生物信息学的发展,已不仅是单纯的对基因组、蛋白质组数据的分析,而且可以对已知的或新的基因产物进行全面分析。在蛋白质组数据库中

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质

实验原理        带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,则这些蛋白质均带负电,在电场中都向阳极移动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带负电荷多少及分子大小不同,所以在电场中向阳

蛋白质的分离实验——IEF(等电点聚焦电泳)法

实验方法原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,

蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验

实验方法原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层, 同时, 蛋白质分子所带的电荷被中和, 结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。经透析或用水稀释时又可溶解, 故蛋白质的盐析作用是可逆过程。盐析不同的蛋白质所

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质

实验概要1. 掌握醋酸纤维素薄膜电泳的原理和操作方法;2. 了解醋酸纤维素薄膜电泳所分离的血清蛋白质的各带谱及其临床意义。实验原理         带电荷的蛋白质,在电场中向着与其所带电荷电性相反的电极泳动称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点不同,但大都在pH7以下,若将血清置于pH8.6的缓冲液中,

离子交换层析可以用于哪些蛋白质的分离

离子交换层析是利用蛋白质在不同PH带不同种电荷的方法,利用离子交换的方法分离蛋白的。离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用洗脱剂洗脱。不同

蛋白质免疫印迹实验制备分离胶、积层胶

  制备分离胶、积层胶  1)所需器材:制冰机、制胶槽、Teflon梳子、小烧杯、手套、大冰盒、去离子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl(PH值8.8)、1.0mol/L的Tris-cl(PH值6.8)、10%SDS(十二烷基磺酸钠)、10%AP(过硫酸铵)、TEMED(四甲

蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验

蛋白质盐析             实验方法原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层, 同时, 蛋

ROS激发的蛋白质相分离控制植物干细胞命运

  约24-38亿年前,地球开始产生氧气,大气层由厌氧环境逐渐转变为富氧环境,自然选择促进了耗氧生物的生存优势和生命演化。耗氧代谢增加了多细胞生物的能量代谢效率,但高频的电子传递和能量转换产生化学性质活泼、具有高度氧化力的活性氧分子(Reactive Oxygen Species, ROS),包括超

蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验

本实验的目的是了解盐析分级分离蛋白质的基本原理及操作;了解葡聚糖凝胶SephadexG-25脱盐的基本原理和凝胶柱的制备及洗脱技术以及了解752型紫外可见分光光度计的使用方法。实验方法原理用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层

电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

实验材料 冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒 甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材 旋转蒸发器小试管实验步骤 1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过

根系微生物工程改善植物的生长

  在农业发展早期,人类一直培育庄稼直到它们长大些、更富有营养,但是基因操作不是促进植物生长的唯一方法。9月25日在著名刊物《微生物学趋势》上发表的评论文章上,2个综合性生物学家展现了怎样设计植物土壤微生物来改善植物生长,即使植物在基因方面是一样以及不能进化发展。这些人工选择的微生物可以从父母遗传到

生物工程中专一性的定义

生物工程中有以下几种含义:(1)酶或细胞对某种底物的反应有特殊的促进能力。其选择性的高低表示出专一性的大小。例如一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质,被酶作用的物质称为该酶的底物(substrate)。脲酶的底物是尿素而不能是其他物质。(2)一种和抗体结合的抗原在全部反应中所显示选择性的大小。选

中国生物工程学会学术年会召开

  日前,由中国生物工程学会和温州市人民政府主办的“中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会”在温州医科大学召开。  本届大会的主题是“生物技术与健康生活”。中国生物工程学会理事长欧阳平凯院士、解放军总医院付小兵院士、温州医科大学副校长李校堃教授等9位专家在大会上作主旨报告,与会代表围绕

Nature头条:美丽神话展现生物工程迷人魅力

  当我们看到海中色彩缤纷的水母的时候,也许并不会想起那个希腊神话——那个著名的蛇发女妖美杜莎,传说中任何人哪怕只看她一眼,也会立刻变成毫无生气的一块大石头。而近期的一组研究人员则令这个神话故事调转了过来:他们利用生物工程,实现了将一种坚固的元素——硅——和肌肉细胞转变成了能够自由游泳的“水母”。

中国生物工程学会召开青年科技论坛

   4月14日,中国生物工程学会第三届青年科技论坛在天津举行。300多位来自全国(含港澳地区)的青年学者就合成生物学、微生物基因组学、基因编辑与精准医学、生物材料与纳米生物技术等前沿话题进行了交流。 此次论坛由中国生物工程学会青年工作委员会和中科院天津工业生物技术研究所联合主办,中科育成(天津

生物工程中的无血清细胞培养

无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑,其一般是在合成培养基的基础上,引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分,使培养基能满足动物细胞培养的要求,又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后,新的无血清培养基不断问世,人们经过研究发现,只要在培养基中增加某些适于细胞生长的

生物工程的应用领域和应用特点

生物工程是分子遗传学、微生物学、细胞生物学、生物化学、化学工程和能源学等各学科的结合,其应用范围十分广泛,包括医药、食品、农林、园艺、化工、冶金、采油、发酵罐新技术和新底物的环保等方面。许多现有的以微生物学为基础的工业,依靠基因工程、利用而得以改进,同时还缓解了环境污染等社会问题。不久的将来,光生物

2024年南南合作气候投融资专题研讨班开班

9月2日,由生态环境部应对气候变化司主办,清华大学能源环境经济研究所、中国碳中和促进项目(CCNI)、中国-拉美清洁能源与气候变化国际联合研究中心、中国-巴西气候变化与能源技术创新研究中心和清华大学无锡应用技术研究院承办的“一带一路”气候变化投融资培训班在北京正式开班。来自巴西、泰国、乌干达、埃及、

第四届制药分离纯化技术与学术大会(第四轮通知)

  第四届制药分离纯化技术与学术大会将于9月21日-22日在苏州独墅湖世尊会议中心举办,前三届累计参会人数超过1500多人,技术学术大会同技能培训班结合获得广泛好评和赞誉,已成为制药分离纯化领域的专业盛会,诚挚欢迎您及同行朋友们前来交流和学习。本届大会由苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会主办,以“

用于HPLCSEC分析的超纯水

高效液相色谱(HPLC)是一种进行物质分离、鉴定和定量的分析方法。与其它通常采用梯度模式的各种生物聚合物HPLC(离子交换、疏水相互作用和反相色谱)不同,SEC(尺寸排阻色谱法)通常采用等度方法。 尺寸排阻色谱法 尺寸排阻色谱法(SEC)包括凝胶渗透色谱法(GPC)和凝胶过滤色谱法(在含水条

单克隆抗体技术简介

一种免疫学技术,将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞进行细胞融合, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体。是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。

单克隆抗体的简介

  1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细

单克隆抗体的优点

  (1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。  (2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。  (3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。 

单克隆抗体的纯化

一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前,一般均需对腹水进行预处理,目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和过滤离心法,以前者处理效果为佳,而且操作简便。1、二氧化硅吸附法新鲜采集的腹水(或冻存的腹水),2000r/min 15分钟,除去细胞成分(或

单克隆抗体的纯化

实验方法原理 葡萄球菌蛋白 A 可以结合数种哺乳类动物的免疫球蛋白。蛋白质 A-琼脂糖介质可以结合部分 IgM、大部分 IgGl 及几乎所有的 IgG2a、IgG2b 和 IgG3 MAb。实验材料 腹水(单克隆抗体)试剂、试剂盒 蛋白 A-琼脂糖 CL-4BTr1s 缓冲液 pH 8.6柠檬酸盐缓

单克隆抗体的纯化

一、腹水型单抗的纯化 在单抗纯化之前,一般均需对腹水进行预处理,目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和过滤离心法,以前者处理效果为佳,而且操作简便。 1、二氧化硅吸附法 新鲜采集的腹水(或冻存的腹水),2000r/min 15分钟,除去细胞成分(

单克隆抗体综述2

1、抗CD20单抗的情况 2、抗CD6单抗情况 目前该单抗是属于抗CD6的IgG1亚型的单克隆抗体。该单抗是针对淋巴瘤细胞,可治疗牛皮癣、类风湿关节炎。古巴分子免疫学中心(CIM)开发的人源化抗CD6单抗正在进行针对类风湿关节炎的I期临床试验。原来CIM开发过鼠源抗CD6单抗,并进行过治疗牛皮癣、类

单克隆抗体的制备

实验方法原理 使用聚二乙醇(PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株(杂交瘤细胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査(ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握),然后对理想的杂交瘤细胞加