制备“微生物”检测培养基细节问题
一、称取 用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量,然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基不需要加热;如果含有琼脂,则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸,完全溶解后,再补齐所需水,并搅拌均匀(如图3所示)。如果配制的培养基量很大,可用不锈钢锅加热溶化,可先用温水加热并随时搅动,防止焦化,如有焦化现象,配制的培养基就不能使用,要重新配制。 配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化,因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标,影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L,细菌不宜生长,铁含量超过0.14mg/L,妨碍细菌产毒素)。对容易发生反应,产生沉淀的药品,要分开溶解,最后加入培养基,如磷酸氢二钾......阅读全文
制备微生物检测培养基细节问题
一、称取 用度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量,然后用天平称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基
卵黄琼脂培养基
成分 1 基础培养基 肉浸液 1000mL 蛋白胨 15g 氯化钠 5g 琼脂 25~30g pH7.5 2 50%葡萄糖水溶液。 3 50%卵黄盐水悬液。制法 制备基础培养基,分装每瓶100mL。121℃高压灭菌15min
单克隆抗体的克隆化方法软琼脂平板法介绍
软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长,而达到克隆化,具体操作如下:1.配2.5%的琼脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。2.将117ml完全DMEM液和3ml10倍浓度的DMEM液混合,置45℃水浴预热。3.将琼脂糖与DMEM液混合,即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液,并加75×1
细菌培养及CaCl2法制备感受态细胞2
[9].制作平板培养基:将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10ml,以铺满皿底为度。铺放培养基后放置15min左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,
固体培养基的配置有哪些
一、极限培养基平板 800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml培养基(每升培养基可制作25〜30个平板)。于室温干燥2〜3天,或将平板的上盖稍 微打开,于37°
细菌的人工培养
人工制备营养充足的培养基并提供适宜的温度、气体、pH等培养条件,即能使细菌 在体外环境迅速生长繁殖。细菌培养对临床上病原菌的分离鉴定、制备抗生素、制备疫苗等生物制品都是必不可少的。 一、培养基的制备原则: 1、必须有充足的营养。 2、合适的酸碱度。 3、绝对无菌。 二、培养基的制备 培
细菌培养技术
给细菌提供适宜的条件,细菌即可以生长繁殖,形成具有一定特征的培养物,学习细菌培养技术可以纯化细菌,了解细菌的生长特征,并能进一步检测细菌生化反应、变异性,制备细菌抗原 ,深入进行分子生物学工作等。了解细菌的培养特征也有助于鉴别细菌。 细菌 培养基的制备 培养基是用人工方法将适合细菌生长繁殖的
教你一招丨需氧培养法
在日常检测中,大多数的细菌、放线菌、霉菌培养法均为需氧培养。培养基接种微生物后放于35 ℃~37 ℃或25℃恒温培养箱(或水浴箱)中,培养18 h-24h或3d-5d,大多数菌能达到指数期,可以进行计数及鉴定。需氧培养法按培养基的状态来分,可分为三类。一、固体培养法固体培养法是指将微生物接种在固体培
需氧培养法
在日常检测中,大多数的细菌、放线菌、霉菌培养法均为需氧培养。培养基接种微生物后放于35 ℃~37 ℃或25℃恒温培养箱(或水浴箱)中,培养18 h-24h或3d-5d,大多数菌能达到指数期,可以进行计数及鉴定。需氧培养法按培养基的状态来分,可分为三类。一、固体培养法固体培养法是指将微生物接种在固体培
固体培养基配制
试剂、试剂盒 琼脂胰化蛋白胨NaClNaOH四环素仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 一、极限培养基平板800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml 培养基(每升培
固体培养基配制实验
固体培养基可以分为两类:(1)一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;(2)另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观
微生物的实验室培养
1. 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础。2. 常见的培养基包括:液体状态的液体培养基,可用于工业生产;添加了凝固剂(如琼脂)的固体培养基,常用于微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏等,微生物在固体培养基表面生长可形成肉眼可见的菌落。
微生物检验培养与分离方法
大多数细菌均可以通过人工方法培养,而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法 根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。1.平板划线分离培养法 对混有多种细菌的临床标本,采用划
微生物纯培养与生长量测定(一)
一、微生物纯培养技术微生物在自然界中不仅分布广,而且种类多,并多是混杂地生活在一起。要想研究或利用某一微生物,必须把混杂的微生物类群分离开来,以得到只含一种微生物的纯培养。微生物学中将在实验室条件下由一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为微生物的纯培养。纯培养技术包括两个基本步骤:① 从自然环境中分
食品微生物检验规范!
1. 稀释液的制作磷酸盐缓冲稀释液 贮存液: 磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 蒸馏水 500mL 用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2(图1-1、1-2),用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液:用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器
食品微生物检验规范
1. 稀释液的制作磷酸盐缓冲稀释液 贮存液: 磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g 蒸馏水 500mL 用大约175 mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2(图1-1、1-2),用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。 稀释液:用蒸馏水稀释1.25mL贮存液至1000mL,分装于合适容器
霉菌的形态观察实验
实验方法原理 霉菌自然生长状态下的形态,常用载玻片观察,此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上,培养后用显微镜观察。此外,为了得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性,将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上,然后将长菌的玻璃
微生物鉴定之培养基的制备程序
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。 (一)配料 按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。 (二)溶化
4℃下菌种保藏方法
1、液体石蜡保存法 先将液体石蜡灭菌,然后放于37℃恒温箱中,使水汽蒸发掉备用。再将需要保存的菌种在最适宜的斜面培养基中培养,用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡,注入已长好的斜面培养基上,用量以高出斜面顶端1cm为准。试管需直立,置4℃或室温下保存,一般无芽胞细菌可保存1年左右。 2、高
4℃下菌种保藏方法
1、液体石蜡保存法先将液体石蜡灭菌,然后放于37℃恒温箱中,使水汽蒸发掉备用。再将需要保存的菌种在最适宜的斜面培养基中培养,用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡,注入已长好的斜面培养基上,用量以高出斜面顶端1cm为准。试管需直立,置4℃或室温下保存,一般无芽胞细菌可保存1年左右。2、高层半固体琼脂石蜡保存
临床微生物培养基手册(一)
营养琼脂(普通琼脂) 成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升 琼脂(视天气,琼脂质量而定) 制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。 用途:作普通琼脂平皿。 血琼脂平板(BA) 制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待
灭菌后的琼脂培养基若未用完,可再重新融化使用吗?
《GB4789.28 -2013培养基的试剂和质量要求》标准中指出,含有活性化学物质或不稳定性成分的固体培养基也应即配即用,不可二次融化;因此对于一些已添加抗生素、卵黄、血清等不稳定成分的培养基,不可以再次融化使用。而对于一般的培养基(未开封启用),可使用沸水浴或采用有相同效果的方法使培养基融化,再
中药体外抗菌作用纸片实验
仪器、耗材 普通琼脂平板干燥药物纸片接种环小镊子金黄色葡萄球菌斜面实验步骤 1. 用灭菌接种环挑取适量金黄色葡萄球菌斜面培养物,从琼脂平板一侧开始,用密布划线法将细菌接种在平板上,边划线边转动平板,直到整个平板均匀划满为止,然后将接种环烧灼灭菌。2. 用经烧灼灭菌的小镊子夹取吸有定量药物的纸片1~5
中药体外抗菌作用纸片实验
仪器、耗材普通琼脂平板干燥药物纸片接种环小镊子金黄色葡萄球菌斜面实验步骤1. 用灭菌接种环挑取适量金黄色葡萄球菌斜面培养物,从琼脂平板一侧开始,用密布划线法将细菌接种在平板上,边划线边转动平板,直到整个平板均匀划满为止,然后将接种环烧灼灭菌。2. 用经烧灼灭菌的小镊子夹取吸有定量药物的纸片1~5片,
细菌保存(细菌,培养物,甘油,琼脂平板)
1.细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保存)
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保存)
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂 到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保
培养基的制备与微生物接种技术(2)
(9)搁置斜面:将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。(10)无菌检验:灭菌后的培养基放入37℃恒温箱中培养24h,以检验灭菌效果,无污染方可使用。(二)制备马铃薯蔗糖琼脂培养基1、配方:马铃薯(去皮)200g、蔗糖15—20g、琼脂2
常用培养基配置的配方
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1m