研究人员实现纤维小体原位关键酶的纯化及解析
纤维小体是细菌分泌的高效降解木质纤维素的多酶复合体,其高效降解机制及产纤维小体细菌的遗传改造是木质纤维素降解利用研究中的重要方向之一。热纤梭菌的Cel48S是其纤维小体的主要外切葡聚糖酶,是其纤维小体中含量最高的组分,在纤维素降解过程中起关键作用。但Cel48S的内在性质使得对Cel48S的纯化存在很大困难,文献中对该酶的性质鉴定报道存在诸多相互矛盾之处,与该酶在纤维小体中的重要作用并不相符,这使人们难以深入揭示纤维小体的高效降解机制。中国科学院青岛生物能源与过程研究所代谢物组学团队研究员崔球与冯银刚、副研究员刘亚君等,基于前期开发的热纤梭菌遗传改造工具,通过对纤维小体的定向改造,实现了对其原位Cel48S催化结构域的高效纯化,从而成功的对Cel48S的酶学与结构性质进行系统解析,揭示Cel48S在纤维小体中的真正作用。相关成果在线发表在Biotechnology for Biofuels上。 木质纤维素水解糖化是实现木质......阅读全文
研究人员实现纤维小体原位关键酶的纯化及解析
纤维小体是细菌分泌的高效降解木质纤维素的多酶复合体,其高效降解机制及产纤维小体细菌的遗传改造是木质纤维素降解利用研究中的重要方向之一。热纤梭菌的Cel48S是其纤维小体的主要外切葡聚糖酶,是其纤维小体中含量最高的组分,在纤维素降解过程中起关键作用。但Cel48S的内在性质使得对Cel48S的纯化
小体积全纤维箱式电阻炉
小体积全纤维箱式电阻炉类型按照加热温度的不同一般分为三种类型,温度高于1000℃称为高温箱式电阻炉,温度在600-1000℃之间称为中温箱式电阻炉,温度低于600℃称为低温箱式电阻炉,以满足不同热处理温度的需要。德清县万诚晶体纤维有限公司生产制造的箱式电阻炉炉膛则是结合新环保节能理念,耐火层和保温层
DNA纤维荧光原位杂交技术介绍
DNA纤维荧光原位杂交技术(DNA fiber- FISH)FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不
多色纤维荧光原位杂交实验
实验方法原理试剂、试剂盒培养细胞悬液PBS晕圈溶液牛血清白蛋白乙醇醚10 X 切口缓冲液核苷酸混合物Bio-16-dUTP二硫苏糖醇酵母 RNA鲑鱼精 DNASSCTNT 溶液TNB 溶液仪器、耗材微型离心机Camag UV 盒 II荧光显微镜探针DNA实验步骤一、制备含 DNA 纤维的载玻片标本大
研究揭示纤维小体转录调控因子的结构功能机制
纤维小体是一类可以高效降解木质纤维素生物质的多酶复合体,在生物质能源与合成生物学中具有广泛的应用价值。产纤维小体细菌根据底物种类调控纤维小体组分的表达,从而实现对特定底物类型的高效降解。在典型的产纤维小体细菌热纤梭菌中,一类特殊的σ和anti-σ因子SigI-RsgI负责感应底物并调控纤维小体基
纤维素酶能否酶解纤维素
成熟棉纤维的主要成分是纤维素,纤维素是天然高分子化合物,由葡萄糖分子按β-1,4糖苷键连接而成。棉纤维中大分子的排列比较复杂,纤维内某些区域由于大分子的横向吸引使大分子排列比较整齐密实,缝隙孔洞较少,这称为结晶区。相反,另一些区域大分子排列比较紊乱,堆砌比较疏松,其中有较多的缝隙孔洞,密度较低,这称
原位聚合酶链式反应(in-situ-PCR)和原位反转录聚合酶...
原位聚合酶链式反应(in situ PCR)和原位反转录聚合酶链式反应原位聚合酶链式反应(in situ PCR)和原位反转录聚合酶链式反应(in situ RT-PCR)操作规程 (一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤
DNA纤维荧光原位杂交技术的技术特点
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
青岛能源所热纤梭菌纤维小体功能研究取得进展
热纤梭菌(Clostridium thermocellum)纤维小体是自然界中最高效的纤维素降解系统。近日,中国科学院青岛生物能源与过程研究所代谢物组学团队博士研究生洪伟、研究员崔球、副研究员刘亚君等对热纤梭菌纤维小体所有脚架蛋白功能进行了系统分析,揭示了各种脚架蛋白和不同协同作用对纤维小体活性
最新研究揭示纤维小体中独特模块结构和组装机制
3月25日,记者从中国科学院青岛生物能源与过程研究所(以下简称青岛能源所)获悉,该所代谢物组学研究组解析了一种独特的纤维小体组装模块——双对接模块的结构和组装方式,揭示了纤维小体组装与调控的复杂性和多样性,为纤维小体复杂组装的研究和应用奠定了基础。该成果近日发表于国际期刊《蛋白质科学》。 作为
青岛能源所发现纤维小体“家传配方”的编码与控制机制
木质纤维素的高效降解是纤维素基液体燃料与沼气等清洁能源产业的关键瓶颈之一,也是生物圈碳循环和生态平衡的重要环节。近日,中国科学院青岛生物能源与过程研究所在纤维素生物降解机制研究中取得突破,发现了一种基于RNA选择性剪切与保护的崭新调控方式。该工作于4月24日在线发表于Nature Communi
最新研究揭示纤维小体中独特模块结构和组装机制
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519753.shtm3月25日,记者从中国科学院青岛生物能源与过程研究所(以下简称青岛能源所)获悉,该所代谢物组学研究组解析了一种独特的纤维小体组装模块——双对接模块的结构和组装方式,揭示了纤维小体组装与
什么是代谢关键酶?
代谢途径中决定反应的速度和方向的酶称为关键酶(key enzyme)。它常常催化一系列反应中的最独特的第一个反应。
关键酶的特点介绍
1、它催化的反应速度最慢,所以又称限速酶(rate-limiting enzymes)。其活性决定代谢的总速度。2、它常常催化单向反应或非平衡反应,其活性能决定代谢的方向。3、它通常处于代谢途径的起始部或分支处。4、它的活性除受底物控制外还受多种代谢物或效应剂的调节。
关键酶的主要作用
生物有三个层次的代谢调节,分别是:1、细胞水平的代谢调节。2、激素水平的代谢调节。3、整体水平的代谢调节。
原位聚合酶链式反应(in-situ-PCR)和原位反转录
一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程(一)原位PCR步骤1、预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min; (4)Nase消化组织37℃ 30min; (5)梯度酒精脱水,
麻纤维的酶应用
1、脱胶 目前,麻纤维的脱胶方法有化学脱胶、微生物脱胶以及生物与化学联合脱胶。脱胶中生物酶的利用主要是依据酶的高度专一性,其脱胶原理如下。 ①麻纤维生物酶脱胶将酶剂稀释在水中,浸渍原麻进行脱胶。微生物脱胶与常规化学脱胶相比,脱胶制成率、强力得到提高,残胶减少,所得精干麻手感松散、柔软,大大改善了
原位聚合酶链式反应和原位反转录聚合酶链式反应操作
(一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min;
DNA纤维荧光原位杂交技术的原理与应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于:(1)确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞;(2)来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液
原位聚合酶链式反应原位反转录聚合酶链式反应操作规程
(一)、 仪器 设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min; (4)Nase消化组织37℃ 30min; (5)梯度酒
原位聚合酶链式反应原位反转录聚合酶链式反应操作规程
(一)、仪器设备 英国 Thermo Hybaid 原位 PCR 仪。 (二)、操作流程 1 、原位 PCR 步骤 1 )预处理: ( 1 )切片常规脱蜡; ( 2 ) 0.2mol/L HCl 处理 10min ; ( 3 ) 5 μ
能量运输的关键ATP酶与GTP酶
ATP与ATP酶:ATP酶,又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。部分ATP酶是内在膜蛋白(Integral
纤维素酶(抛光酶)的特性
☆酸性纤维素酶:对棉纤维作用力最强,可以在较短时间达到效果;对织物强力损伤大,而且容易引起反沾色; ☆中性纤维素酶:对棉纤维的作用比酸性纤维素弱,达到同等的效果需要较长的时间或较高的酶浓度进行处理;对织物损伤小;如果工艺处置恰当,可以很少、甚至没有返色。
开启阻断肿瘤的关键酶
不同于普通细胞,癌细胞将大部分的能量用于自我增殖。为此,它们必须启动生成诸如DNA、碳水化合物和脂类等新细胞构成元件的替代性代谢信号通路。 根据8月26日在线发布在《自然化学生物学》(Nature Chemical Biology)杂志上,由麻省理工学院领导的一项研究,用化合物破坏对这
PNAS:癌症复发的关键酶
慢性粒细胞性白血病CML是一种血液和骨髓癌,其患病率正在逐年增加。日前,加州大学圣迭戈分校医学院的研究人员发现,在促进干细胞恶意增殖和CML发展的重编程过程中存在着一种关键的酶。这一发现提前发表在十二月二十四日美国国家科学院院刊PNAS杂志的网站上。 美国目前有七万人患有CML,预计到20
纤维素酶简介
CAS编码 9012-54-8英文通用名称 Cellulase中文通用名称 纤维素酶 [进入食品百科查看-- 纤维素酶 的信息]性状描述 灰白色无定形粉末或液体。主要作用原理为使纤维素的多糖中β-1,4-葡萄糖水解为β-糊精。作用的最适pH值为4.5~5.5。对热较稳定,即使在100℃下保持min仍
DNA纤维荧光原位杂交技术(DNA-fiber-FISH)介绍
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
干法纺聚酰亚胺纤维关键技术获奖
近日,2015年香港桑麻基金会颁奖典礼在浙江理工大学举行,东华大学材料学院的“干法纺聚酰亚胺纤维工程化关键技术及成套设备研发”获得2015年香港桑麻基金会纺织科技奖特等奖。 该成果形成了具有自主知识产权的聚酰亚胺纤维制备路线,并建成了1000吨/年生产线;使用该技术制作成的聚酰亚胺纤维袋式除尘
漆酶对天然纤维素纤维的改性
漆酶对天然纤维素纤维的改性众所周知,木质素是植物细胞壁的主要组分之一,起支撑作用。根据麻纤维种类的不同,木质素含量也有所不同,约为1%~12%;从结构上来看,其属于芳香类化合物,分子中含有酚羟基[17]。木质素的含量对纤维的品质及染色性能都有很大影响。一般通过氯化或氧化作用将木质素去除,但这样会产生