外行看热闹，内行看门道：从低温冷冻电镜的近热看创新
外行看热闹 前两年听说低温冷冻电镜在测量蛋白质结构方面有大的突破，分辨率已经可以和最好的X射线晶体结构测定不相上下，而且不用再辛辛苦苦培养蛋白晶体，很可能近期会有人得诺贝尔奖之类。 维基百科上关于Cryo-EM的介绍链接：http://en.wikipedia.org/wiki/Cryo-electron_microscopy 因为研究领域不同，我对低温冷冻电镜（Cryo Electron Microscopy, Cryo-EM）完全是外行。常言道，外行看热闹，内行看门道。作为不合格的外行，我一直连热闹都没来得及去看。 几个月前偶然在实验室听美国Baylor医学院（Baylor College of Medicine）华裔教授Wah Chiu有关Cryo-EM病毒结构测量的报告，我才想起来去年夏天回北京中关村中科院物理所开超快光谱会的时候，有天晚上去清华大学和几个做生物学研究的几个海龟朋友聊天吃饭之后，去参观了一下清......阅读全文
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍（二）
通过冷冻断裂生成图像 冷冻断裂和冷冻蚀刻技术往往采用高真空精细镀膜技术，将超细腻重金属和碳薄膜沉积于断裂表面。冷冻断裂样本在一定角度下用金属覆盖，然后在碳背衬膜（徕卡EM ACE600冷冻断裂或徕卡EM ACE900与徕卡EM VCT500）上生成复型进行TEM成像或在SEM的试块面上进行成像。对于
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍（一）
揭示生物学样本和材料样本原本无法观察到的内部结构 冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术
A型流感病毒RNA聚合酶复合体的三维冷冻电镜结构被揭示
1月22日，Molecular Cell 杂志在线发表了题目为Cryo-EM Structure of Influenza Virus RNA Polymerase Complex at 4.3 Å Resolution 的流感病毒RNA聚合酶复合体的结构和功能研究方面的研究成果。 流感病毒属
研究解析糖皮质激素与GPR97和Go蛋白复合物冷冻电镜结构
中国科学院上海药物研究所研究员徐华强团队与山东大学教授孙金鹏团队、浙江大学教授张岩团队等首次解析了糖皮质激素与其膜受体GPR97和Go蛋白复合物的冷冻电镜结构，这也是国际上首次解析的黏附类GPCR与配体和G蛋白复合物的高分辨率结构。相关研究成果以Structures of glucocortic
清华大学生命科学院博士样品在液氮环境下进入冷冻电镜
5月29日，清华大学生命科学院博士生张森森的蛋白样品9时准时在液氮环境下进入冷冻电镜。几天后，埃（10-10）级精度的蛋白质“高清3D彩照”将出炉。研究人员可以“直视”单个蛋白质的分子结构，并解出生命运转机理。 这期间，冷冻电镜中的电子枪将持续发射电子，每次看一个小单元。为了解释这个“小单元”
Nature北大通过冷冻电镜解析－人源26S蛋白酶体全酶结构
北京大学物理学院/定量生物学中心/生命联合中心欧阳颀院士课题组、毛有东课题组与其合作者利用冷冻电子显微镜技术解析了人源蛋白酶体26S全酶的三个亚稳简并态高分辨结构，在同一样品中得到了蛋白酶体核心颗粒（Core Particle，简称CP）底物转运通道的关闭和开放两种状态的近原子分辨的三维动态结构
快速冷冻和缓慢冷冻哪种方法好
快速冷冻和缓慢冷冻哪种方法好速冻的好，还可以减肥。迅速冷冻使食物形成极小的冰晶,不严重损伤细胞组织,从而保存了食物的原汁与香味,且能保存较长时间。如何通过冷冻食品快速减肥 ：美国的研究者称，对于减肥者的饮食来说，食物的体积也是影响减肥效果的因素之一。有营养的冷冻食品消费方便，可以作为控制食物体积的方
冷冻离心机的冷冻有什么作用
离心机就是利用离心力使得需要分离的不同物料得到加速分离的机器。冷冻离心机有分为低速、高速冷冻离心机，以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。 转速一般不超过4000rpm，最大容量为2—4L，是实验室最常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种，离心管
扫描电镜和投射电镜的区别
他们之间参数、原理就不说了，很好搜到。可以这样理解 ：扫描电镜看到的是物体的表面轮廓，产生真实的立体感图像。如下图而透射电镜可以看到清楚的物体内部结构，如右图
比较透射电镜和扫描电镜
1、结构差异：主要体现在样品在电子束光路中的位置不同。透射电镜的样品在电子束中间，电子源在样品上方发射电子，经过聚光镜，然后穿透样品后，有后续的电磁透镜继续放大电子光束，最后投影在荧光屏幕上；扫描电镜的样品在电子束末端，电子源在样品上方发射的电子束，经过几级电磁透镜缩小，到达样品。当然后续的信号探测
台式扫描电镜替代传统电镜的原因
台式扫描电镜具备样品表面微观形貌观测和表面元素成分点、线、面分析，将电镜和能谱在生产环节集成在一台设备中，后期通过一个软件平台控制操作，用户只需要熟悉一个软件就能同时操控两项功能，也变得相对简单快速。 台式扫描电镜是扫描电镜能谱行业的一个里程碑。亮度10倍于钨灯丝不仅使电镜能谱一体机提供高的台
专访尹长城教授：技术发展带来革命性突破
Ryanodine受体（RyR）是一类巨大的离子通道，介导多种细胞的钙离子信号传导，在肌肉的兴奋-收缩偶联中起到了关键性作用。不过，人们对RyR通道的激活和调控机制一直知之甚少。北大基础医学院的尹长城教授和中科院生物物理研究所的孙飞研究员最近在这方面取得了突破，他们领导团队通过冷冻电镜揭示了Ry
从“看人影”到“辨雀斑”－中国研发没使上劲
“如今，中国只有一家企业生产扫描电镜，透射电镜完全不生产了。”陈宝庆说，德国蔡司公司也停止了透射电镜的生产，目前世界上生产透射电镜的厂商只有3家，分别是日本电子、日立、FEI（2016年被赛默飞公司以42亿美元收购。） 没有市场是设备巨头纷纷放弃透射电镜的原因。“透射电镜之前的清晰度，使得冷冻
冷冻细胞活化
实验概要1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。实验材料材料： 37 ℃ 恒温水槽 新鲜培养基 无
冷冻切片操作
1.冷冻切片机要始终处于运行状态，即使在不做冷冻切片时也要开着致冷，不能时开时关，以免影响机器寿命。2.手术取下的新鲜组织不要固定，因固定过的组织不利于切片，而且还会影响染色。3. 用OCT做包埋剂，起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上，OCT不要太多，以免流到固定头外，组织表
细胞冷冻保存
实验概要细胞的冷冻保存实验材料材料： 1 生长良好之培养细胞 2 新鲜培养基 3 DMSO (Sigma D-2650) 4 无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 5 0.4 ％ w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 6 血球计数盘
冷冻扫描电子显微镜
冷冻扫描电子显微镜扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织的含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。 冷冻扫描电镜（Cryo-SEM）技术是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法。这种技术还被广泛地用于观
电镜支持膜
中文名称支持膜英文名称supporting film定 义敷于电镜载网上的一层薄膜。能够耐受电子束的轰击，用于支持超薄切片。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
扫描电镜
扫描电子显微镜(SEM)是1965年以后才迅速发展起来的新型电子仪器。其主要特点可归纳为：①仪器分辨率高；②仪器的放大倍数范围大，一般可达15～180000倍，并在此范围内连续可调；③图像景深大，富有立体感；④样品制备简单，可不破坏样品；⑤在SEM上装上必要的专用附件——能谱仪(EDX)，以实现一机
高分辨电镜
高分辨电镜是用来观察很薄试样的相位衬度像的其有厚尺度分辨本领的透射电镜。 高分辨电镜通常指用来观察很薄试样的相位衬度像（点阵像和结构像)的其有厚尺度分辨本领的透射电镜.若将电子的加速电压提高到1 Llf if 1k G"，则观察试样nJ厚达数}xm,这种电镜称为超高压I}}l分辨电镜
扫描电镜
扫描电子显微镜(SEM)是1965年以后才迅速发展起来的新型电子仪器。其主要特点可归纳为：①仪器分辨率高；②仪器的放大倍数范围大，一般可达15～180000倍，并在此范围内连续可调；③图像景深大，富有立体感；④样品制备简单，可不破坏样品；⑤在SEM上装上必要的专用附件——能谱仪(EDX)，以实现一机
电镜载网
中文名称载网英文名称grid定 义载持电镜切片标本的金属网。直径一般3 mm。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
扫描电镜
扫描电子显微镜(SEM)是1965年以后才迅速发展起来的新型电子仪器。其主要特点可归纳为：①仪器分辨率高；②仪器的放大倍数范围大，一般可达15～180000倍，并在此范围内连续可调；③图像景深大，富有立体感；④样品制备简单，可不破坏样品；⑤在SEM上装上必要的专用附件——能谱仪(EDX)，以实现一机
了解几种电镜
大型透射电镜 大型透射电镜（conventional TEM）一般采用80-300kV电子束加速电压，不同型号对应不同的电子束加速电压，其分辨率与电子束加速电压相关，可达0.2-0.1nm，高端机型可实现原子级分辨。低压透射电镜 低压小型透射电镜（Low-Voltage
免疫电镜技术
近年来，免疫学方法与电镜技术相结合，形成了一种免疫电镜技术(Immunoelec-tronmicroscopy，IEM)，使抗原定位达到了亚细胞水平。该技术由以下环节组成：(一) 组织准备 用于免疫电镜检测的组织多种多样，所以各自在组织制备时都具有其特点。一般讲，组织力新鲜并进行无活动力状态处理，例
扫描电镜
扫描电子显微镜(SEM)是1965年以后才迅速发展起来的新型电子仪器。其主要特点可归纳为：①仪器分辨率高；②仪器的放大倍数范围大，一般可达15～180000倍，并在此范围内连续可调；③图像景深大，富有立体感；④样品制备简单，可不破坏样品；⑤在SEM上装上必要的专用附件——能谱仪(EDX)，以实现一机
我国学者联合揭示人源TRPC6和TRPC3通道的冷冻电镜结构
北京大学分子医学研究所等联合在《细胞研究》杂志发表《人源受体激活的TRPC6和TRPC3通道结构》（Structure of the receptor-activated human TRPC6 and TRPC3 ion channels），报道了人源TRPC6（3.8Å）和TRPC3（4.4
冷冻离心机冷冻效果差的原因分析
冷冻离心机因为离心腔内温度需要到零下才能达到理想的离心效果，有些外界因素会影响到离心效果，特总结如下：1.环境温度过高，离心室内温度过高；2.离心机放置得离墙太近3.制冷系统中冷媒泄露或混入空气，制冷管道受阻不畅或断裂；4.冷凝器内散热片被灰尘阻塞或冷风机不运转；5.修理后重新灌入的冷媒量过多或过少
透射电子显微镜分类的相关介绍
大型透射电镜 大型透射电镜（conventional TEM）一般采用80-300kV电子束加速电压，不同型号对应不同的电子束加速电压，其分辨率与电子束加速电压相关，可达0.2-0.1nm，高端机型可实现原子级分辨。 低压透射电镜 低压小型透射电镜（Low-Voltage electron
透射电子显微镜的主要类型介绍
大型透射电镜大型透射电镜（conventional TEM）一般采用80-300kV电子束加速电压，不同型号对应不同的电子束加速电压，其分辨率与电子束加速电压相关，可达0.2-0.1nm，高端机型可实现原子级分辨。低压透射电镜低压小型透射电镜（Low-Voltage electron microsc