液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有高效、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测生物物质如血浆或血清等积累在反相色谱柱上，必须采用不同与其他物质的清洗方法。大部分情况下，纯有机溶剂如乙晴或甲醇不溶解多肽和蛋白质，因此不能有效地清洗柱子。反而，有机溶剂和缓冲液、酸、离子对试剂等的混合物则能有效地溶解。为确保液相色谱柱再生的效果，建议在使用溶剂冲洗色谱柱之前，了解色谱柱的填料类型以及确保使用的溶剂能与柱子的填料相容。硅胶基质的柱子通常来说都是相容的，但有机聚合物基质的柱子可能会在某些溶剂组合中膨胀或收缩，这样会影响色谱柱的柱效。 在......阅读全文
高效液相色谱（HPLC）柱子的清洗和再生
1． 柱子的清洗 即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完成避免柱子受到污染，因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行，如果在短期内分析许多样品，则以每日清洗一次为宜，至少也应一周一次，防止有太多的杂质在柱上堆积。 反相柱的常规洗涤办法是：分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积（既对于一根4
【分享】液相色谱系统的清洗与钝化
液相色谱的色谱泵洗滤头，进出口阀及管路（包括进样器和检测池）若被污染，应做清洗剂和钝化处理 一般采用30%磷酸水溶液做清洗剂，用6M硝酸做钝化剂，先清洗再钝化。 清洗的目的是去除不锈钢管路及系统内的污垢。 钝化的目的是使不锈钢管路的内表面形成光滑均匀的氧化膜。 清洗液用30%磷酸
高效液相色谱中色谱柱可以反过来清洗吗？
高效液相色谱中的色谱柱可以反过来清洗吗？考虑到填充柱的稳定性，大多数高效液相色谱柱的填充压力远远高于正常操作压力，因此它们的床层不应受到反向流速的影响。然而，如果头部的烧结直径大于尾部的烧结直径，例如，尾部烧结的孔径为2μm，这通常可以保持填料的平均孔径为5μm。 有时制造商会允许头部具有较大的孔
快速液相制备色谱柱的使用和清洗方法
使用方法：样品保持洁净，最好提前除掉不溶和强保留杂质，可以对样品进行一定的前处理如：SPE、过滤膜。同时对溶解度差的样品尽量采用固体上样法。 冲洗方法： 1）对于污染物，首先采用醇类冲洗（甲醇、乙醇、异丙醇，推荐异丙醇）5-10倍柱体积，如无法除去可采用强洗脱溶剂（四氢呋喃、三氯甲烷等）5-
液相色谱中的柱塞清洗是怎么回事
流动相析出的盐粒会造成系统堵塞，对泵产生 较大的损害。为了延长密封圈和柱塞杆的寿命，在经常使用较高浓度的缓冲盐溶液的情况下，一般需要进行柱 塞清洗。柱塞清洗的原理在于:柱塞泵在工作时，虽然有密封圈密封，但由于毛细作用，还是会有一 些流动相渗入到密封圈与柱塞杆之间。如果流动相中有缓冲盐，当柱塞杆壁上的
高效液相蛋白质色谱仪种类
高效液相蛋白质色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分：实验室高效液相蛋白质色谱仪和工业高效液相蛋白质色谱仪。2、按功能可分：分析型高效液相蛋白质色谱仪和制备型高效液相蛋白质色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分：正相高效液相蛋白质色谱仪和反相高效液相蛋白质色谱仪。4、按灵敏性可分：微量高效液相蛋白
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capture chromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步zui关心的是流速和载量，常采用
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capture chromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography)，主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography)，主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography)，主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速凝
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography)，主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量
怎样利用高效液相色谱分离蛋白质
高效液相色谱纯化蛋白质一般是反相色谱和正相色谱两种柱子 反相色谱类似于疏水相互作用色谱，正相色谱类似于分子排阻色谱，都是针对纯化蛋白质的柱子。
液相色谱自动进样针的使用与清洗
液相色谱自动进样针的使用与清洗液相自动进样针具有平滑的针头，减少垫穿形成碎屑的可能性，并使您的系统保持最佳状态工作； 加强进样功能，使您的自动进样器的行程机制完美匹配，达到更精确的进样量； 使用一针带来两个好处。液相自动进样针的使用方法1.使用前，检查针尖有无毛刺，针头有无卷曲和裂缝。2.为了消除样
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（三）
2、纯化前的准备工作 （1）样品稳定性试验 a、测定样品在pH2-9的稳定性；b、测定样品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸铵中的稳定性；c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性；d、测定样品在4-40℃的稳定性；e、室温下静置过夜，测定对蛋白水解酶的稳定性。（2）样品预处理 a、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（一）
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capturechromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速凝
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器，占据着有机实验室的统治地位，虽然同做有机检测，但就两个仪器本身也有着较大区别，小析姐从以下5个方面进行了比较。气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技术之一
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器，占据着有机实验室的统治地位，虽然同做有机检测，但就两个仪器本身也有着较大区别，小析姐从以下5个方面进行了比较。 气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技
走完液相怎样清洗机器
液相色谱使用及维护相关知识 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成.有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、柱温控制器等。 一、 输液泵 1. 泵的构造及原理 目前高效液相输液泵多用柱塞往复泵，一般都采用双泵补偿法。如图所示： 泵1的缸体容量是泵2的两
液相小瓶专用清洗栏架介绍
验室清洗机纯水系统整套配置色谱进样瓶是实验室常用的器皿，但是清洗过程是非常繁琐的，有可能会出现清洗不测底，造成分析数据的偏差，影响到实验进度。使用实验室专用清洗机配合专用的清洗栏架可以轻松的完成清洗工作，并且为实验室提供了可验证、可重复的实验结果。全注射清洗栏架：采用独特设计的托架，单层可清洗200
怎样清洗高效液相的系统
装双通，流速0.5~1ml/min反相系统：10%、30%、50%甲醇按顺序冲洗100ml，70%甲醇冲30ml正相系统：流动相、用于过渡到水的溶剂各100ml以上，水有时间就多冲点，最后再从低浓度的甲醇慢慢置换回70%甲醇（正相有些实验比较麻烦，注意流动相之间的相容问题就好）
液相小瓶子的清洗方法
把样液倒掉。把小瓶子放到洗涤灵水中超声30min以上。换水，再放入洗涤灵水超声。如此超声3次。注意要让让瓶子里浸入洗涤灵水。把小瓶子捞出后用自来水清洗3遍，然后用纯净水清洗2遍。把瓶子瓶口朝上，放入烘箱烘干。如果同时烘干瓶盖的话，温度最好不要超过50℃。如果样液不易溶于水，可以考虑用乙醇，或者其他有
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所
奶制品蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography)，主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col