第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)通知
当前,我国以疫苗和单抗药物为主要领域的生物制药研发已经初具规模,生物工程中下游的关键技术与配套基础正在加速建立与完善,国际生物产业的发展也将加快向中国转移。基因工程下游技术、蛋白质分离纯化技术等作为生物技术研究与产业化中的一线技术,在新产品开发、工艺流程优化、基因工程项目规划与实施等方面极为重要。鉴于目前生物技术相关专业中蛋白质纯化等下游技术课程较为薄弱的问题,中国生物工程杂志社定于2011年6月在北京举办“第11期蛋白质分离纯化技术专题研讨班(基础班)”。基础班旨在使生命科学研究与生物技术应用领域的专业人员在从事蛋白质实验工作中,能够建立系统规范的掌握蛋白质纯化的概念和知识。此外,与以往举办的专题研讨班不同,中高级班专题研讨班以掌握蛋白质分离纯化全面知识和国际最新进展为主体,基础班则是系统讲解与演示生物工程下游技术的基础知识与操作技能。 本期研讨班将邀请中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课,并结合大量实例具体讨论蛋......阅读全文
蛋白质分离纯化的方法及原理
蛋白质分离纯化的方法及原理,利用分子大小。1、透析:原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。方法:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行涉及的问题:如何加快透析过程(1)加大浓度差,及时更换透析液( 2)利用磁力搅拌器常用的半透的蛋白质。2、超
单克隆抗体的克隆化方法荧光激活分离法介绍
用一种荧光激活细胞分类器(FluoresceinActivafedCellSorter,FACS)。其基本原理是:将细胞经荧光抗体染色后,经喷嘴形成单个细胞的线形液滴,在莱塞光激发下,荧光素发射荧光,此信号由光电倍增管接收,再结合细胞形态大小产生光散射信号,经电脑处理,产生信号并与预定的信号对比,根
双水相萃取分离免疫球蛋白和单克隆抗体研究
抗体广泛用于疾病治疗、医疗诊断和免疫分离,具有广阔的市场需求和发展前景。抗体主要从动物血液、腹水和细胞培养液中分离得到,尤其是动物细胞培养制备单克隆抗体,已实现规模化生产。然而,目前抗体分离过程的成本仍旧较高,成为抗体产业发展的一个瓶颈,开发经济高效的抗体分离新方法,具有重要意义。双水相萃取具有生物
关于举办蛋白质组学技术与应用专题研讨班的通知(第一轮)
北京蛋白质组研究中心第一期蛋白质组学技术与应用高级培训班 (第一轮通知) 为进一步促进我国蛋白质组学技术发展及应用,北京蛋白质组研究中心、蛋白质组学国家重点实验室和中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会于2010年7月20-23日在北京中关村生命科学园联合举办“第一期蛋白质组
生物工程角膜研发成功
由我国科学家自主研发并拥有完整自主知识产权的生物工程角膜“艾欣瞳”,近日在北京正式面世。业界专家称,生物工程角膜研发成功,将缓解我国人体捐献角膜奇缺的临床困境,为角膜盲患者带来复明的希望。 这是记者23日在此间举行的“角膜盲防治创新论坛暨全球首个生物工程角膜启动仪式”上了解到的。据介绍,角膜盲
生物工程设备有哪些东西
生物工程设备主要的有:培养基制备设备、空气净化除菌设备、生物反应器、通风发酵设备、厌氧发酵设备、动植物细胞培养装置和酶反应器、微生物细胞破碎设备、过滤与离心以及膜分离设备、萃取与离子交换设备、蒸发和结晶设备、干燥设备、蒸馏设备、物料输送设备与产品包装设备、生物工程供水与制冷系统及设备。生物工程,一般
蛋白质特性与分离纯化技术的选择
摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言 蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂
蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(2)
二、氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离,纯化 1. NTA层析柱的准备:在层析柱中加入1mL NTA介质,并分别用8mL 去离子水,8mL上样缓冲液洗涤。 2. 重组蛋白的变性裂解:在冰浴中冻融菌体沉淀,加入5mL上样缓冲液, 用吸管抽吸重悬,超声波破裂菌体,用振荡器等轻
蛋白质的表达、分离、纯化实验——层析法
蛋白质表达、分离、纯化可以:(1)探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理;(2)供作结构与功能的研究;(3)作为催化剂、营养剂等。实验方法原理携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共
蛋白质特性与分离纯化技术的选择
摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。 关键词:蛋白质 分离纯化 前言 蛋白质
蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(1)
第一部分 蛋白质的表达、分离、纯化目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠
分离肽和蛋白质色谱柱的维护
1、使用常规要求pH:为了保证色谱柱长寿命,硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2~7,超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关,但是偏离2~7范围越远,色谱柱性能下降的越快。温度:典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命。缓冲溶液:生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的p
蛋白质分离纯化的一般程序
1、材料的预处理及细胞破碎 分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中稀释出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有: 1.1、机械破碎法 这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、
蛋白质分离纯化的一般程序
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有
蛋白质特性与分离纯化技术的选择
摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言 蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂
怎样利用高效液相色谱分离蛋白质
高效液相色谱纯化蛋白质一般是反相色谱和正相色谱两种柱子 反相色谱类似于疏水相互作用色谱,正相色谱类似于分子排阻色谱,都是针对纯化蛋白质的柱子。
蛋白质分离纯化的5种方法
蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动.根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等.3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法.4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋
蛋白质基均孔分离膜取得进展
近日,中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所研究员靳健课题组与王强斌课题组合作,利用具有特定孔道结构的烟草花叶病毒(TMV)衣壳蛋白组装体作为基元构筑超薄均孔膜,实现高精度、高通量分离。在这一工作中,研究人员首先通过基因工程在TMV基元侧面引入半胱氨酸基团,然后在铜离子的催化作用下,诱导基元间形成二
分离肽和蛋白质色谱柱的维护
1、使用常规要求 pH:为了保证色谱柱长寿命,硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2~7,超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关,但是偏离2~7范围越远,色谱柱性能下降的越快。 温度:典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液:生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动
凝胶层析法分离蛋白质操作方法
本实验通过SephadexG50层析柱,以蒸馏水为洗脱剂,分离血红蛋白(红色,分子量约64500)与硫酸铜(蓝色,分子量249.5)的混合物,从颜色的不同可观察到血红蛋白洗脱快,硫酸铜洗脱较慢。 三.材料 1.仪器 层析柱(直径0.8-1.5cm,长10-20cm);吸管;玻璃棒;小烧杯;2
Postnova场流分离系统:蛋白质聚集体分离解决方案
Postnova场流分离系统应用举例——蛋白质聚集体分离的理想解决方案 蛋白质聚集体已经成为药学发展和质检上一个重要的问题。其活性,生物利用度和可能的消极免疫响应等性能直接与不同程度的聚集态的存在有关。因此不仅FDA, 更多的官方和私人研究机构都对聚集态结构产生越来越大的兴
沃特世推出BioResolve-RP-mAb多苯色谱柱
为单克隆抗体和抗体偶联药物反相分离树立新标杆 美国马萨诸塞州米尔福德市,2018年2月1日 -沃特世公司近日隆重推出BioResolve RP mAb多苯, 450 Å, 2.7 μm实心核色谱柱,用于完整单克隆抗体(mAb)、mAb酶解亚基以及抗体偶联药物(ADCs)的LC-UV或LC-MS
首次在康复病人体内分离获得人源CCHFV单克隆抗体
2018年,世卫组织将包括埃博拉病毒、马尔堡病毒、MERS、SARS在内的10种病毒病列为优先考虑的传染性病原,其中也包括克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus,CCHFV)。 CCHFV是一类由蜱虫传播的可以引起严重出血热症状的
生物工程设备10问题及答案
1. 物料进行筛选除杂的原因?答:原料在收获、储藏和运输中会混入各种夹杂物,比如其他杂粮、混土块、沙子、小石块、碎木快、麻绳、草屑、铁器、螺丝、铁钉等各种杂物。2. 简述永磁筒的结构特征答:它是由上机体、铁磁滚筒、下机体、涡轮减速器及电动机等部分组成。上机体有进料口、淌板、压力门及观察窗的装置,物料
中国生物工程杂志增设CRISPR专栏
生物通“核心刊物”栏目创办于2002年,主旨在于向国内专业人士展示科研核心刊物,以及生命科学领域杂志每期重点内容,为读者呈现精彩纷呈的国内科研动向,和重大科研进展。目前包括《遗传》、《中国生物工程杂志》、《科学通报》等重点期刊,也欢迎生物类期刊联系合作(联系邮箱:journal@ebiotrad
低压液相分离层析仪操作连接(蛋白质纯化分离实验)
蛋白质纯化分离实验(本人长期安装各高校低压液相分离层析装置所得经验,以简单文字阐述,共大家参考,如需详细了解可咨询本)层析柱:基本原理:层析柱起到分离的作用,并且还可以加样品。连接:在实验中,支架先将层析柱固定好,上面进口与恒流泵的左边管相连,下面出口与核酸蛋白的下管进口相连(连接部可加一塑料软管)
分离和提纯蛋白质的基本原理
分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行 。原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。 2、超过滤:利用压力和离心力,强行使其他小分子和水通过半透膜,而蛋白质留在膜上。3、凝胶过滤层析。原理
蛋白质的表达、分离、纯化时注意事项
当蛋白大量的表达时,包含体的形成几乎是不可避免的,而且很难通过改变一些诱导条件来改变,最有效的办法就是换表达系统,所以如果时间还充分的话,可以尝试一下,如果时间较短了,还是安心的做包含体蛋白的处理算了,而且变性之后的蛋白通过一些方法复性率也可以达到60%以上。
蛋白质分离纯化的四种方法
1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱
分离和提纯蛋白质的基本原理
分离纯化蛋白质的方法及原理 (一)利用分子大小 1、透析:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行 。原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。 2、超过滤:利用压力和离心力,强行使其他小分子和水通过半透膜,而蛋白质留在膜上。3、凝胶过滤层析。原理