蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

修饰肽纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝胶。 经过浓缩的部分纯化的样品进行中级色谱(intermediate chromatography),目的是去除较难去除的杂质,此步最关心的是分辨率,常采用高分辨率的细颗粒凝胶。 最后为了得到符合要求的最终产品,去除残存的杂质以及目的蛋白的多聚物或者降解片断,进行精制色谱(polishing chromatography),常采用具有高分辨率的凝胶过滤凝胶进行凝胶过滤色谱。 2、修饰肽纯化前的准备工作 (1)样品稳定性试验 a、测定样品在pH 2-9的稳定性; ......阅读全文

关于膜蛋白色谱的介绍

  CMP+分离强蔬水性蛋白、多肽混合物的层析系统,一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端),又具有阳离子钙(C-端),与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS 结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的

快速蛋白液相色谱(FPLC)简介

  FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统,FPLC为近年来的一项重要革新,其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来,其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展,有薄壳型填料和双扩

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论快速蛋白液相色谱(FPLC)、中压液相色谱(MPLC)、低压液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及

使用疏水色谱和亲和色谱纯化蛋白质介绍

疏水色谱:疏水色谱基于蛋白质表面的疏水区与介质疏水配体间的相互作用,在高浓度盐作用下,蛋白质的疏水区表面上有序排列的水分子通过盐离子的破坏被释放,裸露的疏水区与疏水配体相互作用而被吸附。疏水色谱就是利用样品中各组分在色谱填料上配基相互作用的差异,在洗脱时各组分移动速度不同而达到分离的目的。随着盐离子

蛋白质组色谱仪种类

  蛋白质组色谱仪种类有多种。 1、按功能可分:分析型蛋白质组色谱仪和制备型蛋白质组色谱仪。 2、按分离目的可分:实验室蛋白质组色谱仪和工业蛋白质组色谱仪。 3、按应用范围可分:专用型蛋白质组色谱仪和通用型蛋白质组色谱仪。 4、按作用可分:蛋白质组定量分析色谱仪和蛋白质

蛋白质凝胶色谱仪分类

蛋白质凝胶色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:蛋白质凝胶实验室色谱仪和蛋白质凝胶工业色谱仪。2、按功能可分:蛋白质凝胶分析色谱仪和蛋白质凝胶制备色谱仪。3、按结构可分:台式蛋白质凝胶色谱仪和落地式蛋白质凝胶色谱仪。4、按分离规模可分:微型蛋白质凝胶色谱仪、小型蛋白质凝胶色谱仪和大型蛋白质凝胶色谱仪

手性色谱柱——蛋白质型

   蛋白质型手性色谱柱属于第5种类型。分离依赖于疏水相互作用和极性相互作用。已经有多种蛋白质用于此类手性色谱柱。目前使用较多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA),牛血清白蛋白(Bovine Serum

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱的异同讨论

快速蛋白液相色谱(FPLC)、中压液相色谱(MPLC)、低压液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及药物生产上使用越来越广泛。(1)FP

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱的异同讨论

快速蛋白制备液相色谱(FPLC)、中压制备液相色谱(MPLC)、低压制备液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及药物生产上使用越来越广泛。

制备型蛋白质色谱仪分类

制备型蛋白质色谱仪分类有多种。 1、按分离目的可分:实验室制备型蛋白质色谱仪和工业制备型蛋白质色谱仪。 2、按产地可分:国产制备型蛋白质色谱仪和进口制备型蛋白质色谱仪。 3、按洗脱方式可分:等度洗脱制备型蛋白质色谱仪和梯度洗脱制备型蛋白质色谱仪。 4、按应用范围可分:制备型蛋白质专用色谱仪

分析型蛋白酶色谱仪种类

分析型蛋白酶色谱仪种类有多种。 1、按分离目的可分:实验室分析型蛋白酶色谱仪和工业分析型蛋白酶色谱仪。 2、按固定相和流动相的极性大小可分:正相分析型蛋白酶色谱仪和反相分析型蛋白酶色谱仪。 3、按检测器属性可分:质量型检测器分析型蛋白酶色谱仪和浓度型检测器分析型蛋白酶色谱仪。 4、按洗脱方

分析型蛋白质色谱仪类型

分析型蛋白质色谱仪类型有多种。 1、按分离目的可分:分析型蛋白质化验室色谱仪和分析型蛋白质工业色谱仪。 2、按分离原理可分:分析型蛋白质分配色谱仪、分析型蛋白质离子交换色谱仪和分析型蛋白质凝胶色谱仪。 3、按色谱柱形状可分:填充柱分析型蛋白质色谱仪和毛细管柱分析型蛋白质色谱仪。 4、按进样

蛋白质凝胶工业色谱仪分类

蛋白质凝胶工业色谱仪分类有多种。1、按分离规模可分:小型蛋白质凝胶工业色谱仪和大型蛋白质凝胶工业色谱仪。2、按作用可分:蛋白质凝胶工业定量色谱仪和蛋白质凝胶工业定性色谱仪。3、按产地可分:国产蛋白质凝胶工业色谱仪和进口蛋白质凝胶工业色谱仪。4、按洗脱方式可分:等度洗脱蛋白质凝胶工业色谱仪和梯度洗脱蛋

分析型蛋白质色谱仪类型

分析型蛋白质色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分:分析型蛋白质化验室色谱仪和分析型蛋白质工业色谱仪。2、按分离原理可分:分析型蛋白质分配色谱仪、分析型蛋白质离子交换色谱仪和分析型蛋白质凝胶色谱仪。3、按色谱柱形状可分:填充柱分析型蛋白质色谱仪和毛细管柱分析型蛋白质色谱仪。4、按进样自动性可分:自动进

蛋白质组色谱仪分类方法

蛋白质组色谱仪种类有多种。1、按功能可分:分析型蛋白质组色谱仪和制备型蛋白质组色谱仪。2、按分离目的可分:实验室蛋白质组色谱仪和工业蛋白质组色谱仪。3、按应用范围可分:专用型蛋白质组色谱仪和通用型蛋白质组色谱仪。4、按作用可分:蛋白质组定量分析色谱仪和蛋白质组定性分析色谱仪。5、按分离特征可分:高选

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法

   1、纯化的一般目标和方法  首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。  然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载

蛋白质制备液相色谱仪分类方法

蛋白质制备液相色谱仪分类方法有多种。 1、按分离目的可分:实验室蛋白质制备液相色谱仪和工业蛋白质制备液相色谱仪。 2、按产地可分:国产蛋白质制备液相色谱仪和进口蛋白质制备液相色谱仪。 3、按分离规模可分:小型蛋白质制备液相色谱仪和大型蛋白质制备液相色谱仪。 4、按应用范围可分:专用型蛋白质制备液相

蛋白质专用色谱仪的类型

蛋白质专用色谱仪的类型有多种。1、按分离目的可分:实验室蛋白质专用色谱仪和工业蛋白质专用色谱仪。2、按功能可分:分析型蛋白质专用色谱仪和制备型蛋白质专用色谱仪。3、按色谱柱形状可分:填充柱蛋白质专用色谱仪和毛细管蛋白质专用色谱仪。4、按灵敏度可分:微量蛋白质专用色谱仪和痕量蛋白质专用色谱仪。5、按洗

蛋白质制备液相色谱仪分类方法

蛋白质制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室蛋白质制备液相色谱仪和工业蛋白质制备液相色谱仪。2、按产地可分:国产蛋白质制备液相色谱仪和进口蛋白质制备液相色谱仪。3、按分离规模可分:小型蛋白质制备液相色谱仪和大型蛋白质制备液相色谱仪。4、按应用范围可分:型蛋白质制备液相色谱仪和通用型

蛋白质制备液相色谱仪分类方法

蛋白质制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室蛋白质制备液相色谱仪和工业蛋白质制备液相色谱仪。2、按产地可分:国产蛋白质制备液相色谱仪和进口蛋白质制备液相色谱仪。3、按分离规模可分:小型蛋白质制备液相色谱仪和大型蛋白质制备液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型蛋白质制备液相色谱仪和通

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝

高效液相蛋白质色谱仪种类

高效液相蛋白质色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:实验室高效液相蛋白质色谱仪和工业高效液相蛋白质色谱仪。2、按功能可分:分析型高效液相蛋白质色谱仪和制备型高效液相蛋白质色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相高效液相蛋白质色谱仪和反相高效液相蛋白质色谱仪。4、按灵敏性可分:微量高效液相蛋白

蛋白酶制备液相色谱仪分类方法

蛋白酶制备液相色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:化验室蛋白酶制备液相色谱仪和工业蛋白酶制备液相色谱仪。2、按分离规模可分:小型蛋白酶制备液相色谱仪和大型蛋白酶制备液相色谱仪。3、按产地可分:国产蛋白酶制备液相色谱仪和进口蛋白酶制备液相色谱仪。4、按应用范围可分:专用型蛋白酶制备液相色谱仪和通

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

 修饰肽纯化的一般目标和方法    首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步zui关心的是流速和载量,常采用

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、

怎样利用高效液相色谱分离蛋白质

高效液相色谱纯化蛋白质一般是反相色谱和正相色谱两种柱子 反相色谱类似于疏水相互作用色谱,正相色谱类似于分子排阻色谱,都是针对纯化蛋白质的柱子。

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

修饰肽纯化的一般目标和方法   首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。   然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载

高效亲和色谱法测定血浆蛋白结合率

  高效亲和色谱法用于测定药物与血浆蛋白的结合,可由药物的迁移变化率的连续变化计算出药物与蛋白的结合常数。色谱系统良好的精密度和重现性可提供大量结合作用的对比研究,并易于与MS等技术联用。该方法允许多种药物同时进样,并可同时测定多种药物与蛋白的结合常数,对立体选择性蛋白结合的研究非常有用。  高效亲

分离肽和蛋白质色谱柱的维护

1、使用常规要求pH:为了保证色谱柱长寿命,硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2~7,超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关,但是偏离2~7范围越远,色谱柱性能下降的越快。温度:典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命。缓冲溶液:生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的p